重组靶向毒素hIL6(T22)-PE38在大肠杆菌中的表达及其细胞毒性

目的 在大肠杆菌中表达、纯化重组靶向毒素hIL6(T22)-PE38,并检测其细胞毒性。方法以PHis-hIL6(T22)-PE38质粒为模板,PCR扩增hIL6(T22)-PE38基因,插入表达载体pET-28a(+)的NcoⅠ和XhoⅠ多克隆位点,构建重组表达质粒,分别转化至大肠杆菌BL21(DE3)、Rosettablue(DE3)和BL21(DE3)pLysS中,IPTG诱导表达,并对表达条件进行优化。表达产物经亲和层析纯化后,检测其细胞毒性。结果重组表达质粒pET-28a-hIL6(T22)-PE38经双酶切和测序证明构建正确。表达的重组毒素相对分子质量约56 000,在大肠杆菌Rosettablue(DE3)中表达量最高。最适诱导表达条件为:1 mmol/L IPTG 28℃诱导4 h。重组毒素能选择性地杀伤人骨髓瘤细胞U266和鼠骨髓瘤细胞SP2/0,体外对U266和SP2/0细胞的IC50分别为0.5～1.0和1.0～1.5μg/ml。结论重组靶向毒素hIL6(T22)-PE38在大肠杆菌中成功获得可溶性表达,纯化的蛋白可明显选择性杀伤U266和SP2/0细胞。     

CHO细胞连续传代培养对细胞毒性试验结果的影响

研究了CHO细胞连续传代培养对细胞毒性试验结果的影响。对不同代次CHO细胞形态进行观察,并利用中性红比色法、MTT比色法检测同种受试物对不同代次CHO细胞的抑制率是否有显著差异。结果表明：随着细胞代次的升高,细胞的形态、胞浆折光性、边界、排列均发生了改变;同种受试物对CHO细胞的抑制率随细胞代次的升高呈上升趋势;中性红比色法较MTT比色法对细胞的衰老更灵敏。为了提高细胞毒性试验结果的可重复性以及可比性,细胞代次是需要控制的重要因素。     

过碳酸钠修复石油污染土壤及其环境效应

化学氧化可快速高效修复石油污染土壤,但很少关注研究其对土壤质量的影响以及残留污染物的环境风险。本文以过碳酸钠（SPC）为氧化剂,以柠檬酸（CA）/硫酸亚铁[Fe(Ⅱ)]为催化剂,分析了其对柴油污染土壤的修复效率,分析了柴油中不同组分的降解特征,通过残留初始总石油烃（TPH）有效性和浸提液生物毒性变化提示不同处理的环境风险,通过有机碳和傅里叶变换红外光谱（FTIR）分析修复前后土壤特性变化。结果表明,SPC单独处理效率较低,CA/Fe(Ⅱ)显著提高了TPH去除率。FTIR光谱表明,处理后土壤样品的Si—O—Si、C—H和—OH振动增强。气相色谱-质谱联用（GC/MS）图谱表明,残留TPH组分主要为长链烷烃（C₁₆~C₂₁）。羟丙基-β-环糊精（HPCD）浸提液发光抑制率随着浸提液pH的增加而增加,表明SPC投加量过多产生的强碱性对土壤生物毒性具有显著影响。增加CA投加量对TPH去除率的促进幅度大于SPC和FeSO₄,且有助于降低残留TPH的生物有效性和提升土壤总有机碳（TOC）含量。采用化学氧化修复有机污染土壤应进行环境风险分析并对修复条件进行优化。     

电炉镍铁渣重金属浸出研究

通过分析电炉镍铁渣的矿物成分和物相组成,考察不同粒度电炉镍铁渣的重金属含量,采用BCR(Bureau Community of Reference)连续提取方法和调节浸提剂pH值进行电炉镍铁渣的浸出测试。结果表明:粉末状电炉镍铁渣的重金属含量最高,完整电炉镍铁渣的重金属含量小于破损的重金属含量;电炉镍铁渣属于一般工业废物,不属于危险废弃物;水溶态中重金属Cd更容易浸出,重金属Cu、Ni在弱酸环境下更容易浸出,在可还原状态下重金属Cr、Pb和Mn更容易浸出,在可氧化态下Zn和Cu更容易浸出;除Cu和Pb外,pH值的降低会导致电炉镍铁渣中的重金属浸出量增大,呈L型浸出曲线,Cu在碱性环境下会加速浸出,而Pb只有在强碱环境下才会大量浸出,因此在强碱环境下要注意Pb的浸出检测。     

