产气肠杆菌磷酸酶基因克隆表达及其特性

产气肠杆菌(E.aerogenes IAM1183)的酸性磷酸酶,具有特异转移磷酸基团到核苷5′-位的功能,是极具应用价值的酶。本研究以产气肠杆菌(E.aerogenes IAM1183)的酸性磷酸酶(PhoC)为研究对象,采用基因工程手段,克隆了phoC基因,构建成酸性磷酸酶(PhoC)与麦芽糖结合蛋白(MBP)的融合表达载体pMKL-c2x-phoC,把其转化到不同的宿主,进行催化研究。结果发现构建成的基因工程菌具有高于原始菌催化5′-IMP生成的能力、水解5′-IMP的活性降低、酶促反应的最适pH值近中性等特点。     

生物玻璃矿化性能及其离子溶出对成骨细胞功能的影响

通过体外矿化实验, 对比研究了熔融法生物玻璃45S5和溶胶－凝胶法生物玻璃58S、77S的生物矿化性能的差异;并运用了这三种生物玻璃的DMEM(Dulbecco’s Modified Eagle Medium)浸提液对MC-3T3细胞进行培养, 以考察不同生物玻璃在培养液中的离子溶出对成骨细胞增殖及ALP(碱性磷酸酶)活性的影响. 通过体外矿化实验可以发现, 77S的生物矿化性能相对45S5和58S较差, 在SBF溶液(模拟体液)中浸泡96h只能形成HA(羟基磷灰石)晶体, 45S5和58S则能生成类骨HCA(碳酸羟基磷灰石)晶体; 但细胞培养实验发现, 77S浸提液中培养的细胞, 其细胞增殖和ALP活性都明显高于45S、58S和对照组. 由此认为, 一定的离子浓度范围内, Si离子的存在有利于成骨细胞的增殖与分裂.     

法鲁氏四联症心肌毛细血管结构及其碱性磷酸酶变化的电镜观察

法鲁氏四联症心肌毛细血管结构及其碱性磷酸酶变化的电镜观察＊＊卫生部科研基金资助课题石玉秀王占友祝素文（中国医科大学组织胚胎学教研室，沈阳１１０００１）我们已经报告了法鲁氏四联症心肌细胞超微结构变化的研究，本研究采用电镜酶细胞化学技术及透射电镜技术对法...     

培养脊神经节细胞酸性磷酸酶的超微分布

我们已经先后报道了线状溶酶体 (ＮＬＹ)在中枢神经细胞 (大脑大锥体细胞 ;小脑浦肯野氏细胞 ;脊髓前角运动细胞 )的分布[1] ,但至今未见神经节细胞ＮＬＹ的报道。本研究采用酸性磷酸酶[2 ] (ＡｃｉｄＰｈｏｓｐｈｏｔａｓｅ ,ＡＣＰ)的电镜酶细胞化学技术显示初代培养的胎鼠脊神经节细胞ＡＣＰ的分布 ,并进行了电镜观察 ,旨在探讨脊神经节细胞ＮＬＹ的存在和研究其生物学特性提供依据。材料与方法实验动物选用妊娠 14日的健康孕鼠 (Ｗｉｓｔａｒ种系 ) ,拉断头颈处死消毒后剖开子宫 ,取出胎鼠 ,超净工作台中 ,解剖镜下分离出胎鼠脊神经节 ,…     

人脑膜瘤磷酸酶电镜细胞化学研究

碱性磷酸酶和5＇—核苷酸酶活性主要定位于脑膜瘤毛细血管内皮细胞膜上。碱性磷酸酶活性还定位于砂粒型脑膜瘤细胞质膜和内质网上。Na~+-K~+-ATP酶活性定位于脑膜瘤细胞质膜上。酸性磷酸酶和胞嘧啶单核苷酸酶活性定位于瘤细胞溶酶体。焦磷酸硫胺素酶活性定位于高尔基体和内质网。文中对不同亚型脑膜瘤酶活性强度和定位差异进行了讨论。     

抗酶单克隆抗体制备中检测方法的探讨

本文比较了反向间接酶联免疫吸附法和传统的间接酶联免疫吸附法。发现前者更适合作为抗酶单克隆抗体制备中的筛选方法。并对试验中的各种反应条件,包括羊抗鼠IgG包板、待检单抗和酶反应的最适浓度及底物缓冲液的选择进行了探索,最后用该法筛选5次融合后培养的杂交瘤上清,对其结果进行了分析和评价。     

醋蛋,醋蛋皮中活性钙在动物体内吸收和利用的研究

探讨将鸡蛋及蛋皮用１０％醋酸浸泡烘干，以此作为钙源饲以大鼠后的动物增重与饲料利用率；观察醋酸钙对大鼠生长发育和对血钙、尿钙、粪钙和股骨钙含量的影响。结果表明，醋蛋皮组股骨钙的存留率；活性钙在体内的吸收率，存留率与碳酸钙与全脂奶粉无显著差异。     

BQC法与CQC法测定乳品中ALP活度的比较

在弱碱条件下,磷酸酚二钠会被碱性磷酸酶(ALP)催化水解生成苯酚,苯酚在硫酸铜的催化下能同显色剂2,6—二氯醌氯亚胺(CQC)或2,6--二溴醌氯亚胺(BQC)反应生成稳定的蓝色靛酚,测定兰色靛酚定吸光度,并与标准系列比较定量,就可测定各类乳品中ALP活度,这两种方法可用于区别生鲜乳品和巴氏杀菌乳品,并可有效判定乳制品巴氏杀菌的效果。本文比较了BQC法与CQC法测定乳品的ALP活度,结果显示选择2,6—二氯醌氯亚胺(CQC)作显色剂较为理想。     

乳中碱性磷酸酶活性测定方法研究进展

碱性磷酸酶(ALP,EC 3.1.3.1)是乳中天然存在的一种酶,该酶作为一种热处理强度指指标被广泛应用于评价牛奶巴氏杀菌是否彻底或巴氏杀菌后是否污染有生鲜乳.关于乳中ALP活性的测定不断有新的方法提出,本文对乳中ALP活性的测定方法进行了综述.     

Deferiprone对染铝小鼠肾脏ATP酶、黄嘌呤氧化酶的影响

目的 探讨1,2-二甲基-3-羟基-4-吡啶酮(DFP)对AlCl3染毒小鼠肾脏三磷酸腺苷酶(ATPase)、黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XO)的影响.方法 50只健康昆明种小鼠,按体重随机分为5组:阴性对照组、铝染毒组、DFP低、中、高剂量组.小鼠经三氯化铝水溶液[200 mg/(kg·d)]灌胃...