肿瘤细胞和耐药肿瘤细胞中FoxO3/Keap1/Nrf2通路的表达差异

目的: 检测FoxO3/Keap1/Nrf2信号通路在肿瘤细胞和耐药肿瘤细胞中的表达差异,探讨FoxO3/Keap1/Nrf2信号在肿瘤细胞耐药中的作用。方法: 构建肺癌A549耐药（A549/DDP）和结肠癌HCT-8耐药（HCT-8/5-FU）两种细胞株,耐药细胞对药物的敏感性用MTT法检测;分别用qRT-PCR、Western blot检测FoxO3/Keap1/Nrf2信号通路成员在非耐药和耐药肿瘤细胞中mRNA和蛋白的表达情况并进行比较。结果: A549/DDP的耐药性明显高于A549细胞（P<0.05),耐药倍数为5.25倍;HCT-8/5-FU耐药性显著高于HCT-8细胞（P<0.05）,耐药倍数为31.67倍;两种耐药细胞A549/DDP和HCT-8/5-FU中的FoxO3、Keap1和Akt基因的mRNA表达水平降低而Nrf2和Nqo1基因的mRNA表达水平升高;A549/DDP和HCT-8/5-FU细胞中的Keap1和FoxO3蛋白表达水平降低而p-Akt、Nrf2、Nqo1的蛋白表达水平升高。结论: FoxO3/Keap1/Nrf2信号通路与肿瘤耐药性有一定相关性,为深入研究该通路并探索降低肿瘤耐药性的治疗策略提供参考。     

衡阳地区144例幽门螺杆菌临床分离株耐药情况分析

目的研究衡阳地区幽门螺杆菌(Hp)对克拉霉素、阿莫西林、甲硝唑、左氧氟沙星、四环素的耐药情况。方法采用Kir-by-Bauer药敏纸片法对2006年3月至2008年6月因胃肠道症状而分离出的144株Hp进行药敏测试。结果各药的耐药情况分别为克拉霉素31.3%、阿莫西林13.9%、甲硝唑66.7%、左氧氟沙星2.78%、四环素1.39%,并且饮用其他低纯度水者Hp检出率略高于饮用自来水者。结论衡阳地区Hp对甲硝唑和克拉霉素的耐药率比较严重,而对四环素耐药率较低。     

三叶青总黄酮逆转吉非替尼耐药肺腺癌细胞的耐药性

目的：探讨三叶青总黄酮（FTH）逆转吉非替尼（GEF）耐药肺腺癌细胞的耐药性及其初步机制。方法：采用MTT法,检测FTH对GEF耐药A549/GR细胞增殖的影响;采用流式细胞技术检测FTH对A549/GR细胞凋亡及周期的影响;建立A549/GR细胞荷瘤小鼠模型,观察两药联用后的体内抑瘤效果;采用Western blot法检测瘤组织PI3K/Akt信号通路关键蛋白（PTEN、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT）的表达情况。结果：与单用GEF相比,FTH联合GEF给药可显著抑制A549/GR细胞增殖（P<0.05）,诱导A549/GR细胞凋亡（P<0.05）,使细胞停滞在G0/G1期。体内实验结果表明,两者联合可显著抑制裸鼠A549/GR移植瘤的生长（P<0.05）,并显著降低瘤组织p-PI3K和p-AKT表达（P<0.05）,升高PTEN蛋白表达（P<0.05）。 结论：FTH可逆转A549/GR细胞对GEF的耐药性,其作用机制可能与调控PTEN/PI3K/AKT通路有关。     

调控肿瘤糖代谢重编程改善肿瘤耐药的小分子抑制剂研究进展

肿瘤耐药是目前临床药物治疗较为棘手的问题,机制众多,其中肿瘤细胞代谢重编程是重要的学说之一。肿瘤细胞通过代谢重编程以满足快速增殖的能量需求,而糖代谢方式和途径的改变对肿瘤细胞至关重要。本文就参与肿瘤耐药的糖代谢重编程相关酶及其小分子抑制剂进行综述。     

