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491.
伊马替尼(Imatinib)是人工设计的一种酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKI),由于其出色的临床疗效,很快成为慢性粒细胞白血病(CML)的一线治疗药物. 相似文献
492.
目的构建能稳定表达T315I的BCR/ABL的小鼠BP210-T315I细胞株,并观察该细胞株对酪氨酸激酶抑制剂STI571的敏感性。方法采用PCR法将重组逆转录病毒载体MIGR-P210中的abl基因第944位碱基C定点突变为T,再将该位点突变成功的逆转录病毒载体转染到包装细胞内,收集病毒,感染BaF3细胞,经筛选和亚克隆获得稳定表达T315I的BCR/ABL蛋白的小鼠BP210-T315I细胞。采用RT-PCR、DNA测序和Western blot鉴定abl基因第944位碱基是否发生突变;MTT法检测BP210-T315I细胞对STI571的耐药性。结果 T315I的bcr/abl基因已整合到BaF3细胞基因组中,B210-T315I细胞能稳定表达T315I的bcr/abl基因与蛋白;与BaF3-P210细胞株相比,经STI571处理后,BP210-T315I细胞对STI571明显耐药,其耐药倍数约为100。结论已成功构建稳定表达小鼠T315I的转化细胞株,该细胞株具有对STI571耐药的恶性表型特征。 相似文献
493.
目的探讨应用经化疗药物诱导后传代的VX2肿瘤建立移植性耐药肝癌模型的可行性.方法将20只大耳白兔随机分为4组,建立肝癌模型.A、B组和C、D组植入肿瘤分别取自常规传代和药物诱导后的传代兔.模型建立3周后,增强CT检查确定肿瘤大小.直视下穿刺肝动脉,A、C两组注入阿霉素(4mg/2ml),B、D两组注入等量生理盐水.1周后CT复查,比较各组肿瘤倍增率.流式细胞仪检测各组肿瘤凋亡率.结果模型建立3周后各组肿瘤大小无明显差异.治疗1周后增强CT复查,各组肿瘤体积均增大.其中,A组肿瘤倍增率显著低于其他组(P0. 相似文献
494.
目的 了解顺义区市售生鲜整鸡中弓形杆菌的污染状况及耐药特征。方法 在顺义区农贸市场、超市随机采集零售生鲜整鸡样品60份,应用滤膜法对样品进行弓形杆菌的分离培养,采用基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)及实时荧光定量PCR进行菌株鉴定,并将菌株的质谱图进行聚类分析。采用琼脂稀释法对弓形杆菌分离株进行11种抗生素的耐药性检测。结果 60份市售生鲜整鸡样品中弓形杆菌的检出率为26.67%(16/60),且均为布氏弓形杆菌。6月、7月弓形杆菌的检出率明显高于5月。16株弓形杆菌分离株经MALDI-TOF MS聚类,以相对距离1 000为节点分为两个簇群,相对距离与菌株相似性呈负相关,聚类图对样品地域来源有一定的提示作用。弓形杆菌分离株对喹诺酮类抗生素耐药严重,对萘啶酸和环丙沙星的耐药率分别为81.25%和43.75%;对庆大霉素(12.50%)、红霉素(12.50%)、阿奇霉素(12.50%)、泰利霉素(12.50%)、链霉素(6.25%)耐药率相对较低。结论 顺义区零售生鲜整鸡中弓形杆菌的检出率较高,应警惕因未烧熟煮透和交叉污染导致食源性疾病的风险。 相似文献
495.
