大豆多肽对前列腺癌PC-3细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨大豆多肽对前列腺癌PC-3细胞增殖及凋亡的影响,为临床应用大豆多肽治疗前列腺癌提供实验依据。方法用不同浓度的大豆多肽(5、10、15、20μmol/L)处理前列腺癌PC-3细胞不同时间(24、48、72 h),采用MTT法检测细胞的增殖活力,倒置显微镜观察细胞的形态,流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期。结果大豆多肽可抑制前列腺癌PC-3细胞的增殖,将细胞周期阻滞在G2/M期,诱导细胞凋亡,中晚期细胞凋亡趋势明显,且呈明显的剂量与时间依赖性;随着大豆多肽浓度的增加,前列腺癌PC-3细胞密度逐渐降低,边缘趋于圆滑,细胞间隙逐渐增大,局部可见部分已固缩的细胞及死亡的细胞碎片。结论大豆多肽可抑制前列腺癌PC-3细胞增殖,诱导细胞凋亡,在临床治疗前列腺癌方面具有广阔的应用前景。     

氨基葡萄糖对小鼠腹腔巨噬细胞免疫功能的影响

目的探讨氨基葡萄糖对小鼠腹腔巨噬细胞(PMФ)免疫功能的影响。方法用壳聚糖制备氨基葡萄糖纯品,通过体外实验测定其对小鼠PMФ增殖、吞噬中性红、产生NO和IL-1能力的影响。结果氨基葡萄糖能够显著增强PMФ对中性红的吞噬能力,提高NO和IL-1的生成量,而对PMФ的增殖能力无明显影响。结论氨基葡萄糖能够活化PMФ,增强小鼠的免疫功能。     

重楼提取液对人结肠癌SW480细胞增殖的影响及其作用机制

目的观察重楼提取液对人结肠癌SW480细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。方法采用不同浓度(10、20、40、80μg/ml)的重楼提取液,分别作用于体外培养的SW480细胞12、24、36和48h,采用MTT法检测其对SW480细胞的抑制率;并以半数抑制浓度的重楼提取液与体外培养的SW480细胞作用24h后,显微镜下观察细胞形态,并通过流式细胞术分析其对SW480细胞细胞周期的影响,RT-PCR和Western blot法分别测定SW480细胞干细胞因子(SCF)mRNA和蛋白表达的变化。结果各浓度重楼提取液对SW480细胞均有不同程度的抑制作用,且存在剂量-效应和时间-效应关系,重楼提取液作用后的SW480细胞出现变性、坏死的形态改变;经重楼提取液处理24h后,SW480细胞在S期的分布比例下降,G0-G1期和G2/M期细胞分布增多(P<0.05);同时SCF表达增高(P<0.05)。结论重楼提取液可能通过抑制肿瘤细胞的蛋白质与DNA合成,抑制肿瘤细胞的有丝分裂,进而抑制SW480细胞增殖,且其作用机制可能与SCF无关。     

东宫泉对黑素细胞增殖及其酪氨酸酶活性的影响

目的探讨东宫泉对黑素细胞增殖及其酪氨酸酶活性的影响。方法体外培养小鼠B16黑素瘤细胞,倒置显微镜下观察不同浓度东宫泉(将50倍浓缩液0、2、4、8、16、32、64倍稀释)对B16黑素瘤细胞形态的影响,MTT法检测不同浓度东宫泉对细胞增殖的影响,蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法测定不同浓度东宫泉对B16黑素瘤细胞酪氨酸酶活性的影响。结果经16倍稀释的东宫泉处理48h的B16黑素瘤细胞生长旺盛;东宫泉对B16黑素瘤细胞具有高浓度抑制、中低浓度激活的作用,8倍和16倍稀释为最佳激活浓度(P<0.05);东宫泉对酪氨酸酶亦具有高浓度抑制、低浓度激活的作用。结论东宫泉对黑素细胞增殖和酪氨酸酶均具有双向调节作用。     

人肝再生增强因子对人外周血单个核细胞增殖的影响及其机制

目的探讨人肝再生增强因子(hALR)对人外周血单个核细胞(PBMC)增殖的影响及其机制。方法梯度离心分离PBMC,将细胞分为正常对照组、刀豆蛋白A(ConA)(5mg/L)组和ConA(5mg/L)+hALR(30mg/L)组,分别培养10min、30min、1h、2h、4h后,MTT法检测各组各时间点细胞增殖水平,钙荧光指示剂法检测细胞内游离Ca2+浓度的变化,Western blot法检测细胞内胞外信号调节激酶(ERK)的磷酸化程度。结果4h内,各组细胞的增殖水平差异无统计学意义,但ConA组细胞增殖水平已表现出逐渐升高的趋势。正常对照组细胞内Ca2+浓度在加入Fluo-3/AM后2h达高峰,ConA组1h达高峰,ConA+hALR组10min达高峰。正常对照组细胞内磷酸化的ERK随培养时间的延长而逐渐减少;ConA组细胞内磷酸化的ERK在30min达高峰,之后逐渐降低;ConA+hALR组细胞内磷酸化的ERK在2h前明显低于ConA组。结论hALR可能通过影响细胞内Ca2+浓度的变化峰值和磷酸化的ERK,来抑制人PBMC的免疫功能,从而影响其增殖。     

