双齿围沙蚕多肽的制备及其抗肺癌A549细胞活性

探讨双齿围沙蚕酶解多肽制备的关键技术及其对肺癌A549细胞的作用。以增殖抑制率为指标,确定最佳酶种并根据单因素试验和正交试验确定其最佳酶解工艺。经超滤获得1~3 ku的酶解液,通过阴离子色谱、凝胶过滤色谱和制备色谱对其进行进一步的分离纯化。采用四甲基偶氮唑蓝法测定沙蚕多肽PAP对肺癌A549细胞的增殖抑制率并通过倒置显微镜、吖啶橙/溴化乙锭荧光染色及Hoechst荧光染色观察其细胞形态的变化。实验结果表明最佳酶种是碱性蛋白酶,其最佳酶解条件为:酶解温度50℃、pH 11、料液比1∶1(g/mL)、酶解时间6 h、加酶量300 U/g。经纯化获得的多肽命名为PAP,其氨基酸序列为Ile-Glu-Pro-Gly-Thr-Val-Gly-Met-Met-Phe,且PAP对A549细胞的作用呈时间与剂量依赖关系,作用后细胞出现了凋亡的形态学特征。因此,PAP能明显抑制肺癌细胞A549增殖,可以诱导其发生凋亡而发挥抗肿瘤作用。     

大豆蛋白肽-酪蛋白非磷酸肽组装产物的荧光光谱分析及抗氧化性研究

对不同p H值条件下制备的大豆蛋白肽-酪蛋白非磷酸肽组装产物(casein non-phosphopeptides-soybean peptide complex,CNPSPC)的荧光光谱及抗氧化性进行分析。结果表明,随着p H值增加,CNPSPC埋藏在疏水环境中的Trp残基暴露到分子表面的强度逐渐低于组装前的原料蛋白,且Trp残基所处的微环境极性有所降低。硫磺素T荧光光谱分析表明,p H 6.0的制备条件下,CNPSPC荧光强度最大,此时CNPSPC的β-折叠结构含量可能最多。组装改变了CNPSPC的Trp残基在空间结构中所处的微环境,使CNPSPC的分子构象发生改变。与酪蛋白非磷酸肽(casein non-phosphopeptides,CNPP)和大豆蛋白肽(soybean peptide,SP)相比,CNPSPC的抗氧化能力有所提高,在p H 6.0时其清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基、O_2~-·、·OH能力达到最大,分别提高到组装前大豆蛋白的3.34、1.12倍和1.08倍。     

小分子大豆多肽对小鼠胃黏膜保护作用的研究

采用束缚-水浸法和无水乙醇诱导法复制小鼠胃黏膜损伤模型,实验动物各分为6组：正常组、模型组、阳性药物组(雷尼替丁+VE),大豆多肽高、中、低剂量组(分别为7.5、5.0、2.5g/(kg ·d),连续给药10d后,处死实验动物,观察溃疡指数,同时测定肝组织MDA含量、血清ALT活性、胃黏膜组织SOD和MDA水平。结果表明：成功建立小鼠胃黏膜损伤模型,与模型组比较,大豆多肽高、中剂量组能明显降低应激性和乙醇诱导胃黏膜损伤小鼠的溃疡指数,以高剂量效果最佳,呈明显的剂量依赖性;同时大豆多肽高、中剂量组可明显降低应激性胃黏膜损伤小鼠肝组织MDA和血清中ALT水平;增强乙醇诱导胃黏膜损伤小鼠胃黏膜组织中SOD活力,降低MDA水平。小分子大豆多肽对小鼠胃黏膜损伤有一定的保护作用。     

葛根核桃肽复合饮料喷雾干燥工艺研究

为了改善葛根核桃肽复合饮料的喷雾干燥效果,优化喷雾干燥工艺,该研究考察了进口温度、进料流量、物料质量分数以及助干剂的种类和添加量的变化对葛根核桃肽复合饮料喷雾干燥效果的影响,并采用正交设计法优化喷雾干燥条件。结果显示,喷雾干燥最佳工艺条件为进口温度170 ℃,进料流量1.96 mL/min,物料质量分数15%,麦芽糊精添加量为总固形物含量的80%,β-环糊精添加量为总固形物含量的15%,在此条件下,所得产品的感官评分为95分,水分含量为3.98%。     

