Cytotoxic Effect on Osteosarcoma MG-63 Cells by Degradation of Magnesium

Biocompatible and biodegradable magnesium （Mg） based metals have attracted great interest for use in orthopedic implants and devices. Based on our previous study that Mg with and without micro-arc oxidation （MAO） coating showed obvious cytotoxic effect on tumor cells due to the increase of pH value during the degradation of Mg, this study further evaluated the cytotoxic effect of Mg and MAO coated Mg on osteosarcoma （MG-63） cells by analyzing the cell adhesion, morphology and number through observation of scanning electron microscope, as well as live/dead staining, lactate dehydrogenase （LDH） activity and 4, 6- diamidino-2-phenylindole （DAPI） assay. The results indicated that, compared to titanium, Mg could strongly inhibit the cell adherence, morphology and number of MG-63 on the surface of the naked Mg, whereas the MAO coated Mg showed relative weak cytotoxic effect on MG-63 cells, expecting that magnesium based metals with suitable coating can be designed to be applied as tumor prosthesis in the clinical practice.     

多西紫杉醇体外诱导骨肉瘤细胞系 pl-1 的凋亡1

目的: 研究多西紫杉醇对骨肉瘤细胞生长抑制及诱导凋亡作用。方法: 应用细胞计数、 形态学观察、 蛋白含量测定、 流式细胞术和电镜等方法对多西紫杉醇诱导的骨肉瘤进行检测和观察。结果: 多西杉醇在浓度为 4 mg·L^-1时, 对骨肉瘤细胞有明显的生长抑制作用, 并且存在着时间依赖关系和一定范围内的剂量依赖关系。多西紫杉醇可将骨肉瘤细胞阻断于G1期, 并诱导凋亡, 其凋亡细胞具有典型凋亡细胞特征。用流式细胞仪测定细胞周期, 可见明显的凋亡峰。电镜观察染色质沿皱缩的核膜下凝聚, 细胞表面出现凋亡小体, 基质呈絮状致密化, 紫杉醇作用短时间去除后再培养比持续作用更易促使细胞凋亡。 结论: 多西紫杉醇对骨肉瘤细胞的细胞毒作用是诱导其凋亡的结果, 这种诱导凋亡的能力是紫杉醇疗效的基础, 在对骨肉瘤的治疗中, 紫杉醇有着巨大的潜力。     

RNA干扰her-2基因对骨肉瘤细胞血管内皮生长因子-A和白细胞介素-8表达的影响

目的探讨her-2基因沉默对人骨肉瘤细胞株saos-2中血管内皮生长因子-A(Vascular endothelial growth factor-A,VEGF-A)和白细胞介素-8(Interleukin-8,IL-8)表达的影响。方法构建her-2 shRNA重组表达质粒,转染至骨肉瘤细胞株saos-2,同时设空白对照组和shNC阴性对照组;RT-PCR检测her-2、VEGF-A和IL-8基因mRNA的转录水平;Western blot检测her-2蛋白表达的变化;ELISA法检测细胞培养液中VEGF-A和IL-8的分泌水平。结果构建的her-2 shRNA表达载体能抑制her-2基因的表达,对her-2基因mRNA的转录和蛋白表达的抑制率分别为63.05%和62.59%;转染重组质粒her-2 shRNA后VEGF-A和IL-8基因mRNA的转录水平及蛋白分泌水平均显著降低(P<0.01)。结论 her-2基因沉默后,VEGF-A和IL-8基因mRNA的转录水平和蛋白表达水平明显降低,her-2基因参与了骨肉瘤细胞VEGF-A和IL-8基因的表达调控,提示her-2基因可作为研究骨肉瘤血管生成分子机理的新靶点。     

米法莫肽治疗骨肉瘤的研究进展

米法莫肽(Mifamurtide)是一种人工合成的脂质胞壁酰三肽磷脂酰乙醇胺免疫调节刺激剂,其似乎通过激活单核细胞和巨噬细胞来达到抗肿瘤作用.米法莫肽适用于完整手术切除后非转移性骨肉瘤的儿童、青少年和青壮年;术后静脉输注米法莫肽,这种治疗骨肉瘤的罕见药,联合多种化学治疗药物进行治疗.     

