CHO细胞连续传代培养对细胞毒性试验结果的影响

研究了CHO细胞连续传代培养对细胞毒性试验结果的影响。对不同代次CHO细胞形态进行观察,并利用中性红比色法、MTT比色法检测同种受试物对不同代次CHO细胞的抑制率是否有显著差异。结果表明：随着细胞代次的升高,细胞的形态、胞浆折光性、边界、排列均发生了改变;同种受试物对CHO细胞的抑制率随细胞代次的升高呈上升趋势;中性红比色法较MTT比色法对细胞的衰老更灵敏。为了提高细胞毒性试验结果的可重复性以及可比性,细胞代次是需要控制的重要因素。     

HPLC测定海马中核苷和核苷酸的含量

为建立一种同时测定海马中5种核苷(胞苷、尿苷、肌苷、鸟苷和腺苷)和5种核苷酸(CMP、UMP、IMP、GMP和AMP)含量的方法,本研究采用HPLC,以Accalaim C30(2.1 mm×150 mm,3μm)为分析柱,以水(A)-100 mmol/L NH4OAC溶液(p H=5.0)(B)-乙腈(C)为流动相,梯度洗脱,流速0.4 m L/min,检测波长254 nm,柱温25℃。结果显示,5种核苷和5种核苷酸的浓度均在0.02~10 mg/L范围内线性关系良好。平均加样回收率在88.38%~96.30%(n=3)之间。本法能够快速、简便地测定海马中主要核苷和核苷酸的含量,为其质量控制提供保证。     

锍锑试金-电感耦合等离子体质谱法测定矿石中铂族元素

在锍试金配料中加入0.2 g锑粉进行熔炼,由于锑的保护作用,试金扣经水浸泡粉化后用(1+1)盐酸分解时锇不损失。铂族硫化物滤渣加10 mg锑粉保护,用2 mL王水在240℃下密闭消解1.5 h可完全溶解,试液采用ICP-MS测定。方法对铂族元素(钌、铑、钯、锇、铱和铂)检出限在0.03~0.16 ng/g之间,相对标准偏差(RSD,n=6)为3.9%~8.9%,国家标准物质测定值和认定值基本吻合,方法还可实现氧化镍源的提纯和循环使用。     

ICP-AES测定酵母中有害重金属方法的研究

本文建立了高压罐消化-ICP-AES测定酵母中As、Cd、Pb、Cu、Hg的分析方法。As、Cd、Pb、Cu和Hg五种元素方法的相对标准偏差RSD分别为:5.55％、3.83％、4.04％、2.0％和 6.25％,回收率在 95～105％之间,检出限分别为:0.227μg As/g;0.0174μg Cd/g;0.103μg Pb/g;0.098μg Cu/g;0.015μg Hg/g。     

HPLC测定山葛降脂滴丸中葛根素的含量

目的采用高效液相色谱法(HPLC)对山葛降脂滴丸中葛根素含量进行测定。方法色谱柱为Diaomonsil C18色谱柱(250×4.6 mm,5μm)、ODS预柱,以甲醇-0.2%磷酸溶液(28∶72),检测波长为250 nm。结果葛根素在11.75~188.0μg/mL内,浓度与相应峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为99.50%,RSD为1.44%。结论该方法对山葛降脂滴丸中葛根素含量的测定简便易行,结果准确可靠,适用于对山葛降脂滴丸进行质量控制。     

氢供体组与辣根过氧化酶活性光谱研究

对邻苯二酚-苯胺和苯酚-氨基安替吡啉构成的两组测定HRP酶活性的体系进行了研究和比较。紫外可见光光谱和高效液相色谱分析表明,在HRP催化过程中,邻苯二酚-苯胺氢供体对会生成为一种粉红色产物,该产物最大吸收波长在510咖,可用于HRP的活性测量。且与常规使用的苯酚-氨基安替吡啉氢供体对的情况相比,具有更高的灵敏度、更低的检测限值和很好的重复性,在对HRP分别进行20次酶活测量,所得相对标准偏差仅为2．9％。使用邻苯二酚-苯胺氢供体对的方法可计算得到酶动力学参数Km（12．5mM）和Vmax（12．2mMmin^-1mg^-1）。     