发酵法制备沙光鱼多肽及其抗氧化活性

将米曲霉接种到pH5.0 的沙光鱼匀浆液中进行发酵培养,利用米曲霉产生的蛋白酶水解沙光鱼蛋白。研究发酵过程中蛋白酶的产生及沙光鱼蛋白的水解动态;对发酵液进行超滤,测定不同截留分子质量的发酵液清除自由基的活性及抗氧化活性。结果表明：随着发酵时间的延长,沙光鱼蛋白的水解度和多肽得率不断增加,多肽的平均链长度降低。发酵48h 后,多肽链平均长度为14,水解度为26.6%,多肽得率最高达到8.98%,抗氧化能力较强。不同截留分子质量的多肽液中,平均肽链长度为14 个氨基酸残基的多肽超滤液体外抗氧化能力较强。     

响应面法优化罗非鱼皮胶原多肽螯合锌的制备工艺

以罗非鱼皮胶原多肽(TSP-I)为配位体,采用水合体系法与硫酸锌螯合,制备可用于补锌剂的多肽螯合锌产品。以响应面法优化罗非鱼皮胶原多肽螯合锌工艺。结果表明:最佳螯合工艺条件为:反应温度60℃、pH5.3、TSP-I与硫酸锌摩尔比2:1、TSP-I浓度3.4g/100ml水、反应时间40min。在此条件下螯合率理论值为92.57%,验证实际螯合率为92.17%。     

藜麦芽多肽制备及其应用研究

该研究以白藜麦为原料,通过人工调控藜麦萌芽的培养条件,促进藜麦萌发过程中蛋白质向多肽的转变,制备富含多肽的藜麦芽(多肽藜麦芽)。考察浸泡温度、浸泡时间、培养时间3个因素对藜麦芽中多肽富集的影响,在单因素的基础上采用正交试验方法对藜麦芽培养条件进行优化,得出最佳培养条件为浸泡温度25℃,浸泡时间4 h,培养时间48 h,在此条件下,藜麦芽中多肽含量为(12.4±1.13)mg/g。将培养得到的多肽藜麦芽进行低温打浆处理,以冷冻干燥技术得到多肽藜麦芽粉,所得多肽藜麦芽粉呈乳白色,易溶解,在饮料等食品当中可作为营养型添加剂加入使用。     

大豆多肽饮料的加工工艺

大豆蛋白水解成多肽后具有的大豆蛋白无可比拟的生理活性及营养功能,本文通过研究大豆多肽成分和性质,通过多肽饮料配方与生产工艺的确定,生产出营养价值丰富,产品质量稳定,并具有一定口味的大豆多肽饮料产品。     

脂肪酶在海参内脏多肽气味与口感可接受性优化中的应用

针对海参内脏多肽气味特殊、口感苦麻刺激,难以加工利用的现状,本文探讨了脂肪酶对海参内脏多肽制品的气味与口感可接受性优化作用。本文将蛋白酶与脂肪酶复合作用制备海参内脏多肽制品,以感官评价分数为指标考察其优化程度。单因素实验结果表明,脂肪酶对海参内脏多肽具有显著的风味矫正作用,可有效脱除其刺激性气味与苦涩麻辣口感。在单因素实验基础上采用Box-Behnken设计对加工条件进行优化,结果表明,对海参内脏多肽感官评价分数影响的大小依次为第二次酶解温度 > 第二次酶解时间 > 脂肪酶用量;在第二次酶解温度42 ℃,第二次酶解时间2.2 h,脂肪酶用量为质量分数0.09%时,得到最高感官评价分数9.6分,加工工艺条件最优。将响应面法获得的最优条件下的制备的产品与漂洗法获得的产品对比,脂肪酶法的感官得分与色泽指标显著优于后者;脂肪酶法产率为8.15%,远高于同等条件下漂洗法的产率4.43%。