胰蛋白酶限制性水解脱酚棉籽蛋白的研究

采用胰蛋白酶对脱酚棉籽蛋白进行限制性酶解,以改善棉籽蛋白在中性条件下的溶解性.以酶解棉籽蛋白水解度和溶解度为指标,对胰蛋白酶水解脱酚棉籽蛋白的条件进行了优化.结果表明,胰蛋白酶水解脱酚棉籽蛋白的优化条件为:酶底比2∶ 1(50 000 U/g),底物质量浓度100 g/L,pH 10,于20 ℃下酶解3 h.在此条件下,酶解棉籽蛋白的水解度为10.87%,溶解度为63.48%.与酶解前相比,溶解度提高了43.82%.溶解度分析结果表明,限制性酶解棉籽蛋白在pH 1～11范围内均具有较好的溶解度,仍然保持了棉籽蛋白酸溶性的特点.     

棉籽抗菌活性肽的分离纯化及鉴定

通过体外模拟消化系统对棉籽分离蛋白(cottonseed protein isolate,CPI)进行酶解,得到具有抗菌活性的酶解产物,并采用超滤(ultrafiltration,UF)、阴离子交换色谱(anion exchange chromatography,AEC)、半制备高效液相色谱(semi-preparation high performance liquid chromatography,semi-P-HPLC)分离技术对棉籽抗菌活性肽进行分离纯化,用电喷雾串联质谱(electrospray ionization-tandem mass spectrometry,ESI-MS/MS)鉴定棉籽抗菌肽的氨基酸序列。在抗菌活性肽分离纯化过程中,用UF对具有抗菌活性的CPI酶解产物进行分离,得到3个组分U-Ⅰ~U-Ⅲ。抗菌活性检测表明U-Ⅲ的抗菌能力最强;用AEC分离U-Ⅲ得到3个组分QF-Ⅰ~QF-Ⅲ,其中QF-Ⅱ抗菌能力最强;进一步采用semi-P-HPLC分离QF-Ⅱ得到4个组分PF-Ⅰ~PF-Ⅳ,其中PF-Ⅲ的抗菌能力最强,经HPLC检测为单一峰,ESI-MS/MS检测分析得到该肽的氨基酸序列为ISGLIYEETR(Ile-Ser-Gly-Leu-Ile-Tyr-Glu-Glu-Thr-Arg)。     

游离棉酚脱除菌株的分离鉴定及体内定植效果研究

该研究从藜麦茎叶和番茄杆样品中筛选分离出高效游离棉酚脱除菌株,为棉籽粕生物脱毒提供优良菌株。测定筛选菌株的游离棉酚脱除能力及产蛋白酶能力,采用人工胃液、人工肠液耐受实验,抗生素敏感实验及表面特性实验研究筛选菌株在体内定植能力,并通过形态学观察、生理生化试验及16S rDNA序列分析对筛选菌株进行鉴定。结果表明,筛选出1株高效游离棉酚脱除芽孢杆菌,编号为S-77,其游离棉酚脱除率为81.30%,产蛋白酶酶活为767.27 U/g。菌株S-77被鉴定为东洋芽孢杆菌（Bacillus toyonensis）,具有耐人工胃液、肠液效果及较好黏附于宿主肠壁细胞的能力,对抗生素敏感,可用于棉籽粕生物脱毒。     

棉籽蛋白两步法提取及其功能性质研究

采用碱酶两步法提取棉籽粕中的蛋白质。通过单因素实验及正交实验,确定碱提棉籽蛋白的最佳工艺条件为:pH10.5,温度60℃,时间90 min,料液比1∶18。再用碱性蛋白酶对残渣进一步提取,通过正交实验确定酶提棉籽蛋白的最适条件为:加酶量240 U/g,pH10.5,温度60℃,时间90 min,料液比1∶10。两步提取可使棉籽蛋白提取率达到88.77%。另外,对所提棉籽蛋白的溶解性、持水性、持油性、起泡性和乳化性等进行了研究,结果表明棉籽蛋白功能性质一般。     

碱提棉籽粕多糖工艺研究

采用五元二次旋转正交设计,研究碱浓度、温度、液料比、时间和提取次数等5个因素对碱提棉籽粕多糖提取率的影响,用SAS分析程序分析得到了5个因素的回归方程。结果表明:所得方程达显著水平,拟合情况良好。影响多糖提取率的因素依次为碱浓度、温度、液料比、提取次数和时间。通过对回归方程进行局部寻优分析,得到碱提棉籽粕多糖的最佳工艺条件为:浓度1.0mol/L,提取温度85℃,液料比24∶1,提取时间2h,提取次数1次。      

