四硝酸甘露醇酯类化合物的合成和抑菌活性

以海藻中提取的海洋活性物质D-甘露醇为原料,先与丙酮发生缩合反应,将1,2,5,6位的羟基保护起来,再对3,4位的羟基分别甲醚化、甲基磺酸和对甲苯磺酸酯化后,脱去异亚丙基保护基团,还原1,2,5,6位的羟基,并对其进行硝酸酯化,合成了3个标题化合物,产率在77%以上。合成的部分中间体和目标产物的结构,经红外光谱(IR)、核磁共振氢谱(1HNMR)、碳谱(13CNMR)、质谱(MS)和元素分析进行了确证。抑菌实验表明,这3个1,2,5,6-四-O-硝酸甘露醇酯类化合物具有一定的选择性,仅对金黄色葡萄球菌(G Staphylococcus aureus)有抑制作用,最小抑制浓度为50μg/mL,抑制作用没有太大的差别。     

聚(D,L-乳酸)基仿生聚合物材料的合成与表征

探索一种新型聚乳酸基仿生聚合物材料的制备新方法.具体实验步骤是:利用聚乳酸上叔碳原子的自由基反应活性,在过氧化二苯甲酰的催化作用下,将马来酸酐引入聚乳酸侧链上,以此提供高反应活性的酸酐键;然后利用酸酐基团与-NH2发生N-酰化反应这一特点,将脂肪族二胺引入聚乳酸侧链上,从而克服聚乳酸降解产物的体液环境呈酸性的缺陷;再用碳二亚胺作缩合剂,在二胺改性聚乳酸材料中共价引入一种细胞粘附肽段Arg-Gly-Asp-Ser(RGDS),赋予材料生物活性和生物特异性,这样就制备了一种新型聚乳酸基仿生材料.采用MALLS、FTIR和XPS对仿生材料进行结构表征;采用罗丹明比色法、茚三酮显色法和氨基酸分析仪检测法对仿生材料中的马来酸酐、二胺和粘附肽RGDS进行定量测定.结果表明,按文中所述之制备技术,在不改变聚乳酸材料主链结构的前提下,该仿生材料中粘附肽RGDS的含量是5.12μmol/g.这就形成了一种具有类似细胞外基质的新型仿生材料.     

紫外可见分光光度法测定胶囊剂中D-氨基葡萄糖盐酸盐的含量

建立Elson-Morgan法测定胶囊剂中D-氨基葡萄糖盐酸盐的含量。方法 样品中D-氨基葡萄糖盐酸盐用水溶解,与乙酰丙酮、对二甲氨基苯甲醛试液显色之后,以试剂空白溶液为参比,以D-盐酸氨基葡萄糖为对照品,在525 nm波长处比色测定。D-氨基葡萄糖盐酸盐含量在20. 26～121. 56μg范围内,线性关系良好。加标回收率为101. 8%～103. 4%,精密度RSD为0. 10%,重复性RSD为0. 90%。本方法简便准确可靠,可用于胶囊剂中D-氨基葡萄糖盐酸盐含量的测定。     

基于颗粒最紧密堆积理论的超高性能混凝土配合比设计EI北大核心CSCD

针对修正的Andreasen-Andersen(MAA)颗粒堆积模型设计超高性能混凝土(UHPC)时会存在两个弊端,(即未验证湿堆积状况下的可靠性、未考虑钢纤维掺入对颗粒堆积体系的扰乱),采用二次饱和D-最优化模型和钢纤维等效颗粒直径模型对其进行优化与完善,并利用UHPC材料性能对提出的新思路进行反向验证。结果表明:基于建立的湿堆积密实度二次饱和D-优化设计模型有效验证了MAA模型在湿堆积状态下的适用性和可靠性;同时,通过评价钢纤维和等效替代颗粒对湿堆积密实度的影响,确定了长13 mm、直径0.2 mm的钢纤维的等效颗粒直径为5.65 mm;将钢纤维以球形颗粒的形式纳入MAA模型中,可以制备出基体密实、抗压强度较高的UHPC材料。     

