米曲霉果糖基转移酶催化合成蔗糖-6-乙酸酯

对来自于米曲霉(Aspergillus oryzae)的果糖基转移酶催化蔗糖(s)与葡萄糖-6-乙酸酯(g-6-a)生成蔗糖-6-乙酸酯(s-6-a)的反应进行了研究。考察了底物质量比m(g-6-a)∶m(s)、反应温度、反应时间、pH、酶的质量浓度对反应的影响。单因素实验结果表明,最优的催化反应条件为:反应温度50℃、pH=6.2、m(g-6-a)∶m(s)=1∶3、反应时间48 h、酶的质量浓度为4.0 g/L。在该条件下,g-6-a的摩尔转化率可达26.69%。     

以玉米粉为原料L-乳酸高产菌株的选育和产酸条件的研究

以玉米粉为原料,米根霉为初始菌株,采用超声波-紫外线进行复合诱变,选育出一株发酵玉米粉产L-乳酸的米根霉菌株NF12,其产酸量较初始菌株提高了21.61g/L。确定了10L罐发酵玉米粉产L-乳酸的最适发酵条件,结果表明:70%装填量,5%接种量,30℃,300r/min,通气流量0.6L/(L·min),溶氧90%,在此条件下进行发酵,L-乳酸产量为83.15g/L。     

Ferulic Acid Production in the Brewing of Rice Wine (Sake)

The traditional Japanese alcoholic beverage sake is produced by fermentation of rice by Saccharomyces cerevisiae and Aspergillus oryzae. A. oryzae releases ferulic acid, an antioxidant, from steamed rice during the fermentation process. The concentration of ferulic acid increased with time during fermentation and the production rate peaked 9–12 days post inoculation. Analysis of the fermentation cultures of Aspergillus oryzae, by high‐performance liquid chromatography (HPLC), revealed that p‐coumaric acid induced an 18.9‐fold increase in the level of ferulic acid. Furthermore, SDS‐PAGE analysis revealed an increase or decrease in the level of specific proteins after the addition of p‐coumaric acid to fermentation cultures of Aspergillus oryzae. Ferulate esterase (FAE) activity was observed in the fermented sake ten days following the start of the fermentation process. These results suggest that the level of ferulic acid is regulated by the enzymes synthesized by A. oryzae during the sake brewing process.     

酱油酿造菌米曲霉(Aspergillus oryzea)的分析研究

本文对从中科院微生物研究所,轻工部食品发酵工业科研所、上海酿造科研所及生产厂家收集到的11个酱油酿造常用菌米曲霉菌株,进行了孢子数、孢子大小、孢子萌发率和蛋白酶(酸性、中性、碱性)、糖化淀粉酶、果胶酶、纤维素酶活力的测定和分析.为目前酱油酿造菌提供了更多的检测参考数据,也为今后对菌种进一步选育打下了基础.通过对11个菌株的三角瓶菌种的测定,各特性平均值分别为:孢子数14.96亿/g,孢子直径0.99μm,孢子萌发率60.86%,酸性蛋白酶活力3 410单位/g,中性蛋白酶活力2 549单位/g,碱性蛋白酶活力3 611单位/g,糖化淀粉酶活力997单位/g,果胶酶活力844单位/g,纤维素酶活力595单位/g.     

重组酵母产中性米曲蛋白酶的工艺研究

通过单因素试验探索重组酵母产中性米曲蛋白酶的最佳条件。结果显示,重组酵母菌产蛋白酶的最佳表达条件是:诱导时间132 h,诱导温度26℃,诱导接种量为OD600值6.0,诱导培养振荡速度为240 r/min,诱导剂(甲醇)添加量0.8%(体积比),YNB添加量7 g/L,pH 7.0。在最佳培养条件下,发酵液中的最高酶活达到538 u/mL。与初始的发酵条件相比,中性米曲蛋白酶的产量提高1倍。     

米曲霉发酵液中蛋白动态变化的研究

本文利用葡萄糖和吐温80作为额外碳源培养米曲霉,对其生物量积累,胞链接蛋白以及发酵液蛋白随培养时间的变化情况进行了研究。以葡萄糖作为额外碳源时,米曲霉生物量积累速度较快,在培养24 h已达最大值,为31.97 g/L;当米曲霉以吐温80作为额外碳源时菌体积累较慢,在96 h时达到最大值,为11.15 g/L。发酵液中蛋白总量在以葡萄糖作为额外碳源时比以吐温80时低。以吐温80作为额外碳源时,胞链结蛋白在72 h达到最大值的5.65 mg/g,当以葡萄糖作为额外碳源时,米曲霉胞链结蛋白含量在48 h达到最大值,为1.71 mg/g。利用SDS-PAGE检测192 h内胞连接蛋白质的表达与发酵液中的蛋白质的含量变化与利用lowry法测定的蛋白质含量具有一致的变化趋势:在米曲霉的快速生长期和稳定期时胞链结蛋白种类增加,在衰退期胞链结蛋白种类减少。