可注射磁性液固相变材料用于骨肉瘤的磁共振成像与低温磁热治疗研究

过高温可诱发肿瘤周围正常组织产生炎症以及热辐射损伤。因此研发一种能在相对较低温度下(例如43℃)即可实现肿瘤细胞高致死率的磁性材料对于磁热治疗的临床应用至关重要。本研究聚焦低温、安全、高效磁热疗,选取FDA批准的液固相变材料聚乳酸–羟基乙酸(PLGA)为原料,装载一步温和还原法制备得到的超顺磁性氧化铁纳米颗粒,用于磁共振成像和磁热升温;进一步在PLGA中装载热休克蛋白HSP90的小分子抑制剂–表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG),抑制机体受热保护功能,实现较低温度下杀死肿瘤细胞。体外实验结果表明,制备得到的超顺磁性氧化铁纳米颗粒不仅拥有良好的T₂加权成像性能,还具有优良的磁热升温性能。所制备的PLGA/Fe₃O₄/EGCG复合材料在交变磁场下控制升温至43℃并保温40 min后发现肿瘤细胞死亡率达70%,显示出针对骨肉瘤低温磁热治疗的良好潜力。这种可注射磁热相变材料将为骨肉瘤的治疗提供新的思路和材料支撑。     

核素骨显像在骨肉瘤诊断和治疗中的应用

介绍放射性药物     

单细胞凝胶电泳对辐射所致肿瘤细胞DNA损伤的研究

为探测肿瘤细胞的辐射敏感性,应用单细胞凝胶电泳技术和^3H-TdR掺入方法,对γ射线照射的K562、SMMC－772和HOS8603细胞株单细胞DNA链断裂的辐射效应进行了研究,实验表明上述3种肿瘤细胞在受到1－20Gy^60Coγ射线照射后细胞迁移率增高,迁移距离延长,并且DNA合成受到抑制,^3H-TdR掺入下降。     

醋酸棉酚抑制人骨肉瘤MG-63细胞增殖

目的:研究醋酸棉酚(gossypol acetic acid,GAA)对人骨肉瘤MG-63细胞增殖的影响及其可能作用机制.方法:采用MTT法检测GAA对MG-63细胞的增殖抑制作用,Hoechst 33258荧光染色观察细胞核的形态变化,流式细胞仪分析细胞凋亡相关蛋白Bcl-2与Bax的表达情况.结果:GAA对MG-63细胞具有显著的增殖抑制作用,并呈剂量、时间依赖性;Hoechst 33258荧光染色可观察到明显核固缩、染色质凝集等细胞凋亡现象;流式细胞仪检测发现细胞凋亡相关基因Bcl-2表达下调,而Bax表达则相对上调.结论:GAA能够抑制人骨肉瘤MG-63细胞的增殖,促进其凋亡,其作用机制可能是通过调节凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax实现.     

二氢杨梅素对骨肉瘤细胞增殖的抑制作用

本研究旨在探讨二氢杨梅素对骨肉瘤细胞增殖的抑制作用及其机制。采用MTT法检测不同浓度的二氢杨梅素溶液对骨肉瘤细胞增殖的抑制作用;采用倒置显微镜、Hoechst 33258荧光染色法和流式细胞术检测不同浓度的二氢杨梅素溶液对骨肉瘤细胞形态、凋亡和周期的影响;并进一步采用Western Blot法分析细胞周期蛋白和凋亡蛋白表达的影响。研究结果表明二氢杨梅素对骨肉瘤细胞增殖具有显著的抑制作用,细胞形态发生了明显变化,呈显著的剂量依赖型,其半数抑制浓度（IC50）值为24.41±1.25 μM。细胞周期实验结果表明,经二氢杨梅素处理后,G0/G1期细胞数百分比从60.20%下降到21.50%,而G2/M细胞数百分比从11.60%增加到45.30%,细胞周期蛋白Cyclin B1表达下降引起细胞周期阻滞;此外,抗凋亡蛋白Bcl-2表达和促凋亡蛋白Bax表达的比例显著下降,从而诱导细胞发生凋亡。结果表明二氢杨梅素具有显著的抗骨肉瘤增殖活性,可开发一种潜在的治疗骨肉瘤的功能食品或药物。     

醋酸棉酚抑制人骨肉瘤MG-63细胞增殖

目的研究醋酸棉酚(gossypol acetic acid,GAA)对人骨肉瘤MG-63细胞增殖的影响及其可能作用机制。方法采用MTT法检测GAA对MG-63细胞的增殖抑制作用,Hoechst 33258荧光染色观察细胞核的形态变化,流式细胞仪分析细胞凋亡相关蛋白Bcl-2与Bax的表达情况。结果 GAA对MG-63细胞具有显著的增殖抑制作用,并呈剂量、时间依赖性;Hoechst 33258荧光染色可观察到明显核固缩、染色质凝集等细胞凋亡现象;流式细胞仪检测发现细胞凋亡相关基因Bcl-2表达下调,而Bax表达则相对上调。结论 GAA能够抑制人骨肉瘤MG-63细胞的增殖,促进其凋亡,其作用机制可能是通过调节凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax实现。