多重PCR法检测产志贺毒素性大肠杆菌的 4个血清型

目的建立多重PCR法检测产志贺毒素性大肠杆菌(shiga toxin-producing Escherichia coli, STEC)主要血清型O26、O145、O45和O121的分析方法。方法根据GenBank登录序列,设计扩增O抗原翻转酶(wzx)基因的引物,建立PCR方法,并以STECO26、O145、O45和O121基因组为模板,检验多重PCR的灵敏度和特异性。使用建立的PCR,检测牛胴体表面拭子,阳性扩增条带送测序,以验证PCR扩增的可靠性。同时将阳性扩增样品,涂布显色平板,分离靶标血清型细菌。结果本研究成功建立STEC O26、O145、O45和O121的多重PCR方法, PCR循环参数中退火温度为60℃,扩增片段分别为249、353、890和587 bp。多重PCR直接检测O26、O145、O45和O121时,最低检测限介于10~3～10~4 CFU/mL,而增菌后再检测,最低检测限均为1CFU/m L。多重PCR用于其他血清型STEC,和非大肠杆菌扩增时,均未扩增出目的条带,只有O26、O145、O45和O121能够扩增出相应条带。当使用多重PCR直接检测胴体擦拭子时,阳性率为5.45%(3/55),主要为O26、O145血清型;增菌后检测阳性率为7.27%(4/55),主要为O26、O145和O121血清型。阳性PCR扩增样品,成功分离到O26两株、O145和O121各一株。分离菌株具有典型大肠杆菌的生化特性,携带STEC代表性毒力因子志贺毒素和紧密素,且具有多重耐药性。结论以STECO26、O145、O45和O121的wzx基因为检测靶标,成功建立多重PCR方法,灵敏度和特异性良好,与细菌分离联合使用,可减少工作量,精准分离目的病原菌。     

2016年江苏省淡水养殖环节常见致病性弧菌污染状况调查

目的 了解江苏省淡水动物性水产品养殖环节中常见弧菌(副溶血性弧菌、霍乱弧菌等)的污染程度。 方法 参照《2016年国家食品安全风险监测淡水动物性水产品养殖环节中常见弧菌专项监测工作手册》进行样品的采集和检测。 结果 从淡水养殖场中采集水产品、水体、水底沉积物样品共507份, 检出副溶血性弧菌17株(3.4%); 霍乱弧菌4株(0.8%); 溶藻弧菌及创伤弧菌均未检出。检出的副溶血性弧菌均不携带毒力基因(trh-;tdh-), 主要血清型为O5:H7(41.2%), 主要耐受的抗生素为头孢唑林(94.1%), 其中3株PFGE带型相似性系数100%; 4株霍乱弧菌均为非O1/O139群, 未发现耐药株。结论 江苏省淡水养殖环节中副溶血性弧菌环境污染程度低, 但在淡水养殖环节中检出致病性弧菌, 提示淡食用水产品依然可能存在引发食物中毒的风险。     

吉林市HIV-1感染者基因型耐药分析及亚型分布

目的观察2014~2015年吉林市内抗病毒治疗失败HIV-1感染者中HIV基因型耐药情况及其亚型分布。方法收集吉林市2014~2015年HIV-1感染者中接受抗病毒治疗后HIV病毒载量≥1 000拷贝/ml的患者血浆样本,提取病毒RNA,进行POL基因区扩增及测序后,使用美国斯坦福大学HIV耐药数据库进行耐药位点分析,Mega 6.0软件Neighbor-joining tree方法构建系统进化树,进行亚型分布分析。结果 2014~2015年275份抗病毒治疗失败人群血浆样本全部扩增成功,共发现106份基因型耐药样本,耐药率为38.5%,其中7份对蛋白酶类药物耐药,82份对核苷类药物耐药,99份对非核苷类药物耐药,有80份同时对核苷类和非核苷类药物耐药。核苷类逆转录酶区耐药位点以M184V/IV突变为主,非核苷类逆转录酶区耐药位点以G190G/A/S和V179D/E/G突变为主,2例蛋白酶类药物主要耐药突变位点分别为A71V/T和L10I/M/V。序列亚型以CRF01_AE为主(64.7%),主要流行簇以CRF01_AE第4、第5及CRF07_BC第1簇为主。结论耐药位点的出现是影响吉林市HIV感染者抗病毒治疗效果的一个重要原因,应加强对治疗失败患者的耐药监测,及时发现耐药突变,尽早更换药物。     

