L-C ys与葡萄糖对酵母发酵合成谷胱甘肽的影响

通过在7.5 L发酵罐中,分别以流加葡萄糖和L-半胱氨酸与流加葡萄糖协同作用2种方式研究了酵母对分批发酵生产谷胱甘肽的影响。结果表明,从第7 h开始恒速[1.5 g/(L.h])流加葡萄糖直至发酵结束,发酵24 h后GSH产量达最大,为151.6 mg/L,比流加前提高37%。在恒速流加葡萄糖基础上,当发酵至12 h,向发酵罐中一次性添加3 mmol半胱氨酸,最终GSH产量达最大,为213.3 mg/L,比分批发酵提高了93%。     

利用衍生化试剂DTNB测定枸杞中谷胱甘肽

利用5,5'-二硫硝基苯甲酸(DTNB)衍生化试剂和植物材料同步破壁提取的样品处理方法,采用电喷雾质谱法和分光光度法对枸杞中还原型谷胱甘肽(GSH)进行定性、定量分析。枸杞样品提取过程中GSH受破壁后胞外化学环境的影响导致氧化变性。利用5,5'-二硫硝基苯甲酸(DTNB)衍生化试剂同步提取,因生成稳定的GSH的衍生化产物避免了GSH氧化变性导致的GSH分析信息丢失。用UV-Vis分光光度法测定GSH含量,发现枸杞中含有丰富的GSH。标准加入法测定枸杞干品中GSH,其含量范围达(6.56±0.54)mg/g,是目前所测植物样品中GSH含量较高的物种。本研究对药用植物胞内活性物质的准确分析提供方法学的尝试,并通过测定发现枸杞中富含GSH。     

RP-HPLC法测定谷胱甘肽巯基含量

研究一种改良的反相高效液相色谱法测定谷胱甘肽巯基含量。结果表明,采用色谱柱Kromasil-C18(250×4.6mm,5μm),流动相A(0.1%TFA)和流动相B(甲醇)梯度洗脱:流动相B40%￣80%,0￣10min,然后80%B保持5min,流速0.8mL/min,检测波长327nm,得到NTB标准曲线y=3.67059x 0.14123,回收率101.9%,RSD=1.17%,从而建立了一种高灵敏度谷胱甘肽巯基检测方法。     

麦胚蛋白酶解物对小鼠抗氧化作用的研究

研究不同剂量麦胚蛋白酶解物WGPHs对小鼠抗氧化作用的影响。80只昆明系小鼠,雌雄各半,分为基础饲料对照大组和高脂饲料对照大组,各大组随机分为四小组,分别为对照组、WGPHs低剂量组、WGPHs中剂量组、WGPHs高剂量组。对照组灌胃生理盐水,其余三组分别按100、500、1000mg/kg·d的剂量灌胃WGPHs水溶液。各组连续灌胃30d后,处死小鼠,检测小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及丙二醛(MDA)含量。结果表明:WGPHs在显著提高小鼠血清SOD和GSH-Px活性(p<0.05)的同时能显著降低血清MDA含量(p<0.05),其作用效果随着WGPHs剂量的增加而增大,WGPHs可增强小鼠的抗氧化作用。     

甘氨酸甜菜碱处理对桃果实冷害及抗坏血酸-谷胱甘肽循环代谢的影响

以'湖景蜜露'桃果实为试材,采用10mmol/L甘氨酸甜菜碱浸泡处理,分析甘氨酸甜菜碱处理对(0±1)℃贮藏桃果实冷害及抗坏血酸-谷胱甘肽(ascorbic acid-glutathione,AsA-GSH)循环代谢的影响.结果表明:甘氨酸甜菜碱处理能显著抑制桃果实冷害的发生,延缓相对电导率、丙二醛含量和过氧化氢含量的...     

