免疫亲和柱净化-大体积流通池高效液相色谱法同时检测食品中6种黄曲霉毒素

建立了免疫亲和柱净化-大体积流通池无需衍生同时测定食品中6种黄曲霉毒素(Aflatoxins)的检测方法。样品采用乙腈-水(84:16,V/V)超声辅助提取,用免疫亲和柱净化,经过XBridge TM C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm)分离。采用乙腈-甲醇-水(15:25:60,V/V)为流动相,大体积流通池荧光检测器检测,无需衍生,外标法定量。6种黄曲霉毒素在9.5 min内有效分离,从样品前处理到结果分析整个过程小于50 min。黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1、M2的检出限(LOD,S/N=3)分别为0.05μg/kg、0.02μg/kg、0.05μg/kg、0.02μg/kg、0.04μg/kg、0.03μg/kg,能够满足我国对食品中黄曲霉毒素限量的要求。6种黄曲霉毒素标准曲线线性良好,线性相关系数r2大于0.999;样品加标回收率为77.6%~90.5%,精密度RSD为2.42%~6.08%。本方法简便、准确、灵敏度高,无需衍生即可同时检测食品中6种黄曲霉毒素,适用于食品中6种黄曲霉毒素的快速定量测定。     

普洱熟茶中黄酮醇类物质杨梅素、槲皮素和山奈酚的分离纯化

本文以云南普洱熟茶为实验材料,以不同浓度乙醇水溶液为洗脱液,利用MCI GEL CHP 20P（75¹50μm）树脂色谱柱和SephadexTMLH-20葡聚糖凝胶色谱柱,并结合高效液相色谱（HPLC）法,对普洱熟茶中主要黄酮醇类物质进行了分离和定性。结果表明:普洱熟茶提取液浓缩后过MCI GEL CHP 20P（75¹50μm）树脂色谱柱,经不同浓度（10%,30%,50%,70%,90%）乙醇溶液洗脱分离后,将获得的70%和90%的洗脱液过SephadexTMLH-20葡聚糖凝胶色谱柱,70%的洗脱液经90%乙醇溶液洗脱分别获得了HPLC纯度为96.0%的杨梅素和HPLC纯度为98.5%的槲皮素;90%的洗脱液经70%的乙醇溶液洗脱获得了HPLC纯度为95.6%的山奈酚。      

小麦醇溶蛋白沸石分离工艺优化及其组分分析

目的：探究谷朊粉中醇溶蛋白的提取分离方法。方法：以醇溶蛋白凝沉率为评价指标,优化谷朊粉醇溶蛋白的静置凝沉工艺。进一步以优化后的静置凝沉工艺制备的醇溶蛋白为原料,研究碱液处理沸石分离醇溶蛋白组分工艺,重点考察碱液质量分数（20%,50%,80%）、加热时间（30,60,120 min）以及加热温度（30,50,70,90 ℃）对沸石分离醇溶蛋白组分的影响。结果：谷朊粉中醇溶蛋白提取率为24%,4,10,20,30 ℃下静置凝沉40 h后,醇溶蛋白凝沉率分别为16.6%,20.6%,24.0%,18.9%。显微图像表明,开始凝沉时醇溶蛋白中大小球状蛋白均出现（α-、β-、γ-醇溶蛋白）,凝沉10 h后,在4,10 ℃下出现虫状醇溶蛋白（ω-醇溶蛋白）,凝沉20 h后,虫状醇溶蛋白聚集体大量出现。沸石处理温度为50 ℃、KOH质量分数为20%、处理时间为120 min时醇溶蛋白分离量最大,分离量为10.336 g/kg沸石。同组空白试验所分离出的醇溶蛋白为4.730 g/kg沸石,分离最大量相较于空白试验分离量多出5.606 g/kg沸石。根据紫外最大波长分析,醇溶蛋白及其组分的最大紫外吸收波长均在288.4 nm附近。柱层析第1组分主要成分是低分子量醇溶谷蛋白,第2组分主要成分是高低分子醇溶谷蛋白和α-、β-、γ-、ω-醇溶蛋白,第3组分主要成分为低分子量醇溶谷蛋白。结论：温度对醇溶蛋白凝沉速率影响很大,沸石改性可提高所分离醇溶蛋白量,且分离量与KOH溶液质量分数及改性时间密切相关。     

液相色谱双柱法和高效离子交换色谱法测定低聚半乳糖含量比较

目的:优化对比液相色谱双柱法和高效离子交换色谱法两种测定低聚半乳糖含量的方法,同时建立一种新的低聚半乳糖换算系数(K值)计算方法;方法:对现有上述两种测定低聚半乳糖含量的检测方法进行对比分析,筛选出分离效果更好的糖柱,并进一步优化色谱条件。结果:优化后的液相色谱双柱法对低聚半乳五糖到低聚半乳八糖的分离效果明显提升,提高了测定准确度,而高效离子交换色谱法操作更加简便;根据不同样品选用不同K值来计算低聚半乳糖含量的方式可进一步提升结果的精确性。结论:两种方法均可有效对低聚半乳糖含量进行检验分析,高效离子交换色谱法检测灵敏度较高,且已被AOAC等国际权威机构纳入标准检测方法,可作为低聚半乳糖含量测定的标准仲裁法;液相色谱双柱法测定低聚半乳糖更为简便快捷,经济适用,可用于生产企业日常产品检测。     

