曲克芦丁脑蛋白水解物治疗青年缺血性脑卒中的临床疗效观察

目的:探讨曲克芦丁脑蛋白水解物治疗青年缺血性脑卒中的临床效果。方法:选取2016年3月-2018年6月本院收治的青年缺血性脑卒中患者120例,按随机数字表法将患者分成观察组和对照组,各60例。两组患者均给予常规治疗,对照组在常规治疗的基础上辅以醒脑静注射液治疗,观察组在常规治疗的基础上辅以曲克芦丁脑蛋白水解物治疗。采用神经功能缺损评分(NIHSS)评估其神经功能,采用日常生活活动能力评分量表(ADL)评估其生活能力。观察两组患者临床疗效、治疗前后血液流变学指标、NIHSS和ADL评分的变化及不良反应发生情况。结果:观察组患者临床治疗总有效率为91.67%,高于对照组的78.33%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者NIHSS评分均较治疗前降低,而ADL评分均较治疗前升高,观察组患者NIHSS评分和ADL评分改变幅度均较对照组大,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组患者血小板聚集率、纤维蛋白原、全血高切黏度和全血低切黏度均较治疗前降低,且观察组患者降低幅度均较对照组大,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组患者不良反应发生率为13.33%,而对照组不良反应发生率为8.33%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:青年缺血性脑卒中患者辅以曲克芦丁脑蛋白水解物治疗,其临床疗效确切,能有效地改善其神经功能和提高生活质量,降低血液黏度,改善血液循环。     

芦丁提取与纸色谱检测条件的优化

多年来,从槐花米中提取芦丁及纸色谱检验一直是华南农业大学一年级本科生必做的基础化学实验,但根据教材中提供的实验条件,学生实验过程中总出现产品量少、纸色谱效果差的问题。文章从提取与纸色谱检验两个方面对原始实验条件进行了改进,使芦丁的提取率提高了74%、纸色谱的实验效果得到显著改善。文章得到的最佳提取条件为:冷水投料、加入1%亚硫酸钠、液固比为10、碱溶pH为9.0～10.0、浸煮温度为90～95℃、浸煮时间为30min;展开剂最佳组成为乙酸乙酯︰甲醇︰水=2︰1︰1。     

芦丁-α-鼠李糖苷酶基因的克隆

根据芦丁-α一鼠李糖苷酶N端氨基酸序列设计简并引物，从Absidia sp．R9g的总RNA出发，通过逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)扩增出芦丁-α-鼠李糖苷酶基因片段。将RT-PCR获得的1条1．6kb的目的条带与pMD18-T载体连接，转化大肠杆菌JM109感受态细胞。酶切鉴定结果表明目的片段克隆成功。     

芦丁鼠李糖苷酶基因在巴斯德毕赤酵母中的表达

芦丁鼠李糖苷酶目的基因亚克隆至pPIC9K表达载体,电转化至毕赤酵母GS115中,进行了基因表达研究.结果表明,该转化宿主菌在甲醇诱导培养至144 h,表达产蛋白具有芦丁鼠李糖苷酶活性,运用SDS-PAGE电泳技术确定其分子质量为53 ku,与理论值基本相符.     

槐米中芦丁的微波辅助萃取研究

以芦丁提取率为指标,对槐米中芦丁的微波辅助萃取进行了研究.结果表明：微波辅助法对萃取槐米中芦丁有极强的促进作用,明显优于加热回流法和化学超声法,不仅产率高,且快速、节能.最佳提取条件为：微波功率450 W,微波辐射时间16 min,槐米粉碎度为80目,料液比为1∶100,槐米浸泡20 min,此条件下槐米中芦丁提取率可达21.97%.     