庆阳地区耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌耐药基因检测及其同源性分析

目的对庆阳地区碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌进行耐药基因检测及其同源性分析。方法收集我院2015年3~12月分离的29株碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌,其中ICU病房18株、呼吸内科4株、骨科4株、神经外科3株,采用MIC法及K-B法进行药敏试验,PCR方法检测菌株NDM-1、OXA-51、OXA-23、OXA-24及OXA-58基因的携带情况,脉冲场凝胶电泳(plused-field gel electrophoresis,PFGE)法对菌株进行分子分型,并通过非加权配对算术平均法(unweighted pair group average method,UPGMA)进行聚类,构建聚类树。结果 29株碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌中,复方新诺明和丁胺卡那耐药率为54%和62%,左氧氟沙星耐药率为10%,其他药物均为100%;OXA-51和OXA-23阳性菌株分别为27(93.1%)和26株(89.7%),未检出NDM-1金属酶、OXA-58和OXA-24型基因;共检出12个PFGE型别,分别命名为PT1~12型,最常见的PFGE型别为PT4型,共包含14株菌(48.3%),分别分离自4个病区,其中9株为ICU病房,2株为呼吸内科,2株为神经外科,1株为骨科。其次常见的为PT1和PT7型,分别包含4株和2株菌;其他9个型别分别仅对应1株菌。结论我院分离的碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌分子型别相对集中,提示存在不同病区之间的院内感染传播;OXA-51和OXA-23基因可能是鲍曼不动杆菌耐碳青霉烯类的主要原因;未检出NDM-1金属酶、OXA-58和OXA-24基因。     

稳定表达BCR/ABL-T315I的小鼠BP210-T315I细胞株的建立

目的构建能稳定表达T315I的BCR/ABL的小鼠BP210-T315I细胞株,并观察该细胞株对酪氨酸激酶抑制剂STI571的敏感性。方法采用PCR法将重组逆转录病毒载体MIGR-P210中的abl基因第944位碱基C定点突变为T,再将该位点突变成功的逆转录病毒载体转染到包装细胞内,收集病毒,感染BaF3细胞,经筛选和亚克隆获得稳定表达T315I的BCR/ABL蛋白的小鼠BP210-T315I细胞。采用RT-PCR、DNA测序和Western blot鉴定abl基因第944位碱基是否发生突变;MTT法检测BP210-T315I细胞对STI571的耐药性。结果 T315I的bcr/abl基因已整合到BaF3细胞基因组中,B210-T315I细胞能稳定表达T315I的bcr/abl基因与蛋白;与BaF3-P210细胞株相比,经STI571处理后,BP210-T315I细胞对STI571明显耐药,其耐药倍数约为100。结论已成功构建稳定表达小鼠T315I的转化细胞株,该细胞株具有对STI571耐药的恶性表型特征。     

紫杉醇耐药对食管癌细胞增殖、迁移及血管形成的影响

目的 研究紫杉醇(paclitaxel,PTX)耐药对食管癌细胞增殖、迁移及血管形成的影响.方法 采用体外间歇诱导加逐步递增PTX浓度的方法建立PTX耐药细胞系KYSE150/PTX.倒置显微镜下观察PTX耐药细胞形态变化,MTT法检测PTX耐药对食管癌细胞细胞增殖能力的影响,克隆形成试验观察PTX耐药对食管癌细胞克隆...     

喹诺酮类药物的研究进展

喹诺酮类药物是一类人工合成的抗菌药物,目前广泛应用于临床抗感染治疗中,具有较强的抗菌活性。本文主要从喹诺酮类药物的作用机制、临床应用、不良反应及耐药机制等方面进行分析和整理,综述其研究进展并对其未来的研究方向提出了建议,希望为今后喹诺酮药物的研究提供一定的参考依据。     

食品中耐药细菌风险评估的研究进展

近年来抗生素的使用和滥用是普遍存在的问题,食品中耐药细菌和耐药基因引起的人类疾病威胁已成为全球性关注的热点。因此,全面开展从农场到餐桌耐药细菌的风险评估研究具有十分重要的意义。本文根据国际食品法典委员会拟定的微生物风险评估原则和指导方针,从危害识别、释放评估、暴露评估、剂量-反应关系评估、风险评估5 个步骤进行阐述。通过分析国内外抗生素耐药细菌风险评估案例,综述了食品中耐药细菌风险评估的研究进展及其预防控制措施,以期为未来耐药细菌风险评估提供理论依据。     

鸡源细菌中5种四环素耐药基因多重PCR检测方法的建立

为建立一种同步检测鸡源细菌中5种四环素耐药基因tetA、tetD、tetG、tetS和tetX的多重聚合酶链式反应(PCR)方法,优化了多重PCR体系的引物和Taq DNA聚合酶浓度及退火温度等参数,并考察了方法的灵敏度、特异性和适用性。建立的多重PCR反应技术的最佳反应体系为:混合DNA模板5μL,Taq酶1μL,tetA和tetX的正反向引物各0.5μL,tetG、tetD和tetS的正反向引物各1.0μL,dNTP4μL,MgCl24μL,10×PCR反应缓冲液5μL,最终用dd H2O补齐至50μL;反应程序为:95℃预变性5min;95℃变性30s,55℃退火30s,72℃延伸1min,35个循环;72℃延伸10min。该方法的灵敏度为102 CFU/mL,且能广谱地检测多种鸡源细菌中的5种四环素耐药基因。与传统的单重PCR方法相比,该多重PCR技术快速高效、适用性广。