水杨酸处理诱导采后甜瓜抗坏血酸-还原型谷胱甘肽循环代谢清除过氧化氢的作用及机制

目的:研究抗坏血酸(ascorbic acid,AsA)-还原型谷胱甘肽(reduced glutathione,GSH)循环代谢在水杨酸处理采后甜瓜诱导的过量H2O2清除过程中的作用.方法:用4 mmol/L水杨酸浸泡'玉金香'厚皮甜瓜10 min,测定处理后果实常温贮藏过程中丙二醛(malondialdehyde,...     

不同发酵条件对糙米酵素中活性成分的影响

发芽糙米酵素是以发芽糙米为主要原料,经酵母发酵制成的功能性食品。发芽糙米酵素中含γ-氨基丁酸、谷胱甘肽、γ-谷维醇等多种生理功能活性成分。本试验研究了蜂蜜添加量、酵母活化液添加量、发酵时间和发酵温度等因素对产品中谷胱甘肽、γ-氨基丁酸与淀粉酶活力的影响,并以γ-氨基丁酸含量为评价指标,通过Plackett-Burman试验设计方法对其生产工艺进一步优化。结果表明：当蜂蜜添加量为8%,发酵温度为30 ℃,时间为3.9 h,酵母活化液添加量为13%时,γ-氨基丁酸的含量最高为0.80 mg/mL。     

间接荧光法测定水产品中L-谷胱甘肽的含量

建立了间接荧光法测定水产品中L-谷胱甘肽(GSH)含量的方法。样品经三氯乙酸(TCA)沉淀蛋白,调上清液pH至10.5同时二次沉淀蛋白,提取液稀释一定倍数后以邻苯二甲醛(OPA)为荧光衍生剂,等体积(1∶1,v∶v)暗处混合反应1~2min,在Ex 325nm和Em 400nm条件下测得总荧光值A。同时以N-乙基马来酰亚胺(NEM)屏蔽待测液中含巯基的化合物,测得杂质产生的荧光值B,以总荧光值A减去荧光值B,得出GSH所产生的荧光值,间接测得GSH含量。在0.125~1.250mg/L浓度范围内GSH线性关系良好,R2=0.9963,回归方程为Y=57.012X。该方法的相对标准偏差(RSD)为3.83%~5.25%,平均回收率为91.37%~102.20%。改进后的方法弥补了荧光法本身特异性不高的缺点,使得测定更精确,适用于水产品中L-谷胱甘肽含量的测定。     

邻苯二甲醛荧光衍生化法测定食用海藻中还原型谷胱甘肽

用质谱和光谱测定方法研究了OPA和还原型谷胱甘肽(GSH)荧光衍生化反应,发现OPA分子苯环上相邻醛基的歧化反应,使得其与GSH发生衍生化反应时生成三环和二环结构的两种衍生化产物,其中三环结构的衍生化产物具有较强的荧光发射特性。利用OPA荧光衍生化法分别测定了马尾藻、鹿角菜、龙须菜中GSH的含量。在含OPA的PBS缓冲溶液、激发波长λex=350nm时,样品溶液在428nm处发射灵敏的荧光,检测限达3.6×10-8mol/L。用标准加入法分别测定样品中GSH含量分别为:0.0714mg/g(马尾藻),0.1183mg/g(鹿角菜),0.1970mg/g(龙须菜),方法的回收率达到99.22%～100.41%。     

毕赤酵母合成S-腺苷甲硫氨酸过程谷胱甘肽流量分析与控制

S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosyl-L-methionine,SAM)是一种具有广阔应用前景的活性氨基酸,利用毕赤酵母催化合成是SAM主要生产方法,但SAM可被细胞转化为还原型谷胱甘肽(glutathione reduced,GSH),后者可进一步转化为氧化型谷胱甘肽(glutathione oxidized,GSSG)。该研究分析了SAM合成过程中谷胱甘肽总量的动态变化,并基于GSSG/GSH偏移,揭示了胞内氧化还原势与GSH流量变化的相关性。最后添加抗氧化剂维生素C,通过降低胞内SAM→GSH流量及改善细胞活性,进一步提高SAM产率。