红豆杉细胞两液相体系中紫杉醇的分离研究

基于紫杉醇的光敏性和热敏性特点 ,且以三元萃取方法从两液相培养红豆杉细胞的有机溶剂中提取紫杉醇又不理想的情况下 ,本文提出了有机溶剂 -紫杉醇 -水-甲醇的多元萃取方法 ,并分别测定出甲醇在甲醇 -水 -油酸和甲醇 -水 -混合有机溶剂 (油酸和邻苯二甲酸二丁酯 )休系分配系数变化趋势图 ;分别测定出紫杉醇在甲醇 -水 -油酸和甲醇 -水 -混合有机溶剂体系分配系数变化趋势图。     

液相色谱-串联质谱法快速测定人血浆中紫杉醇的含量

建立测定人血浆中紫杉醇含量的LC-MS/MS方法。取正常人血浆300μL,加入50ng/mL多西他赛溶液100μL,再加入1.2mL无水乙醚涡旋震荡提取2min后,离心(12000转,15min),取上清液吹干,然后用80%乙腈300μL溶解,取10μL进行LC-MS/MS测定。LC条件:采用ASB C_(18)柱(2.1×50mm,5μm),流动相:乙腈-4mmol/L醋酸铵(80:20,V/V),流速为0.3mL/min。质谱条件:ESI电离源,正离子模式,多反应监测(MRM)方式,用于定量分析的离子对分别为m/z 876.5→m/z 308.1(紫杉醇)和m/z 830.6→m/z 549.2(内标,多西他赛)。该方法紫杉醇的线性范围为0.2～1000ng/mL,最低检测限为0.2ng/mL。本方法操作简便、快速、结果准确、可用于该药物的含量测定,同时也可为临床药代动力学研究提供参考。     

两亲性温度及pH敏感性嵌段共聚物胶束的制备及其负载紫杉醇释放行为的研究

采用可逆加成-断裂链转移自由基聚合法成功地制备了以聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)为疏水性内核,聚丙烯酸-b-聚异丙基丙烯酰胺(PAA-b-PNIPAM)为亲水性外壳的具有核-壳结构的两亲嵌段共聚物聚甲基丙烯酸甲酯-b-聚丙烯酸-co-聚异丙基丙烯酰胺(PMMA-b-(PAA-co-PNIPAM)).此嵌段共聚物以聚异丙基丙烯酰胺作为温度敏感段、以聚丙烯酸作为pH敏感段,具有温度、pH值双重敏感性.通过一系列测试分析,结果表明嵌段共聚物在水溶液中能够自组装形成直径为200nm的胶束颗粒.以嵌段共聚物PMMA-b-(PAA-co-PNIPAM)为载体,成功负载了抗癌药物紫杉醇(PTX),模拟了这种载药胶束在人体环境中的控释行为.结果表明载药胶束在人体正常生理温度(37℃)和病变温度(40℃)下的释放速率和累积释放量都要比室温(25℃)下大很多.此嵌段共聚物兼具温度、pH值双重敏感性,在药物缓释方面有潜在的应用前景.     

红豆集团紫杉醇提炼厂投产

我国规模最大的红豆集团紫杉醇提炼厂于9月28日正式投产，紫杉醇针剂厂同时奠基。[第一段]     

伪三元相图在紫杉醇自乳化制剂筛选中的应用

分别以油酸正丁酯、十四酸异丙酯为油相，吐温85、Cremophor-EL为表面活性剂，无水乙醇、异丙醇、1，2-丙二醇、正丁醇为助表面活性剂，在37℃水浴中，用水滴定上述三组分不同配比的混合物，绘制伪三元相图，并对自乳化系统进行研究。结果表明十四酸异丙酯为油相、聚氧乙烯蓖麻油为表面活性剂、正丁醇为助表面活性剂，SA／CoSA=4：1紫杉醇有较好的稳定的乳化体系。     

