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101.
白细胞介素-10基因多拷贝表达盒的构建及在毕赤酵母中的表达 总被引:1,自引:1,他引:1
目的构建白细胞介素-10(IL-10)基因多拷贝表达盒,提高IL-10在毕赤酵母中的表达水平。方法体外构建重组表达载体αIL-10/pAO815,BamHⅠ和BglⅡ双酶切获得目的基因表达盒(AOX-αIL-10),再连接到BglⅡ酶切位点处,依次构建多拷贝重组载体n(AOX-αIL-10)/pAO815。从质粒pPIC9K上用NdeⅠ和SalⅠ双酶切获得Kan抗性基因,重组到多拷贝表达载体n(AOX-αIL-10)/pAO815上。重组载体n(AOX-αIL-10)/pAO815电转化毕赤酵母,PCR筛选含有IL-10基因的酵母转化子,甲醇诱导表达,对表达量高的转化子再次经重组载体n(AOX-αIL-10)/pAO815-Kan电转化,高浓度G418抗性筛选二次酵母转化子,使用甲醇诱导表达。ELISA测定IL-10含量,MC/9细胞测定IL-10活性。结果所构建的8拷贝表达盒的重组载体8(AOX-αIL-10)/pAO815和4拷贝表达盒4(AOX-αIL-10)/pAO815-Kan,转化子分泌表达IL-10水平最高,为(8.25±1.65)mg/L,比活性为1.465×105U/mg。结论已成功构建了高拷贝表达盒,并提高了IL-10在毕赤酵母中的表达水平。 相似文献
102.
103.
本文主要介绍了常用的方盒形件拉深深度的计算,按照传统的计算方法,会存在很大的误差,采用CAE进行模具设计,并在采用CAD软件建立力学模型,使得设计计算变得简单可靠。对不合适的部位及时进行调整,确定合理拉深深度,避免在模具制造好后造成大量的修模。 相似文献
104.
CO2/酚基树脂的合成实践 总被引:8,自引:0,他引:8
本文对CO2/酚基树脂──冷芯盒工艺用树脂的合成工艺进行了一定程度的实验研究,提出了可行的几种有机合成方法,并从理论分析入手,对该类树脂的分子结构类型进行了设计和预测。 相似文献
105.
针对道路监控视频中特定车辆图像序列的关键帧提取问题,在运动对象检测的基础上,提出一种关键帧提取方法。将积分通道特征和面积特征作为图像特征描述子,结合Ada Boost训练分类器,实现道路监控视频车辆序列图像中关键帧的提取。通过运动对象前景检测技术获得出现在监控区域的运动车辆最小外接矩形图像序列,选择满足监控分析需求(车牌清晰度高,能判断车型)的若干帧作为正样本,其他不满足监控分析需求的作为负样本,提取样本图像的面积特征和积分通道特征,利用Ada Boost方法训练得到一个分类器,使用Ada Boost分类器对测试样本进行分类,根据打分规则提取关键帧。实验结果表明,该方法能提取运动车辆从进入到离开监控区域的序列图像帧中最清晰的图像,实现道路车辆监控视频分析数据的有效压缩。 相似文献
106.
107.
108.
目前,矢量化技术在日常工作和生活中占据了越来越重要的地位,能否精确地提取出图像的轮廓直接影响到矢量化效果。该文在深入研究位图矢量化算法的基础上,提出了一种基于矩形的位图矢量化方法,之前已有的研究很少涉及到。最后通过编程实现了该算法,并将该算法应用到了实际的目标图像中,通过实验验证,效果比较理想。 相似文献
109.
110.
高桥地区靖边气田石盒子组盒8段砂岩储层井径扩大严重,引起测井信息失真、地质储量评价不准确等一系列问题.通过优化CaCO3酸溶性封堵剂的复配比例和添加成膜剂及润湿反转剂降低砂岩自吸两种途径提高钻井液的封堵性能,从而实现井壁稳定.改进后钻井液对盒8段的封堵率提高至95.6%,砂岩自吸量降低85%. 相似文献