14-3-3 zeta蛋白C-端多肽抗体的制备与鉴定

目的制备14-3-3 zeta蛋白C-端多肽多克隆抗体,并鉴定其特异性。方法用生物信息学分析14-3-3 zeta蛋白的同源性、亲水性和抗原性,设计并合成zeta蛋白C-端特异性的氨基酸序列,将其与牛血清白蛋白铰链;分别转化14-3-3的7个亚型质粒于大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,并分离纯化His-zeta融合蛋白;分别以zeta C-端多肽及zeta融合蛋白为抗原,免疫新西兰大耳白兔,制备多克隆抗体;用Western blot分析zeta蛋白C-端多肽抗体亚型特异性,并用该特异性抗体检测zeta蛋白在COS-7细胞中的分布规律。结果在14-3-3的7个亚型蛋白存在的条件下,zeta蛋白C-端多肽抗体仅识别zeta亚型蛋白,而zeta融合蛋白抗体可以识别gamma、zeta、tau3种亚型;14-3-3zeta蛋白主要分布在COS-7细胞质一侧。结论已获得了亚型特异性的14-3-3zeta多克隆抗体,该抗体可用于14-3-3zeta免疫细胞化学等分析。     

虾夷扇贝裙边多肽提高鲢鱼肌原纤维蛋白结构稳定性

采用添加0、2、4 g/100 mL虾夷扇贝裙边多肽（Patinopecten yessoensis mantle polypeptide，PMP）修饰鲢鱼肌原纤维蛋白（myofibrillar protein，MP），通过测定修饰前后MP的巯基含量、羰基含量、傅里叶变换红外光谱、紫外吸收光谱及内源荧光光谱，研究PMP对鲢鱼MP结构的影响。结果表明：MP总巯基、活性巯基、羰基含量均随PMP添加量升高而降低；修饰后的MP α-螺旋相对含量无显著变化，但β-折叠相对含量随PMP添加量增加降低，β-转角相对含量随PMP添加量增加而升高，PMP的添加有利于延缓MP的展开，维持MP结构的稳定性；PMP也有效延缓了MP的羰基化。PMP可作为潜在的天然抗氧化剂、低温保护剂和凝胶质构增强剂。     

Evolutionary Adaptation and Amyloid Formation: Does the Reduced Amyloidogenicity and Cytotoxicity of Ursine Amylin Contribute to the Metabolic Adaption of Bears and Polar Bears?

Much of our knowledge of diabetes is derived from studies of rodent models. An alternative approach explores evolutionary solutions to physiological stress by studying organisms that face challenging metabolic environments. Polar bears eat an enormously lipid-rich diet without deleterious metabolic consequences. In contrast, transgenic rodents expressing the human neuropancreatic polypeptide hormone amylin develop hyperglycemia and extensive pancreatic islet amyloid when fed a high-fat diet. The process of islet amyloid formation by human amylin contributes to β-cell dysfunction and loss of β-cell mass in type 2 diabetes. We show that ursine amylin is considerably less amyloidogenic and less toxic to β-cells than human amylin, consistent with the hypothesis that part of the adaptation of bears to metabolic challenges might include protection from islet amyloidosis-induced β-cell toxicity. Ursine and human amylin differ at four locations: H18R, S20G, F23L, and S29P. These are interesting from a biophysical perspective, since the S20G mutation accelerates amyloid formation, but the H18R slows it. An H18RS20G double mutant of human amylin behaves similarly to the H18R mutant, indicating that the substitution at position 18 dominates the S20G replacement. These data suggest one possible mechanism underpinning the protection of bears against metabolic challenges and provide insight into the design of soluble analogs of human amylin.     

固体脂质纳米粒的研究及应用

固体脂质纳米粒(SLN)作为新型的脂质药物传输载体而备受关注。现报告本课题组的研究,结合复习文献对SLN的基因传递、蛋白多肽类药物非注射给药、难溶性药物增溶及靶向给药系统的研究和应用作一综述。     

苦杏仁多肽对红葡萄酒陈酿抑菌规律初探

山杏仁在干燥、粉碎、除油脂后,经蛋白酶水解、超滤分离,可制备成苦杏仁多肽.以苦杏仁多肽为防腐物质,抑制红葡萄酒陈酿时杂菌的生长.结果表明,短肽的抑菌效果强于长肽或大肽,并且对酒体稳定性基本无影响；苦杏仁短肽的最适添加浓度为600 mg/mL;苦杏仁多肽对红葡萄酒中杂菌的抑制作用具有选择性,对于革兰氏染色阴性菌株生长的抑制作用强于阳性菌株.     

海参蛋白酶解工艺条件的优化

为获得多肽含量高的海参蛋白水解液 ,研究了 3种蛋白酶对海参蛋白的水解能力 ,确定以A .S1 3 98中性蛋白酶为最佳用酶。又通过正交实验得出A .S1 3 98中性蛋白酶的最佳酶解工艺条件 :温度 50℃ ;pH7.0 ;底物浓度 8% ;加酶量 1 .5% ;水解时间 1 .5h     

功能肽的研究进展

迄今为止,人们已从人体、动物、植物和微生物等生物体中提取或合成了各种具有生理活性的多肽物质。本文较为全面地介绍了功能肽的不同来源及生产方法,比较了几种常用生产方法的优、缺点,并概述了近几年国内外几种重要功能肽的研究进展。     

多肽尿素生产技术与发展前景

多肽尿素具有提高尿素利用率、改良土壤、增加产量、改善品质、智能缓释、促早熟以及增强作物抗旱、抗寒、抗病等独特功效。概述了多肽尿素的制取原理及生产技术，分析了多肽尿素的市场与效益，展望了多肽尿素在农业领域的发展前景。     

p（AA-co-CTS）两性型规整吸附介质的制备及其对多肽动态吸附性能

以丙烯酸（AA）、壳聚糖（CTS）为原料单体，选用抗坏血酸（VC）作为还原剂取代传统胺类还原剂，低温冷冻聚合法1步制备了富含-COOH基团和-NH2基团的离子交换型规整分离介质p(AA-co-CTS)，聚合时间从文献报导的18h缩短至5h。聚合最优配方为：引发剂总质量分数为0.75%，其中VC与过硫酸铵(APS)的质量比为0.5，单体总质量分数为7%，CTS与AA的质量比为0.2，交联剂质量分数为1.05%，所制备的p(AA-co-CTS)规整吸附介质孔隙连续，孔隙范围为100~500μm。 p(AA-co-CTS)介质孔隙内表面丰富的-NH2、-COOH基团对多肽分子有着强吸附能力，同时以吸附传质单元数（NTU）法探究传质参数与吸附操作条件的关系，并确定最佳吸附操作条件为：吸附液流速为3~4mL?min-1，吸附温度为293.15K，进料液浓度400~500mg?L-1，最大动态吸附容量为74.5~79.4mg?g-1。所制备的两性型分离介质属于超大孔隙规整介质，可直接用于海洋渔业资源的脚料酶解液中活性多肽的吸附，操作上可取代传统吸附工艺中过滤、离心及散装树脂层析等单元操作。