HPLC测定曼地亚红豆杉枝叶中紫杉醇含量

曼地亚红豆干杉枝叶粗提液采用正己烷萃取,碳酸钾水溶液碱洗两步除杂处理后,再用HPLC测定分析紫杉醇含量。采用外标峰面积法进行定量分析。经分析曼地亚红豆干杉枝叶中紫杉醇含量为0.012%,RSD为1.46%。     

关于中国野生植物保护协会第一届红豆杉保育委员会工作汇报

2006年11月29日,在国家林业局的关心指导下,中国野生植物保护协会红豆杉保育委员会正式成立。成立以来,红豆杉保育委员会把"改善城市生态环境"作为光荣使命,在保护和发展红豆杉资源、普及和推广红豆杉相关知识、鼓励红豆杉人工技术创新、开展国际合作与交流等方面取得了一些成绩,从而加强了野生红豆杉的保护,促进了人与自然的和谐,推进了和谐社会的建设。     

周耀庭再次当选全国红豆杉保育委员会主席

6月6日,第二届全国红豆杉保育委员会全体会议暨全国红豆杉产业发展座谈会在北京召开。因为周耀庭在红豆杉的保护和培育、人工红豆杉的综合开发利用、品牌创建等方面的卓越贡献,这次会议上,周耀庭再次当选为全国红豆杉保育委员会主席。李楠、祖元刚、梅兴国、邱德有、孙启武等专家及全国100多家企业参加了会议。     

液相色谱-串联质谱法测定白酒中紫杉醇和三尖杉宁碱含量

目的建立液相色谱-串联质谱(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)检测白酒中红豆杉特征组分紫杉醇和三尖杉宁碱含量的方法。方法样品经甲醇-水(7:3,V/V)提取液提取,采用水(A)和甲醇(B)作为流动相进行梯度洗脱,外标法定量,质谱采用电喷雾电离正模式(positive electrospray ionizationm,ESI+)和多离子检测模式(multiple reactions monitoring,MRM)对紫杉醇和三尖杉宁碱的定量离子、定性离子进行监测。结果在50～1000 ng/L范围内,紫杉醇和三尖杉宁碱呈良好的线性关系,相关系数r2不小于0.995,方法的检出限为2.5μg/kg,定量限为8.3μg/kg。紫杉醇和三尖杉宁碱在2.5、7.5、25.0μg/kg 3个水平下加标回收率为96.4%～115.6%,相对标准偏差不超过2.53%(n=6)。用该方法检测市售红豆杉果实酒、红豆杉树皮酒,均检测出紫杉醇和三尖杉宁碱。结论该方法便捷、高效、准确、灵敏,可用于测定非法添加红豆杉保健酒中紫杉醇和三尖杉宁碱含量。     

人卵巢癌耐药细胞株的放射敏感性研究

为了研究具有耐药性的卵巢癌细胞系对放射线治疗的影响,以人卵巢癌细胞株A2780及其紫杉醇耐药株A2780/Taxol为研究对象,以MTT法检测细胞的药物敏感性并评判分析细胞放射敏感性;克隆形成实验分析细胞放射抗拒性;实时荧光定量PCR分析照射前后细胞耐药基因MDR1的变化。实验结果显示：A2780／Taxol的耐药指数为43．96;随着放射剂量增大,A2780细胞和A2780／Taxol细胞的相对存活率明显下降,以A2780细胞明显（p〈0．05）;A2780细胞及其耐药A2780／Taxol细胞仇值分别为4．90和6．06,D0越大,放射抗拒性越强,表明耐药A2780／Taxol细胞的放射抗性强于A2780细胞（p〈0．01）;照射前及不同剂量照射作用后,耐药基因MDR1在A2780／Taxol细胞中的表达均明显高于A2780细胞（p=0．000）。这些结果揭示耐药卵巢癌细胞株A2780／Taxol对辐射具有耐受性,表明卵巢癌细胞系具有放化疗交叉耐受性,并且射线和药物诱导卵巢癌细胞耐药基因MDR1的过表达,可能是引起放化疗交叉耐受性的原因之一。