ISO发布关于如何有效使用发烧检测设备的技术报告

最近ISO发布了如何在诸如国际机场之类的关键场所最佳使用发烧检测医疗设备的新的技术报告，该技术报告将有助于公共卫生主管部门遏制诸如H1N1流感病毒这样的传染病传播，从而防止其在全国流行。     

甲型H1N1流感专家谈

截至北京时间2009年5月16日23时30分，世界卫生组织（WHO）确认全球37个国家和地区共有甲型H1N1流感确诊病例8451例。基因序列分析显示，引发此次疫情的流感病毒包含了猪、禽和人三种流感病毒的基因片断，是一种新型“组合流感病毒”。针对此次疫情，世卫组织负责人近日表示，甲型H1N1流感病毒的全球性扩散预计将持续，且该病毒致病的严重程度可能因不可知因素而改变。当前世界面临一个非常不确定的时刻。     

清远市患儿呼吸道病原学的流行性病学规律

目的:观察清远市患儿呼吸道病原学的流行性病学规律。方法:选取本院呼吸道感染患儿1000例,采用九项呼吸道感染病原体IGM抗体检测试剂进行检测,观察记录患儿感染病原体类型及发病时间与患儿年龄和季节的关系。结果:患儿混合感染率秋季最多,其次为春季,且秋季感染率明显高于其他季节(P<0.05);肺炎支原体以2岁以下患儿感染最多,占肺炎支原体总检出率的17.6%;病毒总检出率为38.3%,说明本市患儿呼吸道感染仍以病毒感染为主。结论:急性呼吸道感染是常见的疾病,且引起呼吸道感染的病原体种类繁多,如能了解一个地区的病原体分布情况,可以为治疗起到指导作用,并且能减少抗生素的滥用,具有深远的临床意义。     

共表达流感病毒基质蛋白1和基质蛋白2基因的重组杆状病毒的构建

目的构建共表达流感病毒基质蛋白1(matrix protein 1,M1)和基质蛋白2(M2)基因的重组杆状病毒。方法扩增流感病毒A/PR/8/34株的M1和M2全长基因,并将其分别插入到p Fast Bacdual(p FBD)载体的两个多克隆位点,筛选出阳性重组转座载体p FBD-M1/M2,将其转化含有穿梭载体Bacimd的感受态DH10Bac细胞,经同源重组获得重组穿梭载体r Bacmid-M1/M2,在脂质体介导下转染sf9昆虫细胞,包装出重组杆状病毒r Bac-M1/M2。采用噬斑形成法检测重组病毒滴度,PCR法检测重组病毒基因组M1和M2基因插入情况,间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay,IFA)和Western blot法检测M1和M2基因的表达。结果经PCR鉴定重组穿梭载体r Bacmid-M1/M2构建正确;第3代r Bac-M1/M2滴度为1×108 pfu/ml;感染r Bac-M1/M2的sf9昆虫细胞经PCR扩增,可见3 600 bp的条带;可在感染细胞的胞内和胞膜上检测到明显的特异性黄绿色荧光;感染r Bac-M1/M2的细胞裂解上清与鼠抗流感病毒(PR8株)多克隆抗体发生特异性反应,在相对分子质量约26 000及11 000处可见特异性反应条带。结论成功构建了共表达H1N1亚型流感病毒M1和M2基因的重组杆状病毒,为构建流感病毒样颗粒以及研制新型广谱流感疫苗奠定了基础。     

H1N1猪流感病毒感染猪血管内皮细胞后内参基因的筛选

旨在评价H1N1猪流感病毒感染猪血管内皮细胞(PUVEC)后,肽基脯氨酰异构酶A(Ppia)、β-肌动蛋白(Actb)、核糖体蛋白L4(Rpl4)、酪氨酸3/色氨酸5-单加氧酶激活蛋白(Ywhaz)和甘油醛-3-磷酸脱氢酶(Gapdh)等5个内参基因的稳定性.采用Real-time RT-PCR方法测定H1N1 SIV感染PUVEC后3、6、9、12、15、18、24和30h时5个内参基因mRNA的表达水平,未感染PUVEC为对照,采用2-△Ct值对内参基因进行相对定量,应用Genorm软件对其稳定性进行评价.结果表明,5个内参基因的稳定性由高到低分别为Ppia和Rpl4、Ywhaz、Actb、Gapdh,其中Ppia和Rp14稳定性相同.据此可知,Ppia和Rpl4在所选的5个内参基因中是研究H1N1 SIV与机体互作理想的2个内参基因.     

享不尽的醋美味

从2003年的非典型性肺炎的流行,2008年安徽阜阳还发生口蹄疫,到2009年的甲型H1N1流感,都属病毒的变种或变异种,人们又想起提味杀菌的醋,虽然醋本身不一定能杀灭甲型H1N1流感病毒,但在当今吃醋、饮醋成为时尚时,在家里做些酸溜溜的"醋"味佳肴,还是能为健康筑起一道防护墙。     

基于血凝素的新型流感疫苗的研究进展

现有流感疫苗虽然能够预防季节性流感,但不能有效防控流感大流行。在本世纪初人类社会面临H5N1禽流感和H1N1猪源流感等大流行威胁的前提下,欧美各国政府和疫苗企业加速了新型流感疫苗的研发进程。血凝素是现有流感疫苗的主要有效成分,也是诱生保护性抗体的主要抗原,因此成为新型流感疫苗抗原设计的热门靶点。本文就近年来基于血凝素的新型流感疫苗的研究进展作一综述。     

流感病毒裂解工艺的优化

目的探讨影响流感病毒裂解的因素,优化流感病毒裂解工艺。方法分别在不同裂解时间(Triton X-100裂解1、2、3和4 h)、不同终浓度的裂解剂(终浓度为0.5%、0.6%、0.7%和0.8%的Triton X-100)、不同总蛋白浓度(2 000、3 000和4 000μg/ml)及不同的离子强度[终浓度为0.01、0.05、0.1和0.5 mol/L的PBS(p H 7.2)]下,对流感病毒进行裂解,电镜下观察病毒裂解效果,同时采用免疫单扩散法检测血凝素含量,Lowry法检测总蛋白含量,计算蛋白含量/血凝素含量比值(裂解后病毒纯度)及血凝素回收率,确定最佳裂解工艺参数。结果当裂解前病毒纯化液蛋白含量范围为2 000~3 000μg/ml,PBS终浓度为0.1 mol/L时,利用终浓度为0.7%~0.8%的Triton X-100裂解流感病毒2 h,可获得最佳裂解效果。结论确定了流感病毒最佳裂解参数,优化了流感病毒裂解疫苗生产中的裂解工艺。     

低血清培养Vero细胞和流感病毒条件的优化

目的优化低血清培养Vero细胞和流感病毒的条件,为开发Vero细胞流感疫苗奠定基础。方法分别在DMEM/F12和SLM-199培养基中,添加不同浓度的血清,培养Vero细胞,观察细胞连续传代的生长状态;接种流感病毒后,检测病毒培养液不同pH值、不同浓度TPCK-胰酶和病毒不同接种量对病毒血凝效价的影响。结果用SLM-199在1.0%血清浓度下培养的Vero细胞接种流感病毒血凝效价较高,病毒培养液pH值为7.2,TPCK-胰酶含量为1.0μg/ml,接种病毒MOI为1.0时,72h收获的病毒血凝效价最高。结论已筛选出低血清培养Vero细胞和流感病毒的适宜条件。