高效液相色谱法测定大豆低聚糖中的棉籽糖和水苏糖

建立了同时测定大豆低聚糖中棉籽糖和水苏糖含量的高效液相色谱分析方法(HPLC)。采用示差折光检测器(RID),色谱柱为Agilent Zorbax carbohydrate柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相为乙腈-水(75:25,V:V),流速1.0mL/min,柱温30℃。实验结果表明:棉籽糖和水苏糖分别在1~10mg/mL、1~10mg/mL范围内线性良好,相关系数分别为0.9925、0.9971;2种糖的相对标准偏差(RSD)分别为1.57%、1.81%(n=5),平均回收率分别为95.8%、96.0%。该分析方法简便,准确、可靠,适用于大豆低聚糖中棉籽糖和水苏糖含量的检测。     

一种新的棉籽脱酚生产工艺

介绍了分步提油和萃取棉酚的工业化生产工艺,解决了工业化生产过程中遇到的设备和工艺问题.采用本工艺生产的脱酚棉籽粕中游离棉酚含量小于0.045%、残油小于1.5%、蛋白含量大于50%.     

棉籽蛋白提取工艺研究

采用碱提法和盐提法从棉籽粕中提取棉籽蛋白,通过单因素实验和正交实验对提取工艺参数进行了优化,并从蛋白提取率及产品色度、主要化学成分等方面对两种提取方法进行了比较.碱法提取棉籽蛋白的最佳工艺为:pH 10,温度40℃,液料比10:1,提取时间60 min,此时蛋白提取率为75.5%;盐法提取棉籽蛋白的最佳工艺条件为:NaCI质量浓度100 g/L,温度40℃,液料比15:1,提取时间80 min,此时蛋白提取率为72.O%.两种方法的蛋白提取率接近,但盐法提取的蛋白产品纯度较高,色泽浅,且游离棉酚含量相对较低.     

紫花苜蓿或棉籽粕饲粮中添加大麦秸秆对肉牛饲粮消化率和生长性能的影响

试验旨在研究大麦秸秆饲料中分别添加紫花苜蓿青贮饲料和棉籽粕对肉牛消化率和生长性能的影响。试验选取活重284~342 kg的赫里福种肉用牛。试验中,选取12头公牛用于确定大麦秸秆消化率(BS组)、紫花苜蓿消化率(LS组)、添加紫花苜蓿消化率(L2组、L4组和L6组)和添加棉籽粕的消化率(BS+CSM组)。其中,BS+CSM组、L2组、L4组和L6组中大麦秸秆的含量分别为826、578、334、225 g·kg~(-1),BS组、BS+CSM组、L2组、L4组和L6组每kg体重的DM采食量分别为10.8、13.5、12.9、15.6、15.3和15.2 kg·d-1。每头公牛的消化率检测3次,每次饲喂时进行6次。试验组间消化率差异极显著,LS组消化率最高,BS组消化率最低,其他4组无显著差异。选取36头公牛,在饲喂的大麦秸秆中分别添加紫花苜蓿1.9(L2组)、3.9(L4组)、5.7(L6组)、0.8(CSM组)kg·d-1DM,试验期49 d。BS+CSM组、L2组、L4组和L6组的采食量分别为811、586、326和166 kg·d-1。L2组、L4组、L6组和BS+CSM组饲料中分别含有粗蛋白质97.5、144.0,、172.4和106.2 g·kg~(-1),代谢能(ME)分别为7.1、8.0、8.5和6.8 MJ·kg~(-1)DM。各组间总干物质采食量(DMI)和秸秆采食量差异极显著(P<0.001),体增重差异不显著(P=0.018)。总DMI分别为0.06、0.23、0.45和0.49 kg·d-1(l.s.d.=0.485)。秸秆采食量分别为2.73、1.89、1.15和3.47 kg·d-1(l.s.d.=0.493)。L2组、L4组、L6组和BS+CSM组肉用牛的体增重分别为0.06、0.23、0.45和0.49 kg·d-1(l.s.d.=0.248),中性洗涤纤维采食量相近。当饲料中青贮饲料含量增加时,秸秆采食量显著降低(P<0.05),但总采食量显著增加(P<0.05)。与L2组和L4组相比,BS+CSM组体增重显著增加(P<0.05),且高于预测的喂养标准。     

酸提棉籽粕多糖工艺研究

研究了棉籽粕中多糖的提取工艺。单因素试验中研究了酸浓度、提取温度、提取时间、液料比和提取次数五个因素对棉籽粕中多糖提取率的影响,并选取酸浓度、温度、时间三个因素的三个水平进行正交试验,用SAS进行方差分析并得到最优组合。结果表明,酸浓度和提取温度对多糖的提取率有显著影响,提取时间对多糖的提取率影响不显著,即酸提棉籽粕多糖的最佳工艺条件为酸浓度0.3 mol/L,提取温度80℃,提取时间60 min,液料比8∶1,提取次数2次。