本文以广州市售散装熟肉制品为研究对象,通过16S rDNA序列分析及生理生化试验对菌株进行鉴定,同时检测菌株对四环素和复方新诺明的耐药性及耐药基因的分布。40份熟肉制品中共筛选出169株细菌,其中肠杆菌属、假单胞菌属和柠檬酸杆菌属所占比例较大。所有分离株中有55株(32.54%)对四环素表现出耐药,40株(23.67%)对复方新诺明表现出耐药。在7种四环素耐药基因中,tetM(14.20%)的检出率为最高,其次分别为tetA(10.06%)、tetS(5.92%)和tetB(2.96%);磺胺类耐药基因中sulI的检出率最高,为10.65%。169株受试菌中有19株(11.24%)同时含有两种或两种以上耐药基因。熟肉制品中耐药菌株及相关耐药基因的广泛分布表明这些食源性细菌已成为潜在的耐药基因库,并且可能通过食品链将耐药性传递给人类,从而引起人类的感染以及耐药菌株的流行。 相似文献
496.
目的:对分离自陕西、广东、福建、上海、北京、河南和四川等7省(市)的118株沙门氏菌进行染色镜检、生化和16S rDNA鉴定,β-内酰胺酶编码基因遗传稳定性和药敏性测定,为制备适于携带β-内酰胺酶类编码基因食源性致病菌检测用参考菌株奠定材料基础。方法:采用革兰氏染色、VITEK生化鉴定、MALDI-TOF-MS鉴定、16S rDNA基因扩增和序列测定分析鉴定菌株;采用临床和实验室标准协会推荐的琼脂稀释法测定沙门氏菌的药敏性;采用传代培养、PCR扩增、基因序列测定和基因库在线比对方法,确定沙门氏菌携带的与β-内酰胺类抗生素耐药相关编码基因的遗传稳定性。结果:118株沙门氏菌的生化特性、16S rDNA、MALDI-TOF-MS鉴定结果均符合沙门氏菌属的典型特征。菌株对氨苄西林、磺胺异噁唑和头孢噻呋(100.00%)耐药最为普遍,对四环素和萘啶酮酸等7种抗生素的耐药率菌均在50%以上。76株(64.41%)菌株携带bla_(TEM-1),其次分别为bla_(CTX-M-55)(60,50.85%)、bla_(OXA-1)(19,16.10%)、bla_(CTX-M-3)(18,15.25%)、bla_(CTX-M-15)(2,1.69%)、bla_(TEM-116)(2,1.69%)、bla_(CTX-M-123)(1,0.85%)和bla_(CTX-M-64)(1,0.85%)。筛选出的12株沙门氏菌,其携带的相关编码基因在传代过程均未丢失或发生突变。结论:4种方法对118株沙门氏菌的鉴定结果均与沙门氏菌属的特性吻合,12株代表性沙门氏菌携带的bla_(TEM-1)、bla_(CTX-M)和bla_(OXA-1)基因可在15代传代过程稳定遗传,具有制备β-内酰胺类抗生素耐药性编码基因检测用参考菌株的潜能。 相似文献
497.
目的 建立喹诺酮类抗生素主要耐药基因的TaqMan荧光PCR检测方法,为原料乳中耐药大肠埃希氏菌的监测提供技术方案。方法 利用Chelex 100法快速获取细菌基因组DNA,通过对aac(6’)-Ib-cr和qepA基因的序列分析,利用Primer Express 3.0软件设计特异性引物和探针,建立单重和双重TaqMan荧光PCR方法。通过耐药基因阳性菌株和原料乳中分离大肠埃希氏菌菌株,对方法进行评估。结果 以Chelex 100法快速提取耐药基因阳性菌株细菌基因组DNA为模板,建立的aac(6’)-Ib-cr和qepA基因的单重和双重荧光PCR反应均有特异性曲线扩增,方法灵敏度为菌液浓度10-4 CFU/mL。北京地区52份原料乳中共分离出32株大肠埃希氏菌,利用建立的双重荧光PCR方法检测aac(6’)-Ib-cr和qepA基因结果为阴性,和环丙沙星肉汤稀释法药敏结果一致。结论 本方法的建立为原料乳中大肠埃希氏菌常见喹诺酮类耐药基因的快速检测提供了新的技术手段。 相似文献
498.