新型含糖苷的吡唑类美白剂的合成与性能研究

近年来,熊果苷作为一种天然美白添加剂广泛应用于化妆品中。但是,它在美白效果、稳定性等方面还存在着或多或少的不足。本文中,笔者经过反复实验,用葡萄糖和甲氧基苯为原料,合成了一种新型熊果苷类似物,其在抑制黑色素细胞增殖的过程中,表现出了比熊果苷更强的性能。从而,为新型美白添加剂的研究开发,提供了新的思路和方向。     

胸腺蛋白口服液对小鼠胚胎成纤维细胞增殖的影响

<正>胸腺蛋白(thymus protein)是从健康乳猪新鲜胸腺中提取的具有生物活性的蛋白类水溶液,可用于胃溃疡和十二指肠溃疡的治疗。近年来,该产品在临床上越来越受到重视,但目前尚无生物活性的检测方法。本实验应用体外培养小鼠胚胎成纤维细胞(BALB/c 3T3),采用MTT[1]法检测胸腺蛋白口服液(修正药业集团北京修正制药有限公司生产,批号:20120501)促细胞增殖作用,为进一步用于治疗消化系统溃疡提供科学     

趋化因子CXCL12受体CXCR4 shRNA对胶质瘤细胞U87增殖及血管内皮生长因子、白细胞介素-8表达的影响

目的探讨趋化因子CXCL12受体CXCR4 sh RNA对胶质瘤细胞U87增殖及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)表达的影响,为胶质瘤的基因治疗提供实验依据。方法用脂质体Lipofectimine TM 2000分别将CXCR4 sh RNA载体p GPU6/GFP/Rac1-421和非特异质粒p GPU6/GFP/NC转染U87细胞,并设未转染组,转染后48 h,采用RT-PCR法检测各组细胞中CXCR4基因m RNA的转录水平;转染后24、48、72 h,采用MTT法检测细胞的增殖活力,ELISA法检测细胞培养上清中VEGF和IL-8的含量。结果转染p GPU6/GFP/Rac1-421可使U87细胞中CXCR4基因m RNA的转录水平、细胞体外增殖活力及细胞培养上清中VEGF和IL-8的含量均明显降低,与p GPU6/GFP/NC组和未转染组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论 CXCR4 sh RNA可下调U87细胞中CXCR4基因m RNA的转录,抑制细胞增殖,降低VEGF和IL-8的产生,提示CXCR4在胶质瘤发展过程中具有重要作用。     

雷公藤红素对卵巢癌SKOV3/DDP细胞的抑制作用及其机制

目的探讨雷公藤红素(celastrol)对卵巢癌顺铂(cisplatin,DDP)耐药细胞SKOV3/DDP的抑制作用及其机制。方法 MTT法检测不同浓度雷公藤红素对SKOV3/DDP细胞增殖的影响;显微镜下观察不同浓度雷公藤红素对SKOV3/DDP细胞形态的影响;流式细胞术检测不同浓度雷公藤红素对SKOV3/DDP细胞周期及凋亡的影响;细胞划痕试验检测不同浓度雷公藤红素对SKOV3/DDP细胞迁移能力的影响;Transwell体外侵袭试验检测不同雷公藤红素对SKOV3/DDP细胞侵袭能力的影响;Western blot法检测SKOV3/DDP细胞中凋亡及侵袭相关蛋白的表达水平。结果经雷公藤红素作用后,SKOV3/DDP细胞的增殖抑制率显著上升(P0.05);镜下观察SKOV3/DDP细胞数目显著减少(P0.05);G1期细胞比例明显升高(P0.05);细胞凋亡率显著增加(P0.05);细胞迁移距离明显减小(P0.05);穿膜细胞数目明显减少(P0.05);SKOV3/DDP细胞中Cyclin A、p-AKT、NF-KB、MMP-2、MMP-9和P-GP蛋白的表达水平均明显下降(P0.05)。结论雷公藤红素对SKOV3/DDP细胞抑制作用显著,为临床晚期失去手术机会卵巢癌患者的治疗提供了参考。     

沉默血管内皮钙黏蛋白基因对人高转移肝癌HCCLM3细胞增殖及迁移的影响

目的探讨沉默血管内皮钙黏蛋白(vascular endothelial cadherin,VE-cadherin)基因对人高转移肝癌HCCLM3细胞增殖及迁移的影响。方法将携带3种不同抑制靶点的VE-cadherin基因沉默重组质粒GV248-shRNA-VEcadherin(1)、(2)、(3)分别转染至人高转移肝癌HCCLM3细胞,同时设阴性对照组(转染空载体质粒GV248-shRNANC)和空白对照组(未转染)。采用qRT-PCR及Western blot法分别检测各组细胞中VE-cadherin基因mRNA转录及蛋白的表达水平,同时筛选出最有效的靶点。MTT法测定各组细胞的体外增殖能力;Transwell小室试验检测各组细胞的迁移能力。结果与空白对照组及阴性对照组比较,3组转染VE-cadherin-shRNA干扰质粒的HCCLM3细胞的VE-cadherin基因mRNA转录及蛋白表达水平显著降低(P0.05),其中GV248-shRNA-VE-cadherin(1)的VEcadherin基因抑制率最高(P0.05),筛选为最佳靶点;最佳靶点干扰组HCCLM3细胞的增殖及迁移能力均明显降低(P0.05)。结论沉默VE-cadherin基因可显著抑制人高转移肝癌HCCLM3细胞的增殖及迁移。