缺锌大鼠海马生长抑素神经元突触结构的变化

实验采用液体缺锌饲料罐胃的方式使大鼠缺锌两周，采用ＡＢＣ免疫酶技术，电镜下观测了海马生长抑素（ＳＳ）神经元突触结构及其内线粒体数目以及含有不同级数量（〈１０，１１～５０，〉５５）ＳＳ阳性囊泡突触比例的变化，结果表明：在缺锌状态下，海马ＳＳ神经元突触结构内线粒体数减少（Ｐ〈０．０１）少于１０个囊泡的ＳＳ阳性突触增加，而大于５０个囊孢的ＳＳ阳性突触则明显减少（Ｘ＾２＝１０５．１８，Ｐ〈０．０５），说明     

老龄大鼠脑缺血再灌注海马神经元iNOS的表达及超微结构改变

目的：观察老年大鼠脑缺血再灌注后海马神经元诱导型一氧化氮合酶（induced nitric oxide synthase iNOS）的表达及超微结构变化。方法：建立老年大鼠不完全性全脑缺血动物模型，应用免疫组织化学染色和透射电镜，观察海马神经元iNOS的表达及超微结构变化。结果：缺血30min后再灌注24h组海马神经元iNOS活性显著升高；缺血30min再灌注21h和48h组中量表达；假手术组、缺血30min即刻取材、再灌注1h、6h、96h组iNOS几乎无表达；再灌注超过48h组海马神经元损伤较重。结论：NO是脑缺血后神经元迟发性死亡的重要因素之一。     

大鼠胚胎海马移植物治疗^137Csγ射线所致的脑机能障碍

用条件饮水反应实验方法检测大鼠的学习能力。应用外科手术将大鼠胚胎海马组织移植物植入３５日龄爱照大鼠海马。结果表明，大鼠条件饮水测验成绩具有波动性；手术前后对照大鼠条件饮水测验成绩无显著差异，而移植组大鼠手术后的条件饮水测验成绩显著高于手术前；手术前两组大鼠的条件饮水测验成绩无显著差异，手术后移植组大鼠条件饮水测验成绩显著高于对照组。     

基于W/O/W溶剂挥发复乳法的载药纳米微球合成及其作用研究

以乳酸-羟基乙酸共聚物(poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA)、聚乙二醇(PEG)和乳铁蛋白(lactoferrin,Lf)为原料,采用复乳法制备荷载JNK3-shRNA表达质粒的纳米微球,同时制备空载纳米微球作为对照,将它们分别通过尾静脉注射至大鼠体内,采用HE染色法检测其对脑缺血再灌...     

N-乙酰半胱氨酸对甲基乙二醛诱导的大鼠海马神经元毒性损伤的保护作用

目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对甲基乙二醛(MG)诱导的海马神经元损伤的保护作用及可能机制.方法 取新生24 h SD大鼠的海马神经元原代培养至第7天,予MG和(或)NAC干预24 h,异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V(Annexin V-FITC)联合碘化丙啶(PI)法检测海马神经元的凋亡率,以2,7-二氢二氯荧光素(DCFH)染色,流式细胞仪测定细胞内活性氧(ROS)水平;采用实时RT-PCR法及Western印迹法检测脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体酪氨酸蛋白激酶(TrkB)mRNA和蛋白的表达水平.结果 MG组海马神经元凋亡率(8.80±0.31)%高于对照组(1.60±0.15)%及MG+NAC组(4.83±0.31)%;ROS水平(10 229±946)高于NAC组(2118±320)、对照组(4265±82)、MG+NAC组(3886±415)及预处理(pre)NAC+MG组(2997±606).与对照组相比,MG组海马神经元BDNF mRNA及蛋白表达水平明显增加,而TrkB mRNA及蛋白表达水平显著下降.与MG组相比,MG+NAC组、pre NAC+MG组海马神经元BDNF mRNA及蛋白表达水平明显降低,而TrkB mRNA及蛋白表达水平明显增加.上述差异均具有统计学意义.结论 MG可能部分通过诱导细胞内ROS产生,导致神经元氧化应激损伤,同时通过抑制TrkB的表达,阻断BDNF-TrkB信号通路.NAC可能通过抗氧化及抗凋亡,且部分通过激活BDNF/TrkB通路发挥神经保护作用.     

电针对局灶脑缺血／再灌注大鼠海马内NF-κB旁路途经的调节作用

目的：观察局灶脑缺血/再灌注后不同阶段大鼠海马内IKKα及NF-κBp52的表达及电针对NF -κB旁路途径的调节作用。方法：SD健康雄性大鼠（280-300g）108只随机分为假手术组（n＝12）,电针组（n＝48）及模型组（n＝48）,按照再灌注后24h与7d将电针组及模型组分为2个亚组。采用右侧大脑中动脉闭塞/再通线栓法建立局灶脑缺血/再灌注模型。电针组取“合谷”穴、“太冲”穴,选用G6805-1型针灸治疗仪进行电针治疗。用FJB染色观察脑缺血/再灌注后海马区内神经细胞的损伤情况;利用免疫组化、Western blot 检测不同时间点海马区内IKKα的蛋白表达及NF-κB p52胞核内的蛋白表达变化。结果：FJB染色显示局灶脑缺血/再灌注后,海马区内神经细胞变性损伤明显（P＜0．05）;与模型组比较,电针干预后海马区内神经细胞变性损伤减少（P＜0．05）。免疫组化及Western blot 显示模型组大鼠海马内IKKα表达于再灌注后24h及7d均显著升高（P＜0．05）;胞核内NF-κB p52的蛋白表达随IKKα表达增加而增加（P＜0．05）。电针组与模型组比较,海马内IKKα蛋白表达及胞核内p52的蛋白表达明显减少（P＜0．05）。结论：脑缺血/再灌注刺激能诱发海马区内IKKα表达升高,活化p52入核激活信号通路造成海马区内神经细胞的损害;电针干预后能明显抑制IKKα的表达,阻止其活化p52进而有效缓解缺血/再灌注后海马内神经细胞的损伤。     

