壳聚糖固定化酶和细胞研究新进展

分析评价了壳聚糖作为固定化酶和细胞载体的特性,概述了壳聚糖凝胶固定化酶和细胞的形态及制备方法,着重介绍了近年来壳聚糖固定化酶和细胞的改进方法,并指出今后壳聚糖固定化酶和细胞的发展方向。     

流感疫苗诱导Hela细胞凋亡与免疫调节效应

目的观察流感疫苗诱导Hela细胞凋亡与免疫调节效应。方法将流感疫苗作用于Hela细胞,采用MTT比色法和流式细胞仪检测疫苗对Hela细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响;同时用MTT法检测疫苗对小鼠脾细胞增殖的影响;采用结晶紫、中性红染色及MTT法,分别检测脾细胞诱导上清中IFN-γ、IL-2和TNF-α的分泌情况。结果一定浓度流感疫苗能够抑制Hela细胞增殖,促进细胞凋亡,凋亡率可达58·37%;还可促进小鼠脾细胞增殖及Th1型细胞分泌IFN-γ。结论流感疫苗能够抑制Hela细胞增殖,此作用可能是通过诱导Hela细胞凋亡、调节免疫细胞增殖及IFN-γ的分泌而实现的。     

细胞固定化催化生产精细化学品的研究进展Q

摘要：细胞固定化技术具有流程简单、生物相容、操作稳定等优点，可有效保证细胞活性，实现高效的细胞催化生产精细化学品。本文介绍了表面附着、凝胶包埋、聚电解质层层自组装膜等多细胞固定化方法，及其在二元醇、生物乙醇、乳酸、酯、多糖等精细化学品生产中的研究现状和进展，并分析讨论了各种方法存在的问题。同时，总结了近年来新发展的单细胞纳米涂层固定化方法的机理、趋势及应用于精细化学品生产的可能性。最后对细胞固定化催化生产精细化学品面临的技术挑战及研究方向做出展望，以期为精细化学品生产提供一定的技术支持。     

树突细胞算法在线分析组件的研究

原始树突状细胞算法（DCA）的离线分析过程,将会导致时间差异,从而产生假警报,增加了虚警率,也会导致攻击的成功发生,这对一个人侵检测系统来说是致命的。因此,文中的目的就是在不影响检测精度的前提下提高检测速度。于是文中提出了分片思想的在线分析组件与DCA相集成的方法,即根据抗原采样数量或者时间将一系列已处理的信息分割成为更小的部分,使得每个分片独立地进行实时的、周期性的分析,这样在每个分片内的入侵攻击就能及时地被识别出来。文中给出了DCA在线分析模块的伪代码描述,并且将其应用于SYN端口扫描的检测实验中。结果表明,DCA在线分析模块在不影响检测精度的前提下有效地提高了检测速度。     

西洋参细胞液体培养人参皂甙的动力学研究

重点研究了西洋参细胞在改良 ＭＳ培养液中代谢生长状况（ＭＳ培养基加 ＫＴ０． ２ ｍｇ／Ｌ，ＩＢＡ５ｍｇ／Ｌ，ＭｇＳＯ４９２·５ｍｇ／Ｌ），对其发酵曲线及细胞生长作了检测，并对细胞 生长动力学作了研究，结果表明细胞生长动力学基本符合Ｍｏｎｏｄ比生长速度式，μｍａｘ＝ ０．１６１３ｄ－１，Ｋｓ＝４７．５９ｇ／Ｌ。     

从微生物细胞中分离提取PHB的方法的综述

介绍和归纳目前文献报导的从微生物细胞中分离提取ＰＨＢ的各种方法，包括溶剂萃取法，化学试剂法，机械破碎法和酶法。对这些方法的优缺点进行了评述，提出发展机械的，物理的，化学的，生物的多种方法相结合以去除菌体中非ＰＨＢ的杂质来分离提取ＰＨＢ半是今后研究的一个方向。     

固定化紫草细胞生产紫草宁衍生物

用海藻胶包埋紫草细胞,在紫草色素生产培养基M_9中,常温、黑暗下培养不同时间,收集培养液并提取色素,进行紫外—可见全波长分光光度扫描和TLC分析。结果表明:固定化紫草细胞可连续分泌紫草色素,其主要成分与天然成分基本相同,产量已达到一定水平。此外对海藻胶包埋条件、固定化珠粒的稳定性以及1L固定化植物细胞反应器生产紫草色素工艺进行了讨论。     

生物反应器细胞培养制备人用狂犬病疫苗

目的应用生物反应器培养细胞和病毒,大规模生产人用狂犬病疫苗。方法以巴斯德PV2061为毒种,以143代以内Vero细胞为培养基质,应用生物反应器,每升投放25g微载体,灌流式细胞培养,连续收获病毒液,经浓缩、灭活、纯化,制成Vero细胞狂犬病疫苗。结果细胞培养密度达1.2×107～1.5×107个/ml,病毒感染后可连续收获18～22d,病毒最高滴度8.5LogLD50/ml,平均滴度7.6LogLD50/ml。经柱层析纯化,杂蛋白去除率达99.95%以上,总蛋白含量≤80μg/g,DNA含量≤10pg/0.5ml,GP含量3.5～4.5IU/0.5ml,效力≥4.5IU/0.5ml。结论应用生物反应器细胞培养,可以大规模生产优质Vero细胞人用狂犬病疫苗。     

微小隐孢子虫CP15/60基因在Hela细胞中的表达

目的 构建隐孢子虫CP15/60真核表达载体pcDNA3.1-15/60,观察其在Hela细胞中的表达。方法用Xho I和EcoR　I从pMD18-T-15/60中酶切得到CP 15/60基因,将其插入真核表达载体pCR3.1（+）的 XhoI和EcoRI位点,构建CP15/60真核表达载体pcDNA3.1-15/60,用脂质体介导法将其转染Hela细胞,并用G418加压筛选,用RT-PCR方法检测外源CP15/60基因的转录,ELISA法和间接免疫荧光法检测其活性。结果 酶切鉴定表明已成功构建了重组真核表达载体pcDNA3.1-15/60,外源CP15/60基因能在转染细胞中有效转录,经检测表达产物具有良好的生物活性。结论 已成功地构建了pcDNA3.1-15/60真核表达载体,并在Hela细胞中具有良好的表达。     

乙型脑炎灭活疫苗(Vero细胞)中间品的稳定性

目的对乙型脑炎灭活疫苗(Vero细胞)生产各阶段的中间品进行稳定性观察。方法将各阶段中间品置4℃保存,于不同时间取样,进行病毒滴度、抗原含量和小鼠免疫原性检测。结果4℃下病毒收获液14d内滴度下降8.0%,灭活收获液的抗原含量8周内下降7.3%。浓缩原液、鱼精蛋白处理原液、蔗糖区带离心原液抗原含量在12周内分别下降了9.7%、8.3%和8.3%,加保护剂脱糖原液12周内抗原含量下降了8.4%,稀配半成品24周内抗原含量下降了2.98%,但在12周内均保持了良好的小鼠保护效力。结论上述样品在4℃下,保存期限内均保持了良好的稳定性。