药用聚异戊二烯橡胶细胞毒性的研究

以两种不同催化体系合成的药用聚异戊二烯橡胶(IR0307和IR80)为研究对象,分别以质量分数为0.9%的氯化钠注射液和纯化水为浸提介质,在两种浸提条件(在高压灭菌器内于121℃下浸提60 min或在密闭容器内于37℃下浸提24 h)下进行浸提处理,然后采用显微镜观察法和四唑盐比色法测定IR0307和IR80的体外细胞毒性,分析不同浸提条件下IR0307和IR80的细胞毒性反应等级。在药用聚异戊二烯橡胶生产中,建议控制催化剂的残留量以及对杂质和金属离子的含量和种类,使用洁净的非污染型防老剂和稳定剂。     

工业化学品的环境风险评价

讨论了化学品风险评价的常用术语及基本程序,对生态毒性在评价中的地位特别予以强调,并提出了与其相关的评价程序,即理化参数分析、毒性扫描、亚急性毒性试验和慢性毒性试验或微生态系统试验,建议我国应尽快全面实施工业化学品的环境风险评价工作。     

电催化还原氧化处理甲苯硝化废水的研究

对电化学还原—氧化降解甲苯硝化废水进行了研究,考察了不同电流密度和反应时间对降解效果的影响,并且考察了出水的可生化性以及生物毒性的变化。结果表明:在最佳电流密度20 mA/cm2,最佳处理时间4 h下,硝化废水的SUVA(废水芳香性指标)去除率可以达到56.4%,COD去除率为26.6%,B/C由原水的0.115提高到0.435,急性生物毒性也有明显降低,TU值由原先的285.7降低为41.7。说明电化学还原—氧化法对硝化废水可生化性的提高,毒性的降低是有显著作用的。     

盐度入侵城市污水处理厂对淡水活性污泥的毒性抑制

盐度入侵城市污水处理厂改变了活性污泥的胞外渗透压环境,影响生物系统的生物活性和污染物降解能力。采用MUCT工艺处理真实生活污水,模拟了盐度入侵对系统处理效率的影响。并结合污染降解动力学和抑制动力学建立了盐度抑制模型,系统地评测了盐度对活性污泥功能性微生物的毒性抑制。结果表明,盐度入侵造成了功能性微生物的活性损失,干扰了正常的污水处理能力。毒性抑制显著地降低了好氧微生物的呼吸作用,以此作为毒性评估的依据会造成对抑制作用的高估。而以底物降解速率评估盐度毒性抑制可以很好地指示污水处理效率。盐度对有机物降解异养菌、硝化菌和反硝化菌抑制的IC₅₀值分别是20.64 g·L^-1、11.61 g·L^-1、10.88 g·L^-1。     

Cu^2＋、Cd^2＋和Cr^6＋对孔雀鱼的单一与联合毒性效应

采用静水生物测试法研究了Cu、Cd和Cr等重金属对孔雀鱼的单一与联合毒性效应。单一毒性试验结果表明：暴露时间为24,48,72和96h时,Cu^2＋对孔雀鱼的LC50分别为5．70,4．02,2．95和2．36mg／L,Cd^2＋对孔雀鱼的LC50分别为23．24,20．15,18．07和17．71mg／L,Cr^6＋对孔雀鱼的LC50分别为88．56,65．21,47．81和43．40mg／L。3种重金属离子对孔雀鱼均为高毒性,毒性大小为Cu^2＋〉Cdh〉Cr^6＋。联合毒性试验表明：当浓度比为1：1或1：1：1,Cu^2＋与Cd^2＋、Cu^2＋与Cr6＋、Cd^2＋与Cr^6＋以及Cu^2＋、Cd^2＋与Cr^6＋共存时的联合毒性均为毒性增强的协同作用．     

废(污)水的理化指标及其对发光细菌的毒性分析

通过测定不同废（污）水的SS、pH值、电导率和COD等主要理化指标,对其特性进行了表征,同时应用发光细菌法测定了其生物毒性,并根据水质毒性分级标准对水样毒性进行了评价。结果表明,废（污）水的EC50值与COD和电导率不存在相关性;虽然部分废（污）水排放时COD达到了《污水综合排放标准》（GB8978--1996）的一级或二级标准,但对发光细菌仍具有不同程度的毒性效应。因此,只有将废（污）水理化指标与生物分析方法相结合,才能准确评价废（污）水对环境的影响,进而制定出可靠的废（污）水排放标准。