液相色谱双柱法和高效离子交换色谱法测定低聚半乳糖含量比较

目的:优化对比液相色谱双柱法和高效离子交换色谱法两种测定低聚半乳糖含量的方法,同时建立一种新的低聚半乳糖换算系数(K值)计算方法;方法:对现有上述两种测定低聚半乳糖含量的检测方法进行对比分析,筛选出分离效果更好的糖柱,并进一步优化色谱条件。结果:优化后的液相色谱双柱法对低聚半乳五糖到低聚半乳八糖的分离效果明显提升,提高了测定准确度,而高效离子交换色谱法操作更加简便;根据不同样品选用不同K值来计算低聚半乳糖含量的方式可进一步提升结果的精确性。结论:两种方法均可有效对低聚半乳糖含量进行检验分析,高效离子交换色谱法检测灵敏度较高,且已被AOAC等国际权威机构纳入标准检测方法,可作为低聚半乳糖含量测定的标准仲裁法;液相色谱双柱法测定低聚半乳糖更为简便快捷,经济适用,可用于生产企业日常产品检测。     

QuEChERS结合GC-MS/MS法测定果蔬汁中21种农药残留

建立一种采用QuEChERS前处理结合Quick Pro净化柱-气相色谱串联质谱（GC-MS/MS）法测定果蔬汁中的21种农药残留量的方法。样品采用乙腈提取,EN方法盐包盐析,经Quick Pro净化柱净化,DB-35MS UI色谱柱分离,采用选择离子监测（SIM）模式扫描,外标法定量。在质量浓度0.01～0.50 μg/mL范围内相关系数（R）均＞0.995,样品在0.01 mg/kg、0.02 mg/kg、0.10 mg/kg的添加水平下,21种农药的回收率在75.2%～117.8%之间,回收率实验结果相对标准偏差（RSD）在1.9%～11.5%之间。该方法操作简便,分析时间短,精密度好,适用于果蔬汁中多种农药残留的检测。     

可视化普鲁士蓝纳米酶免疫亲和柱快速检测植物源性食品中氯吡脲

目的 建立快速检测植物源性食品中氯吡脲的可视化普鲁士蓝纳米酶免疫亲和凝胶柱的检测方法。方法 首先通过水热法制备了类过氧化氢酶性质的普鲁士蓝纳米粒子。其次,通过3-巯基丙酸衍生反应合成了氯吡脲半抗原,通过活泼酯法原理偶联合成氯吡脲完全抗原,通过免疫小鼠成功制备了氯吡脲多克隆抗体。最后,制备了普鲁士蓝纳米酶标记抗原、琼脂凝胶闭合胶体、抗体胶,组装了普鲁士蓝纳米酶可视化免疫亲和凝胶检测柱,建立了检测方法,测试了凝胶检测柱的特异性,检测了4种实际样品,得到方法检出限。结果 合成的普鲁士蓝纳米粒子呈立方体形状,分布均匀集中,粒径约为145.68 nm±12.00 nm,能够催化3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(3,3’,5,5’-tetramethylbenzidine,TMB)和过氧化氢(hydrogen peroxide,H₂O₂)混合溶液显蓝色,具有类过氧化氢酶性质。制备的氯吡脲多克隆抗体半数抑制率(50%inhibiting concentration,IC50)为2.35 ng/mL,抗血清效价最高为1:72000倍。凝胶检测柱的最佳组装条件...     

柱前衍生高效液相色谱法测定面制品中溴酸盐的含量

针对目前离子色谱电导法检测面制品中溴酸盐的假阳性问题,建立柱前衍生高效液相色谱测定面制品中的溴酸盐的方法。面制品经超纯水提取、过滤、衍生,采用C18色谱柱,紫外检测器检测。结果表明,采用亚铁氰化钾-乙酸锌作为沉淀剂,待测液在45℃时衍生60 min,溴酸盐浓度在0.025¹ mg/L范围内与峰面积呈现良好线性关系,方法的加标回收率为87.90%⁹4.80%,检出限为0.3 mg/kg,定量限为1 mg/kg。与离子色谱法相比,该方法具有干扰少,灵敏度高,成本低等优点,可很好地满足面制品中溴酸盐的检测和质控要求。      

盐生杜氏藻软胶囊中β,β-胡萝卜素几何异构体组成的测定

采用C30-HPLC-PDA-ELSD系统,参照已公布的全反式异构体的吸光系数(Al1%cm=2500),根据β,β-胡萝卜素顺式异相体电子吸收光谱峰面积与ELSD质量峰面积之比,估算出9-和13-顺式异构体的吸光系数分别为2018和1990.根据其色谱峰面积,可以准确测量出盐生杜氏藻软胶囊中β,β-胡萝卜素几何异构体的组成.     

GC-MS法测定食用油中邻苯二甲酸酯类物质的含量

监测日常桶装食用油中邻苯二甲酸酯类化合物的污染状况。样品经乙腈—正己烷溶解,SILICA/PSA玻璃混合型固相萃取柱净化,氮气吹干,正己烷定容,气相色谱—质谱(GC—MS)联用分析技术测定,外标法定量。方法检测的最低浓度为0.01 ng/g～0.1 ng/g之间,加标回收率为85.59%～112.98%之间,相对标准偏差在2.48%～12.07%之间。方法适用于食用油中邻苯二甲酸酯定性和定量测定。