哺乳动物不同种群蛋白磷酸酶基因家族的序列比较

蛋白磷酸酶(PPP)家族在体内参与调节多种重要的生理功能,包括细胞周期、细胞生长及分化等过程。通过对在信号转导中起着重要作用的PPP基因进行序列比对,研究人、猪、大鼠、小鼠以及大猩猩的PPP基因家族的进化。结果表明:除了ppp1r3a基因序列分化较晚,基因保守性略高外,其它蛋白磷酸酶基因家族序列分化较早,分支较大,但在分化后保守性高。     

BQC法与COC法测定乳品中ALP活度的比较

在弱碱条件下，磷酸酚二钠会被碱性磷酸酶(ALP)催化水解生成苯酚，苯酚在硫酸铜的催化下能同显色剂2，6-二氯醌氯亚胺(CQC)或2，6-二溴醌氯亚胺(BQC)反应生成稳定的蓝色靛酚，测定兰色靛酚定吸光度，并与标准系列比较定量，就可测定各类乳品中ALP活度，这两种方法可用于区别生鲜乳品和巴氏杀菌乳品，并可有效判定乳制品巴氏杀菌的效果。本文比较了BQC法与CQC法测定乳品的ALP活度，结果显示选择2，6-二氯醌氯亚胺(CQC)作显色剂较为理想。     

酸性磷酸酶试纸的制作

在刑事物证检验中，精斑是检验强奸案的常用物证，因此做好精斑检验十分重要。酸性磷酸酶（acidphosphatase，简称ACP）试验，以其灵敏度极高和简便、直观而成为基层法医物证检验人员中最常用的精斑预试验确证方法，但其缓冲液及显色剂的配制很繁琐，并且容易失效（4℃冰箱中的储存期为半个月左右），需经常配制，致使试剂的作用效率极低，造成药品的浪费，又不便于法医临场检案携带。笔者通过多次试验，证明定性滤纸具有吸水性强、均匀吸附电解质、易干燥等特点，将ACP试验用试剂吸附于定性滤纸上晾干，就得到ACP试纸。现将ACP试纸的…     

免疫磁性微珠在人血清载脂蛋白APoB_(100)的酶免疫检中的应用

用悬浮聚合法制备了直径在0.81～2.83μm胺基磁性微珠;用戊二醛法对ApoB_(100)单抗进行了碱性磷酸醇的标记,并成功地进行了ApoB_(100)蛋白的定量检测。     

氯氰菊酯急性暴露对斑马鱼钙调磷酸酶信号的调节

以亚致死剂量氯氰菊酯对斑马鱼急性染毒后,利用相对定量反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)研究斑马鱼钙调磷酸酶通路上几个关键信号分子在染毒前后mRNA水平的改变.结果提示氯氰菊酯能有效诱导斑马鱼钙调磷酸酶信号途径上某些基因的转录.     

人磷脂酰肌醇4-磷酸酶Ⅱ型重组慢病毒载体的构建及其在人雄激素抵抗型前列腺癌PC3细胞中的表达

目的 构建人磷脂酰肌醇4-磷酸酶Ⅱ型(inositol polyphosphate 4-phosphatase type Ⅱ,INPP4B)重组慢病毒表达载体,并检测其在人雄激素抵抗型前列腺癌细胞株PC3中的表达.方法 以人工合成的人INPP4B基因为模板,PCR扩增目的基因片段,克隆入pGC-FU载体构建重组质粒pG...     

不同质粒表达大肠杆菌碱性磷酸酶的研究

目的比较以pET-30a和pET-22b两个质粒表达碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)的活性差异。方法以质粒pET-30a-AP为模板,克隆大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)ATCC 25922的碱性磷酸酶成熟肽基因,并构建重组表达质粒pET-22b-AP。将这2种表达质粒转化到E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达AP。对温度和甲醇对AP活性的影响进行研究。结果 pET-30a-AP所产AP浓度约为pET-22b-AP 10倍时,才可达到类似催化效果;表达自pET-22b-AP质粒的AP对甲醇的耐受性略好于pET-30a-AP。结论本研究可为AP的生产及基因工程抗体-AP融合蛋白在类似ELISA等免疫检测方法的应用提供重要的参考依据。