腮腺炎病毒蛋白组分疫苗的免疫效果

目的观察腮腺炎病毒蛋白组分疫苗的免疫效果。方法SP株腮腺炎病毒液经灭活、浓缩、裂解后,采用SP SepharoseTM Fast Flow阳离子层析柱及Sepharose CL-4B分子筛层析柱纯化,收集各峰样品,经12%SDS-PAGE、Western blot分析及HPLC检测。并取第1峰样品免疫ICR及BALB/c小鼠,检测血清中和抗体效价及CTL杀伤活性。结果所收集的第1峰样品为单一的腮腺炎病毒蛋白组分。免疫ICR小鼠可诱导产生中和抗体,其免疫后各检测时间点的GMT水平与减毒活疫苗组相比,差异均无统计学意义;免疫BALB/c小鼠可诱导产生针对HN肽段的CTL杀伤活性,而减毒活疫苗组则未能诱导此特异性CTL反应。结论腮腺炎病毒蛋白组分疫苗在小鼠体内可诱导特异性细胞免疫和体液免疫应答,为新型腮腺炎疫苗的研制提供了实验依据。     

携带白细胞介素-2/肝细胞生长因子4-kringle拮抗剂双基因的减毒沙门菌对小鼠免疫功能的影响

目的 研究携带白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)/肝细胞生长因子4-kringle拮抗剂（4-kringle antagonist of hepatocyte growth factor,NK4）双基因的减毒沙门菌（Ty21a-pIRES-IL-2-NK4,命名为TPIN）对小鼠体液及细胞免疫功能的影响。方法 将18只BALB/c小鼠（雌雄各半）随机分为对照（胃管饲服1.5 mL 10%NaHCO3）、Ty21a（胃管饲服0.1 mL Ty21a）、TPIN（胃管饲服0.1 mL TPIN）组,6只/组。初次免疫7 d后加强免疫,共2次,给药第21天,经眼球采血分离血清,ELISA法检测血清IgG抗体水平;无菌分离小鼠胸腺和脾脏,体外分别用Ty21a、TPIN刺激培养的小鼠脾细胞,72 h后,CCK-8法检测小鼠脾细胞增殖能力,ELISA法检测小鼠脾细胞细胞因子表达水平;称重小鼠脾脏和胸腺,计算脾和胸腺指数,并进行脾和胸腺组织HE染色。结果 与对照和Ty21a组相比,TPIN组小鼠血清IgG水平（F=111.74,P <0.01）以及脾细胞上清IFNγ、IL-...     

干扰素用于重组乙肝疫苗的佐剂作用

目的　为了提高乙肝疫苗的免疫原性。方法　在重组乙肝疫苗中加入不同单位的干扰素构成复合佐剂 ,通过小鼠腹腔和肌肉两种免疫途径 ,对疫苗的体液免疫和细胞免疫进行了检测。结果　干扰素作为复合铝佐剂 ,无论是对体液免疫还是细胞免疫 ,效果均较对照明显提高。结论　不同亚型的IFN作为乙肝疫苗佐剂 ,均可提高疫苗的免疫原性。     

葡萄籽提取物复合胶囊的免疫调节作用研究

经口连续灌胃30 d,采用免疫器官重量法、小鼠迟发型超敏反应、溶血素测定法、单核吞噬细胞功能测定法(小鼠碳粒廓清法)等方法,考察了葡萄籽提取物复合胶囊的免疫调节作用.结果表明,与阴性对照组比较,各剂量组小鼠体重、小鼠脾脏/体重比值和胸腺/体重比值无明显差异,高剂量组小鼠的细胞免疫功能、体液免疫功能及非特异性免疫功能显著提高,证明葡萄籽提取物复合胶囊具有增强小鼠免疫功能的作用.     

