适配体增强金纳米粒子类过氧化物酶活性快速检测鸡蛋中的恩诺沙星

目的 利用核酸适配体增强金纳米粒子类过氧化物酶(peroxidase,POD)活性,建立了一种快速检测鸡蛋中恩诺沙星的方法。方法 金纳米粒子具有类POD活性,能催化H₂O₂氧化3,3’-5,5’四甲基联苯胺(3,3’-5,5’tetramethylbenzidine, TMB)反应,加入核酸适配体后,适配体通过Au-N键吸附于金纳米粒子表面,使催化活性增强;进一步加入靶标物恩诺沙星后,核酸适配体与靶标物特异性结合而脱离金纳米粒子表面,使催化活性减弱。基于此建立了恩诺沙星比色检测方法,优化了反应条件,并将其用于鸡蛋样品检测中。结果 在核酸适配体浓度为10 nmol/L, TMB浓度为0.3 mmol/L,显色反应时间为20 min时,反应体系的吸光度变化随恩诺沙星浓度在5～150μmol/L范围内具有良好的线性关系,检出限为1.98μmol/L。该方法具有良好的选择性和抗干扰能力,将此法用于鸡蛋中的恩诺沙星的检测,加标回收率为92.67%～109.04%。结论 该方法简便快速,为鸡蛋中恩诺沙星检测提供了一种新的尝试方法。     

一种新型定量检测恩诺沙星量子点免疫层析方法的建立

恩诺沙星作为一种应用较为广泛的抗生素,因在实际抽检中出阳率较高引起了广泛的重视。本研究建立了一种可以快速定量检测恩诺沙星,采用量子点进行标记和示踪的免疫层析方法。通过对新型的纳米荧光材料量子点结合抗原抗体等活性材料的技术研究、样本前处理试剂的研发、浓度的筛选优化等技术实现量子点材料与食品基质的配适,建立定量检测恩诺沙星免疫层析的平台。通过对试剂盒整体的相关优化,本检测方法线性范围为2~1000 ng/mL,最低检测限为1.80 ng/mL,精密度可控在10%以内,热加速稳定性为37 ℃可稳定放置10 d,性能优越。与传统液相色谱方法比较,简便快捷,整体检测时间可控在20 min内,检测结果相关性较好,相关系数为0.98。本研究弥补国内对量子点与免疫层析技术相结合定量检测食品类抗生素残留方面研究的空缺,可实现大批量现场原材料的快速筛查,推动食品快检技术的发展。     

不同水温条件下恩诺沙星及其代谢物在俄罗斯鲟体内的代谢及消除规律

目的探究12～15℃低水温及18～21℃高水温条件下,恩诺沙星在俄罗斯锝体内的代谢及消除规律。方法以60 mg/(kg·bw)剂量连续5 d对体重为(750±50) g的健康俄罗斯锝灌服恩诺沙星,并于停药后1～140 d内连续采集血浆、肌肉、肝脏、肾脏、皮肤及鳃样品,经高效液相色谱-串联质谱法测定其中恩诺沙星及其代谢产物环丙沙星含量,研究连续5 d给药后恩诺沙星及其代谢产物环丙沙星在俄罗斯鲟体内的代谢及消除规律,得出不同温度条件下的休药期。结果在2种水温条件下,恩诺沙星在俄罗斯锝体内各组织中的达峰时间t_(max)均为1 d;夏季达峰浓度C_(max)小于冬季C_(max);药浓度-时间曲线下总面积AUC随温度升高而增大;药物自体内消除的清除率Cl_(z/f)及消除半衰期T_(1/2z)数据均表明,随温度升高药物清除速度加快。恩诺沙星在俄罗斯锝体内代谢产物为环丙沙星,其消除趋势与恩诺沙星大致相同。结论以皮肤和肌肉作为可食性组织,以恩诺沙星和环丙沙星总量降至0.1 mg/kg为标准,连续5 d以60 mg/(kg·bw)对俄罗斯锝口灌恩诺沙星后,建议冬季低温条件下休药期为124.2 d,夏季高温条件下休药期为112.9 d。     

2018年鸡蛋的国家食品安全监督抽检结果分析

目的 分析2018年我国鸡蛋的食品安全形势。方法 汇总2018年鸡蛋国家食品安全监督抽检结果, 对其不合格项目等信息进行分析。结果 2018年共抽检鸡蛋1310批次, 检出不合格样品77批次, 总体不合格率为5.88%, 不合格原因是检出禁用兽药氟苯尼考、恩诺沙星、氧氟沙星。柴鸡蛋、草鸡蛋、土鸡蛋的不合格率分别为10.53%、8.93%和7.49%, 均高于普通鸡蛋。一季度和三季度抽样的鸡蛋不合格率分别为9.16%和5.74%, 明显高于二季度(2.56%)。结论 鸡蛋中检出氟苯尼考、恩诺沙星、氧氟沙星等禁用兽药的问题应当引起重视。     