RP-HPLC测定山竹花不同部位芦丁、木犀草素的含量

建立测定山竹花不同部位芦丁、木犀草素含量的高效液相色谱法。采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC),其中芦丁以甲醇:0.1%磷酸水溶液为流动相进行等度洗脱,流速为1.0 m L/min,进样量20μL,检测波长为358 nm;木犀草素以甲醇:0.2%磷酸水溶液为流动相进行等度洗脱,流速为1.0 m L/min,进样量20μL,检测波长为350 nm。结果表明,芦丁的进样量在0.007 8~0.124 8 mg范围内,其峰面积与浓度呈良好的线性关系(r=0.999 7),样品平均回收率为97.51%。木犀草素的进样量在0.003 4~0.054 4 mg范围内,其峰面积与浓度呈良好的线性关系(r=0.999 1),样品平均回收率为96.03%。实验方法准确度较高,切实可行。最终测得山竹花不同部位芦丁的含量分别为:叶0.6 mg/g,茎0.53 mg/g,根0.11 mg/g;木犀草素的含量分别为:叶0.52"10-2mg/g,茎0.18"10-2mg/g,根未检出。     

红旱莲不同部位槲皮素和芦丁的含量测定

建立了红旱莲中槲皮素和芦丁的高效液相色谱法。采用C18(5μm,4.6mm×250mm)柱、以CH3OH∶H2O∶CH3COOH(50∶40∶2)为流动相、254nm为检测波长、流速为1.0mL·min-1、在柱温30℃时对红旱莲不同部位槲皮素和芦丁的含量进行检测。结果表明:槲皮素的线性范围为0.14~1.20μg,相关系数r=0.998 9,平均回收率为95.1%,RSD=1.3%;芦丁的线性范围为0.16~0.88μg,相关系数r=0.998 2,平均回收率为98.7%,RSD=1.6%。该方法简便、准确,适合于对红旱莲中槲皮素和芦丁两种有效成分的检测。     

芦丁酯的酶催化区域选择性合成及其抗氧化活性研究进展

芦丁即槲皮素-3-O-芸香糖苷,是存在于苦荞、芸香、槐树等的天然类黄酮类化合物。芦丁具有抗氧化、降糖、预防心血管疾病等生物活性,但低溶解度限制了其实际应用。通过对芦丁结构进行亲油修饰合成芦丁酯,可以有效改善脂溶性,提高生物利用率。本文详细综述了非水相酶催化合成芦丁酯的研究进展,重点介绍了酶种类、反应介质、酰基供体等因素对芦丁酯的酶促合成规律的影响。酶促合成芦丁酯的难点在于芦丁含多个羟基及其与酰基供体的不互溶性,总结了芦丁的修饰位点,提出了通过介质复配、物理辅助手段改善底物溶解性,通过筛选酶、酶修饰等可以得到高区域选择性的芦丁酯;进一步阐述了酰化修饰对芦丁抗氧化活性的影响,并总结了现有芦丁酯的分离纯化策略;最后展望了芦丁酯的未来研究方向,对今后芦丁酯的深入研究与开发利用具有指导意义。     

毛细管电泳-电化学检测测定荞麦中表儿茶素、芦丁、槲皮素的含量

用毛细管电泳-电化学检测的方法研究了荞麦中黄酮类物质:表儿茶素、芦丁、槲皮素的含量,研究了电极电位、缓冲液的pH值、分离电压及进样时间对电泳的影响,得到优化的测定条件。以直径为300μm的碳圆盘电极为检测电极,工作电极电位为0.95V(vs.SCE),在50mmol/L硼砂(pH8.5)运行缓冲液中,上述3组分在12min内完全分离。表儿茶素、芦丁、槲皮素线性范围分别为5×10-7￣1×10-4g/mL、1×10-6￣1×10-4g/mL、1×10-6￣1×10-4g/mL;检出限分别为1.83×10-7g/mL、2.9×10-8g/mL、1.00×10-7g/mL;3种标样7次平行进样的相对标准偏差(RSD)小于2.5%;回收率表儿茶素100.4%、芦丁98.1%、槲皮素100.1%(n=3)。该法灵敏可靠,结果令人满意。     

双波长紫外分光光度法测定复方芦丁片中维生素C含量

复方芦丁片每片含芦丁、维生素C各20mg,维生素C含量的测定有碘量法和比色法,均需分离测定,繁琐费时。本文介绍的是,利用二者在不同溶剂中溶解度差异和其紫外光谱的特征,拟定了以双波长紫外分光光度法测Vc含量,结果较为满意。