Removal of estrogenicity in Swedish municipal sewage treatment plants

The human estrogen receptor alpha-test, hosted in a yeast strain, was used to quantify estrogenicity in three-week composite samples of untreated and treated effluents from 20 Swedish municipal sewage treatment plants. The treatment plants were selected to represent different treatment processes regarding chemical precipitation and microbial procedures. The discharge from Swedish domestic sewage treatment plants contained estrogenic compounds corresponding to <0.1-15 ng estradiol equivalents/L. Low levels of estrogenic activity were also found in a river receiving municipal effluents, 3.5-35 km downstream the outlet from a sewage treatment works. The range of estrogenicity in untreated, raw sewage effluents was found to be 1-30 ng estradiol equivalents/L. Generally, wastewater treatment reduced the estrogenicity and extended biological treatment was most effective in its removal. Activated sludge treatment tended to be more effective than trickling filters, whereas chemical precipitation using iron or aluminium salts without biological treatment showed little effectivity. The study showed that treatment methods in current use are able to eliminate or largely reduce estrogenicity in domestic wastewater.     

游离前列腺特异抗原免疫放射分析方法的建立

采用双抗体夹心法,利用两株前列腺特异抗原（Prostate Specific Antigen,PSA）的单克隆抗体（抗游离前列腺特异抗原F-PSA和抗血清中总前列腺特异抗原T—PSA）,建立了定量测定血清中F-PSA含量的免疫放射分析方法。该方法的最小检测限为0．04μg／L,批内变异系数≤4．0％,批间变异系数≤10．5％,平均回收率为102．7％。该法与CIS公司生产的放免试剂盒比对的相关方程为y=0．9651x-0．0011,相关系数r=0．9964。本研究建立的F-PSA免疫放射分析方法灵敏度高,定量分析效果较好,适用于临床诊断。     

表面等离子共振技术快速检测食品中的 玉米赤霉烯酮毒素

目的建立基于表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)技术快速检测食品中玉米赤霉烯酮毒素(zearalenone,ZEN)的方法。方法采用表面自组装技术(self-assembled monolayer,SAM)在金膜的表面修饰羧基基团,将ZEN抗原与牛血清白蛋白(albumin from bovine serum,BSA)偶联物(ZEN-BSA)通过共价键固定在芯片的表面,采用竞争法检测样品中的玉米赤霉烯酮毒素。结果该方法的检测限为8.2 ng/m L,ZEN单克隆抗体与呕吐毒素、黄曲霉毒素B_1、赭曲霉毒素、伏马毒素等没有交叉反应,与α-玉米赤霉烯醇和β-玉米赤霉烯醇交叉反应率分别为15.3%和11.5%。结论本方法具有简便、快速和高灵敏度等优势,在食品中真菌毒素的快速检测方面具有潜在的应用价值。     

扁桃仁蛋白饮料中扁桃仁蛋白高特异性的定量方法

建立基于竞争酶联免疫分析(ELISA)的扁桃仁蛋白饮料中扁桃仁蛋白定量方法。使用双向电泳比较了扁桃仁和杏仁的蛋白质组上的差异,并且测序了杏仁prunin蛋白的氨基酸序列。鉴定,提取,纯化了扁桃仁分子量27 ku且p I 5.5~8.0的prunin蛋白亚基片段并且将其作为抗原制备特异性抗扁桃仁prunin蛋白单克隆抗体。使用单克隆抗体建立了检测扁桃仁蛋白的竞争酶联免疫分析方法。基于扁桃仁可溶全蛋白作为标准品,该方法的IC50为10.3μg/m L,线性范围为2.0~100μg/m L(R2=0.991)。该方法特异性良好,与杏仁和其他可食种子蛋白无交叉反应。样品前处理使用含有0.1%二硫苏糖醇(DTT)的7M尿素作为提取液。检测植物蛋白饮料样品的检出限为300μg/m L,相对标准偏差10%。使用巴氏杀菌,超高温瞬时灭菌和高压灭菌的蛋白平均回收率分别为97%,93%和84%。