基于JavaEE技术的“医院检验分析系统”设计与实现

说明了"医院检验分析系统"的必要性,从该项目需要实现的功能入手,介绍了系统的建模设计过程,结合具体的系统模块详细分析了核心和难点的代码实现细节,总结了该项目的特点和需要完善的功能。     

HBV和HCV变异比例分析软件设计

研究了应用DNA测序峰形图定量和精细研究碱基变异分析的方法,根据碱基变异峰形图的面积比值,得出变异比例大小.采用相关Windows API函数获取碱基变异点处的DNA峰形图,对其进行清理多余线条及修补线条等处理,计算出不同峰形图的面积比值,并给出了软件的关键设计.回收实验结果以及临床数据表明,该软件采用的设计思想正确,检测准确度高,有良好的应用前景.     

shRNA表达载体对耐阿霉素的人红白血病细胞株P-gp表达的抑制作用

目的探讨靶向mdr1基因的shRNA表达载体对耐阿霉素的人红白血病细胞(K562/ADM)P-gp表达的抑制作用。方法合成靶向mdr1基因的短发夹shRNA表达载体,转染K562/ADM细胞。利用RT-PCR检测转染细胞中mdr1基因mRNA,Westernblot、免疫细胞化学和流式细胞术分别检测P-gp的表达。结果在瞬时转染pSilencerTM3·1-H1neomdr1-A和mdr1-BshRNA表达载体的K562/ADM细胞中,mdr1基因mRNA转录分别减少到39·1%(P<0·05)和30·8%(P<0·01)。Westernblot、免疫细胞化学和流式细胞术检测显示P-gp表达被明显而特异地抑制。结论靶向mdr1基因的shRNA表达载体能够特异而有效地抑制耐药的人红白血病细胞中的P-gp表达。     

四联疗法治疗消化性溃疡的临床观察

目的探讨根治消化性溃疡的治疗方法。方法经四联疗法(阿莫西林 呋喃唑酮 奥美拉唑 枸橼酸铋钾)治疗消化性溃疡,临床观察,并记录。结果治疗结束后,行胃镜检查,此方案疗效可靠。结论四联疗法治疗消化性溃疡疗效可靠,副作用少,值得临床推广。     

几种癌症中多药耐药相关蛋白的研究进展

多药耐药相关蛋白(MRP)是多药耐药(MDR)形成机制之一,其主要参与细胞内外多种复合物的转运;调整细胞内物质的分布;作为转运泵参与物质转运在多种癌症中都有表达,现对其进行综述。     

结直肠癌肿瘤干细胞研究进展

在我国结直肠癌发病率呈上升趋势,结直肠癌肿瘤干细胞(TSC)耐药性成为治疗的难题,有研究显示,CD133可作为结直肠癌肿瘤干细胞的标志之一,在分离和鉴定中有重大意义,并有望成为其未来治疗的新靶点;检测外周血CD133 mRNA水平可能成为结肠癌复发新的监测指标;大肠癌组织中ABCG2的高表达,可能预示肿瘤对目前临床常规化疗的耐药,需选择新的治疗方法。     

耐久性提高10倍的发泡聚氨酯——Terapolyca

日本雪ヶ化学工业公司采用独特的发泡技术,现已开发出了耐久性相当于原品5～10倍的发泡聚氨酯材料——Terapolyca。其产品的主要特点在于：（1）机械强度高;（2）耐NOx变色（黄变）;（3）耐药品性优良（甲醇的溶胀率在1％以下,醋酸乙酯和硅油的溶胀率为5％）;（4）耐水解性好;（5）耐光老化性优良;（6）与醚类、酯类聚氨酯相比,耐热性更优;（7）密度小,属轻质材料。而且与原品相比,具有更好的减振特性;（8）相对其他材料,不存在迁移性;（9）完全不会变黄。