转人HLA-A2基因小鼠对adr亚型重组乙型肝炎疫苗(汉逊酵母)的免疫应答

目的对汉逊酵母表达的adr亚型重组乙型肝炎(简称乙肝)疫苗(adr疫苗)进行免疫学特性与功能学研究。方法采用adr疫苗与酿酒酵母表达的重组乙肝疫苗(adw疫苗)免疫转人HLA-A2基因小鼠,免疫剂量2μg/0.2 ml,于初免3周后进行第2次免疫。于第2次免疫1周后,采血,分离血清,经ELISA法检测小鼠血清中抗-HBs抗体水平。同时取小鼠脾脏,制备脾细胞悬液,采用HLA-A2/WLSLLVPFV五聚体荧光标记流式细胞术分析细胞中特异性抗乙肝病毒表位的CTL比例。结果 adr疫苗与adw疫苗均可诱导转基因小鼠产生抗乙肝表面抗原抗体,且抗体水平差异无统计学意义(P>0.05),2种疫苗对转基因小鼠的体液免疫应答的增强作用相似;adr疫苗诱导的乙肝表面抗原特异性CTL应答作用较adw疫苗更明显(P<0.05)。结论 adr重组乙肝疫苗(汉逊酵母)诱导转基因小鼠的体液免疫应答作用与现有adw疫苗相似,但其诱导机体产生细胞免疫应答的能力更显著,可能具有更加良好的预防HBV感染作用和前景。     

皮内注射用布氏菌活疫苗的免疫学评价

目的探讨布氏菌活疫苗皮内注射小鼠产生的体液免疫、细胞免疫应答及免疫保护力。方法将30只小鼠随机分为3组,每组10只,分别为低剂量组(5×107个/只)、高剂量组(2×108个/只)和生理盐水对照组,3组均经后肢皮内注射布氏菌活疫苗,0.1 ml/只。免疫4周后,摘眼球取血,分离血清,制备脾脏淋巴细胞,ELISA法检测小鼠血清中抗Br-PPD Ig G抗体效价;ELISPOT法检测分泌IFNγ、IL-4的脾脏淋巴细胞数;ELISA法检测体外再刺激后小鼠脾脏淋巴细胞分泌的IFNγ水平;流式细胞术对T细胞亚群进行分类。用羊布氏菌M5弱毒株攻击免疫小鼠,通过脾脏荷菌量评价布氏菌活疫苗的免疫保护作用。结果低、高剂量组小鼠血清中抗Br-PPD Ig G抗体效价均较高,几何平均滴度分别为642和557;低、高剂量组小鼠在Br-PPD抗原刺激下,分泌IFNγ、IL-4的脾脏淋巴细胞数以及脾脏淋巴细胞分泌的IFNγ含量,与对照组相比差异均有统计学意义(P均<0.05);CD4+IFNγ+、CD4+IL-4+比例均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05);低、高剂量组小鼠脾脏荷菌量为0,对照组小鼠为(5.13±0.16)log10 CFU。结论采用皮内注射布氏菌活疫苗的方式免疫小鼠后,能获得较强的体液免疫、细胞免疫应答及免疫保护力。     

肠道病毒71型灭活疫苗的小鼠细胞免疫效果

目的评价肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)灭活疫苗诱导小鼠的细胞免疫效果。方法分别以不同剂量(1、2.5、5、10μg/ml,均含铝佐剂1 mg/ml)、不同剂型(含铝佐剂1 mg/ml或不含铝佐剂)、不同免疫剂次(单次免疫或加强免疫)EV71灭活疫苗经腹腔免疫小鼠,0.5 ml/只,均设铝佐剂对照组(仅注射铝佐剂1 mg/ml)。采用经典小鼠树突状细胞(dendritic cell,DC)培养方法制备正常小鼠DC,瑞氏染色法检测细胞形态,流式细胞术分析其表型及纯度;免疫磁珠分选法(magnetic activated cell sorting,MACS)分离小鼠脾脏CD4+、CD8+T淋巴细胞,流式细胞术检测细胞纯度。ELISPOT法检测各组免疫小鼠CD4+、CD8+T淋巴细胞分泌IL-2、IL-4、IFNγ的水平;细胞因子试剂盒检测小鼠淋巴细胞培养上清及小鼠血清中细胞因子的水平。结果 DC形态不规则,表面树枝状突起形态不同,细胞核较大且不规则;DC纯度为(81.39±9.24)%,可高水平表达MHⅡ(I-A/I-E)类分子,中度表达CD86和CD40。CD4+、CD8+T细胞纯度分别为95.27%和94.08%。随着疫苗免疫剂量的增加,CD4+T细胞分泌IL-2、IL-4、IFNγ及CD8+T细胞分泌IFNγ的SFC显著增加,5μg/ml疫苗组达最大值,且明显高于其他组(P均0.05);5μg/ml疫苗组淋巴细胞培养上清中IFNγ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、IL-5、TNF-α含量明显高于其他组(P0.05);1、2.5、5μg/ml疫苗组血清中IL-10含量明显高于铝佐剂对照组(P0.05),1μg/ml疫苗组明显低于2.5及5μg/ml疫苗组(P0.05)。含铝佐剂疫苗组CD4+T细胞分泌IL-2、IL-4、IFNγ及CD8+T细胞分泌IFNγ的SFC、淋巴细胞培养上清中IL-2、IFNγ、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-13、TNF-α水平及血清中IL-10含量均明显高于无铝佐剂疫苗组(P均0.05)。加强免疫组CD4+T细胞分泌IL-2、IL-4、IFNγ及CD8+T细胞分泌IFNγ的SFC、淋巴细胞培养上清中IL-2、IFNγ、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-13、TNF-α水平、血清中IL-10含量均明显高于单次免疫组(P均0.05)。结论 EV71灭活疫苗可诱导小鼠产生特异性细胞免疫反应,本实验为其进一步人体临床试验研究奠定了基础。     