目的S 对北京市朝阳区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)霍乱弧菌耐药表型和基因型进行初步的研究。方法S 复苏2012-2019年北京市朝阳区保存的37株霍乱弧菌,应用肉汤微量稀释法进行产ESBLs菌株的鉴定及21种药物敏感实验,应用荧光 PCR 检测菌株的10种耐药基因:SHV、TEM-1/TEM-2、TCX-M1、TCX-M2、TCX-M8、TCX-M9、TCX-M25、OXA1,OXA2和OXA10。结果 试验菌株中,产ESBLs菌株检出率8.11%(3/37),这3株菌10种耐药基因均为阴性;ESBLs耐药基因携带率为16.22%(6/37),这6株菌均为非产ESBLs霍乱弧菌,其中TEM1/ TEM2携带率为16.22%(6/37),OXA2携带率为16.81%(4/37)。37株霍乱弧菌对21种抗生素耐药率为2.70%~94.59%,对多西环素不耐药;多重耐药率为35.13%(13/37),最多耐11种药。结论 霍乱弧菌中产ESBLs菌株与ESBLs耐药基因菌株一致性差;北京地区霍乱弧菌耐药严重且多重耐药趋势明显;应加强霍乱弧菌耐药机制、耐药表型与基因型关系的研究。 相似文献
499.
目的:研制可作为β-内酰胺类抗生素耐药编码基因检测质控用标准样品。方法:通过检索National Center for Biotechnology Information(NCBI)基因库,获得β-内酰胺类抗生素耐药性编码基因blaTEM、blaPSE、blaCTX-M、blaCMY和blaOXA的DNA序列,构建耐药基因重组质粒和工程菌。将工程菌传代培养15代,同时使用PCR扩增和DNA测序测定确认目标基因的遗传稳定性。大量制备菌悬液,提取重组质粒,真空干燥得到质粒标准样品。使用PCR和RT-qPCR检测质粒标准样品的最低检出限。使用超微量分光光度计测定质粒标准样品的质量,RT-qPCR测定质粒作为模板扩增时的Ct值,以此评价标准样品的均匀性及贮藏稳定性。结果:5种重组质粒DNA可在工程菌中稳定遗传且无突变发生。成功制备5种质粒DNA标准样品,均匀性良好。各质粒DNA经梯度稀释后,PCR最低检出限在2.33×104-2.25×106 拷贝数/μL之间,RT-qPCR最低检出限在1.93-1850 拷贝数/μL之间。样品在37 ℃贮存14 d、4 ℃贮存3个月、-20 ℃贮存12个月稳定 性良好。结论:研究制备得到β-内酰胺类抗生素耐药机制编码基因blaTEM、blaPSE、blaCTX-M、blaCMY、blaOXA质粒DNA标准样品,目的基因遗传稳定性、标准样品的均匀性和贮存稳定性良好。 相似文献
500.
目的 了解绍兴市2017—2019年沙门菌病人分离株的分子分型特征及耐药情况。方法 收集245株分离自绍兴市食源性腹泻病例中的沙门菌,进行血清学分型,采用微量肉汤稀释法进行药敏检测,使用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对分离株进行分子分型,利用BioNumerics V7.1软件进行聚类分析。结果 245株沙门菌可分为60种血清型,优势血清型为鼠伤寒沙门菌(32.24%)、肠炎沙门菌(10.20%)和伦敦沙门菌(6.94%)。225株分离株对25种抗生素存在不同程度的耐药,其中氨苄西林(77.14%)、四环素(73.88%)和链霉素(66.53%)的耐药率较高,且多重耐药率达76.33%。Xba Ⅰ酶切后的鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌和伦敦沙门菌分别含48种、11种和12种不同PFGE指纹图谱。结论 绍兴市沙门菌血清型种类繁多,PFGE指纹图谱呈多样性,抗生素耐药呈现较集中且主要为氨苄西林-四环素-链霉素(AMP-TET-STR)。 相似文献