阿尔泰金莲花提取物抑制变异链球菌乳酸脱氢酶活性及抗氧化活性研究

采用微量稀释法测定了阿尔泰金莲花提取物对变异链球菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),研究了阿尔泰金莲花提取物对变异链球菌的抑制作用,考察了阿尔泰金莲花提取物对变异链球菌产酸及乳酸脱氢酶(LDH)活性的影响,并通过测定阿尔泰金莲花提取物、牡荆素、荭草苷、抗坏血酸(VC)对DPPH自由基、ABTS自由基和·O~-_2的清除率来评价阿尔泰金莲花提取物的抗氧化活性。结果表明,阿尔泰金莲花提取物的MIC为12.5 mg·mL~(-1),MBC为25 mg·mL~(-1);阿尔泰金莲花提取物浓度越大,对变异链球菌的抑制作用就越强;当阿尔泰金莲花提取物浓度在1/8MIC～MIC范围内时,随着阿尔泰金莲花提取物浓度的增大,培养18 h后菌悬液的ΔpH值越小,LDH活性也越低,与空白对照组相比有显著性差异(P0.05);阿尔泰金莲花提取物对DPPH自由基、ABTS自由基和·O~-_2均具有一定的清除作用,且在一定浓度范围内存在量效关系。初步探讨其抑菌作用机制可能是,通过抑制LDH活性从而抑制变异链球菌产酸,影响其代谢及生长。     

重组大肠杆菌共表达D-海因酶和N-氨甲酰基-D-氨基酸酰胺水解酶

通过PCR分别扩增得到N-carbamoylase基因和上游带有RBS区的D-hydantoinase基因,并将其依次克隆入pBAD/His A质粒中,得到呈多顺反子结构的双酶表达质粒pBAD-CRH,转化E. coli Top10F￠得到重组菌TaraCRH. 实验证明,E. coli TaraCRH对外源蛋白的表达控制严紧,而加入阿拉伯糖诱导后可以成功表达两酶基因. 诱导条件优化结果表明,诱导温度采用29℃,培养基中阿拉伯糖浓度0.05 g/L可达到最高酶活. 进一步尝试采用玉米浆培养基代替LB培养基,在经过优化的玉米浆培养基中培养TaraCRH菌株,经阿拉伯糖诱导,海因酶和水解酶酶活分别达到3.52和4.21 U/mL.     

苯丙氨酸及苯丙酮酸对Lactobacillus sp. SK007合成苯乳酸的影响

从自然发酵泡菜中分离筛选到一株乳杆菌(Lactobacillus sp.)SK007,研究了Lactobacillus sp. SK007利用苯丙氨酸合成苯乳酸的过程,结果发现,在MRS培养基中最高可产生0.55 mmol/L苯乳酸,苯丙氨酸剩余94%,但检测不到中间产物苯丙酮酸,这表明苯丙氨酸的转氨反应是苯乳酸合成的限速步骤. 用苯丙酮酸代替苯丙氨酸作为底物可有效突破这一瓶颈,进一步优化了Lactobacillus sp. SK007利用苯丙酮酸合成苯乳酸的发酵条件. 当苯丙酮酸为18.3 mmol/L, 30℃静置培养24 h,苯乳酸产量可达10.25 mmol/L.     

海藻酸钠固定细胞产D-阿洛酮糖的研究

D-阿洛酮糖3-差向异构酶(DPEase)是一种能催化D-果糖转化为D-阿洛酮糖的异构酶。本实验采用海藻酸钠作为载体,包埋重组大肠杆菌催化D-果糖生成D-阿洛酮糖。以固定化细胞的酶活活力回收率为指标,优化出最佳固定化条件为:海藻酸钠浓度3%,细胞包埋量60g/L,Ca Cl2浓度2%,固定化时间4h,0.01%浓度戊二醛溶液中交联4h。该条件下所得固定化细胞的酶活回收率高达76%,且具有较好的操作稳定性,重复操作8次后酶活回收率仍然保持61%。固定化后DPE细胞的最适酶反应温度提高了5℃、最适pH与游离细胞基本一致,耐热性明显提高,p H稳定性与游离细胞一致。     

泡菜与乳酸菌

文中论述了国内外泡菜生产发展概况,乳酸菌在泡菜生产中作用机理及其影响因素,泡菜乳酸菌的纯种分离及应用效果,以及泡菜生产的发展前景。     

乳酸发酵番茄汁中间生产试验

将筛选出的保加利亚乳杆菌(L. bulgaricus)和嗜热链球菌(Str. thermophilus)应用于乳酸发酵番茄汁的中试生产中。先在20升发酵罐内进行了两批试验,确立了初步的生产工艺流程,然后在500升发酵罐进行了进一步试验,获得了成功,生产出的乳酸发酵番茄汁pH为4.0～4.3,乳酸含量0.7％左右,加蔗糖3％,不添加防腐剂、香精、色素等化学物质。保存半年后经检测,其理化及微生物学指标均符合国家规定标准。申试结果为工业规模生产奠定了基础。