嗜酸乳杆菌复合益生菌片对小鼠免疫功能的影响及机制研究

为探究嗜酸乳杆菌复合益生菌片在增强免疫功能方面的作用,该研究分别将低、中、高剂量（0.167、0.333、1.000 g/kg bw）的复合益生菌片经口灌胃给ICR小鼠,从小鼠体重、脏器/体重比值、细胞免疫、体液免疫和非特异性免疫功能变化等方面,综合评价复合益生菌对小鼠免疫功能的影响。研究结果表明该复合益生菌片具有良好的安全性,与对照组相比,喂食复合益生菌片不影响小鼠体重及脏器/体重比值,但可显著增加小鼠迟发型变态反应（delayedtype-hypersensit,DTH）、淋巴细胞转化、抗体生成细胞数、半数溶血值等指标。此外,喂食该复合益生菌片还可提高小鼠单核-巨噬细胞吞噬能力和自然杀伤细胞（natural killer cell,NK）活性。     

卵清蛋白肽对小鼠机体的免疫增强作用

对蛋白酶水解鸡卵清蛋白获得的肽类物质的理化特性及对免疫功能的调节作用进行研究。方法为凯氏定氮法测定蛋白质含量。多肽含量测定,首先经三氯醋酸沉淀样品中大分子蛋白质,按凯氏定氮法测定上清液的多肽含量。HPLC色谱法测定肽的分子量范围。免疫功能检查包括细胞免疫和体液免疫两项功能测定。与实验对照组比较,迟发型变态反应实验、小鼠半数溶血值测定实验、小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验及NK细胞活性测定实验均有显著增强作用。提示卵清蛋白肽对实验小鼠的机体具有免疫增强作用。     

玉米肽-香菇多糖螯合物对小鼠免疫功能的影响

研究玉米肽-香菇多糖螯合物(CPG)对小鼠免疫功能的影响。实验采用玉米肽为原料通过螯合香菇多糖制备具有免疫功能的玉米肽香菇多糖螯合物(CPG),研究玉米肽(CP)、香菇多糖(G)进行对比;玉米肽低、中、高剂量组(CP-L、CP-M、CP-H);玉米肽-香菇多糖低、中、高剂量组(CPG-L、CPG-M、CPG-H);香菇多糖低、中、高剂量组(G-L、G-M、G-H),对小鼠生长性能、体液免疫能力、细胞免疫能力等方面的功能活性。结果表明:CP、CPG、G均能提高小鼠的体重,CP-M、CP-H,CPG-L、CPG-M、CPG-H,G-H剂量组均能显著(P0.05)提高免疫器官指数,且CPG组较CP组的效果更加明显;CPG对小鼠巨噬细胞增殖能力和吞噬能力的提高效果优于CP,CP-H和CPG-L、CPG-M、CPG-H剂量组能显著(P0.05)提高机体免疫球蛋白IgA水平,CP-M、CP-H和CPG-L、CPG-M、CPG-H、G-H均能显著(P0.05)提高机体免疫球蛋白IgG;CPG较CP和G更能促进细胞从G1期向S期转化,有利于提高小鼠脾淋巴细胞增殖分化能力。这表明较玉米肽和香菇多糖而言,玉米肽-香菇多糖螯合物(CPG)可以通过促进小鼠机体生长性能、体液免疫能力水平、细胞免疫能力水平更好地发挥其免疫生物学活性,是一种潜在的免疫增强剂。