酶联免疫吸附法检测动物源性食品中恩诺沙星残留量

为检测动物源性食品中恩诺沙星残留量,评估基于卵黄抗体的间接竞争酶联免疫吸附法检测恩诺沙星的可行性,用活性脂法将恩诺沙星同卵清蛋白偶联制备免疫原和包被抗原并用紫外光谱进行验证。用聚乙二醇-6000提取卵黄抗体。五免之后效价达到峰值1∶32 000。用间接竞争酶联免疫吸附法确定包被原质量浓度、卵黄抗体的稀释倍数和IC_(50)分别为38 ng/m L、1∶64 000和18.207 ng/m L,回归曲线方程为y=0.891 1-0.016 5x(R~2=0.990)。结果表明,制备的抗恩诺沙星卵黄抗体为进一步建立检测动物源性食品中恩诺沙星的残留的免疫方法提供参考依据。     

基于末端脱氧核苷酸转移酶协同G-四链体核酶的恩诺沙星检测新方法

恩诺沙星因抗菌活性强、抗菌谱广而广泛应用于动植物疾病治疗，但过度使用甚至滥用会导致其在动植物食品中的残留量超标，因此发展高效的恩诺沙星检测方法至关重要。本工作基于末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）协同G-四链体核酶设计信号放大策略，建立了一种新型恩诺沙星（ENR）电化学检测方法。目标物恩诺沙星与特异性核酸适体的结合触发TdT在电极表面的扩增反应，产生G-四链体核酶纳米线结构，进而发挥辣根过氧化物酶活性催化信号放大，实现恩诺沙星的高灵敏和高特异性检测。本方法对恩诺沙星的线性检测范围为0.5 ~ 50 ng/mL，检测限低至0.043 ng/mL。此外，该无标记电化学生物传感器简单快速，成本低，并成功应用于对实际食品样本的分析检测，显示出较好的应用潜能。     

超高效液相色谱-质谱法测定豆芽中多菌灵、2,4-二氯苯氧乙酸、恩诺沙星残留

建立豆芽中多菌灵、2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-dichlorophenoxyacetic acid,2,4-D）、恩诺沙星残留检测的超高效液相色谱-质谱的分析方法。样品经酸化乙腈提取,浓缩后经WAX小柱净化,采用Waters C18色谱柱分离,以甲醇和0.1%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾-正负离子多反应监测模式,外标法定量。在5～150 μg/L的质量浓度范围内,各种添加剂相关系数均大于0.999 0,该方法的检出限在0.5 μg/kg之间,定量限在1.5 μg/kg之间。添加5.0、10.0 μg/kg和25.0 μg/kg三个不同水平时,多菌灵、2,4-D、恩诺沙星的回收率在80.4%～97.8%之间,日内和日间相对标准偏差在1.25%～5.47%之间。该方法简单、灵敏度高、分析时间短,适用于多菌灵、2,4-D、恩诺沙星的测定。     

量子点微球荧光免疫层析定量检测水产、畜禽肉组织中恩诺沙星

目的 建立一种快速定量检测水产、畜禽肉组织中恩诺沙星的新方法学。方法 以量子点荧光微球为新型标记探针,通过参数优化,制备获得量子点荧光微球免疫层析试纸条;进一步以T/C比值法建立定量检测恩诺沙星的新方法。结果 在最优条件下,该试纸条检测缓冲液中恩诺沙星半数抑制浓度为1.035 ng/mL,最低检测限为0.125 ng/mL;检测水产、畜禽肉组织中恩诺沙星的定量检测范围为8.75~560 μg/kg,半数抑制浓度为72.45 μg/kg,加标回收实验显示该方法定量检测组织样本中恩诺沙星的回收率在83.03~124%之间,变异系数小于15%,检测15个实际含有恩诺沙星的水产以及畜禽肉组织样本,其结果与LC/MS/MS方法检测结果高度一致;此外,加速保存实验结果显示该试纸条在室温下可保存一年。结论 本研究以量子点荧光微球为新型标记探针,构建了高灵敏定量检测恩诺沙星的新方法,实现了水产、畜禽肉组织中恩诺沙星的简单、快速、定量分析。     

HPLC-MS/MS法同时测定牛肉中80种兽药及其代谢物

为全面排查宁夏地区牛肉兽药残留风险,从农业农村部规定的禁停用药物、 GB 31650—2019《食品安全国家标准 食品中兽药最大残留限量》中规定有最大残留限量的药物以及宁夏养殖环节大量使用药物三方面筛选确定12类药物,利用简单、快捷的前处理方法和超高效液相色谱-串联质谱多反应监测分析技术,建立了一次进样可同时分析检测12类80种兽药及其代谢物残留的快速检测方法。样品采用Oasis PRiME HLB固相萃取柱净化,经Waters HSS T3色谱柱分离,多反应监测模式监测,基质匹配外标法定量。结果表明:80种兽药及其代谢物在基质匹配标准溶液1.0～50.0μg/L的质量浓度范围内呈现良好的线性关系,相关系数均大于0.990,方法定量限在2.0~5.0μg/kg,方法在2.0～100.0μg/kg的平均回收率为60%～103%,相对标准偏差(n=5)均小于20%;应用该检测方法对40份市售牛肉进行检测,其中4份牛肉检出兽药残留,分别为土霉素(54.5μg/kg)、磺胺间甲氧嘧啶(23.3μg/kg和35.4μg/kg)及恩诺沙星(118μg/kg),再分别使用GB/T 21317—2007、GB/T 20759—2006、GB/T 21312—2007方法对阳性样品进行复检,结果一致。经验证表明:该检测方法定性定量结果准确可靠、灵敏度高、重现性好,可满足对牛肉中兽药残留检测分析的要求。