迷走神经刺激对癫痫大鼠海马缝隙连接蛋白43表达的影响

目的观察迷走神经刺激(vagus nerve stimulation,VNS)对海人酸(kainic acid,KA)致癫痫大鼠海马星形胶质细胞缝隙连接蛋白43(Connexin 43,Cx43)表达的影响,探讨Cx43与癫痫之间的关系及其在VNS治疗癫痫中的作用。方法将SD大鼠随机分为对照组、KA组和VNS+KA组,每组10只;KA组和VNS+KA组大鼠左侧脑室注射3μl 0.05%KA溶液,制备癫痫模型,对照组注射等量生理盐水;VNS+KA组行VNS。观察各组大鼠行为变化,记录皮层脑电图(electrocorticogram,ECoG);采用免疫组织化学法和Western blot法检测各组大鼠海马星形胶质细胞Cx43的表达。结果大鼠左侧脑室注射KA 3⁵ min后,KA组大鼠为RacineⅣ5 min后,KA组大鼠为RacineⅣ^Ⅴ级重型癫痫发作,脑电图可见棘波、棘慢波及簇状高尖波等异常脑电发放;VNS+KA组大鼠为RacineⅠⅤ级重型癫痫发作,脑电图可见棘波、棘慢波及簇状高尖波等异常脑电发放;VNS+KA组大鼠为RacineⅠ^Ⅲ级轻型发作,脑电发放较KA组减轻,对照组无癫痫发作及异常脑电发放。KA组大鼠海马Cx43阳性细胞数和相对表达量均明显高于对照组和VNS+KA组(P均<0.01)。结论癫痫大鼠海马Cx43的表达与癫痫发病机制密切相关,VNS可降低癫痫大鼠海马Cx43的表达,抑制癫痫发作。     

金雀异黄酮通过调控Ca2＋-CaMKIV通路对Aβ25-35诱导海马神经元损伤的保护作用

目的：观察金雀异黄酮通过Ca2＋-钙调蛋白依赖性蛋白激酶IV（calmodulin-dependent protein kinase IV,CaMKIV）通路对Aβ25-35诱导海马神经元损伤的保护作用。方法：取24 h内新生SD乳鼠的海马组织,进行神经元的分离纯化和培养,并用免疫荧光染色进行鉴定。神经元细胞随机分为空白对照组、模型组、金雀异黄酮组（50 μmol/L）和阳性对照戊酸雌二醇组（10 μmol/L）,金雀异黄酮组和戊酸雌二醇组预处理3 h后,除空白对照组外,其他各组采用Aβ25-35诱导海马神经元构建细胞损伤模型。利用噻唑蓝法检测细胞存活率,荧光探针检测神经元细胞内Ca2＋荧光强度,Western blot检测钙调蛋白（calmodulin,CaM）、钙调蛋白依赖性蛋白激酶激酶（calcium/calmodulin dependent protein kinase kinase,CaMKK）、磷酸化钙调蛋白依赖性蛋白激酶IV（p-calmodulin-dependent protein kinase,p-CaMKIV）和p-Tau蛋白的相对表达量。结果：免疫荧光分析结果显示大鼠海马神经元分离成功。与空白对照组比较,模型组海马神经元细胞存活率极显著下降（P＜0.01）,细胞Ca2＋荧光强度极显著升高（P＜0.01）,CaM、CaMKK、p-CaMKIV和p-Tau蛋白相对表达量极显著提高（P＜0.01）;与模型组比较,金雀异黄酮极显著提高了Aβ25-35所致海马神经元损伤模型中细胞的存活率（P＜0.01）,降低了细胞Ca2＋荧光强度（P＜0.01）,下调了CaM、CaMKK、p-CaMKIV和p-Tau蛋白相对表达量（P＜0.01）。结论：金雀异黄酮对Aβ25-35诱导的海马神经元损伤具有明显的神经保护作用,其作用可能是通过Ca2＋-CaMKIV通路介导的。     

蝙蝠葛碱对阿尔茨海默病小鼠海马组织Aβ水平的影响

目的:研究中药提纯成分蝙蝠葛碱对阿尔茨海默病小鼠海马组织Aβ水平的影响。方法:阿尔茨海默病小鼠随机分成对照组、模型组、治疗组、蝙蝠葛碱组。给予蝙蝠葛碱灌胃,观察小鼠Aβ的变化。结果:与模型组比较后,蝙蝠葛碱组Aβ水平明显降低。结论:蝙蝠葛碱能降低Aβ水平,对阿尔茨海默病小鼠具有一定的海马组织保护作用。