EV71抗原BA-ELISA检测方法的建立及应用

目的建立EV71抗原生物素-亲和素酶联免疫(BA-ELISA)检测方法,并进行验证及初步应用。方法以抗EV71抗体为包被抗体,利用生物素-亲和素系统建立双抗体夹心ELISA法,并对其灵敏度、特异性、准确性及精密性进行验证。采用该方法检测组织培养及临床样品中EV71抗原的含量。结果所建立的BA-ELISA法在EV71蛋白含量625～156.25ng/ml之间线性关系最佳,R2达0.9976,灵敏度为78.125～156.25ng;与包括CoxA16在内的42种肠道病毒及相关病毒均无交叉反应;检测10份EV71阳性样品和10份阴性样品,结果符合率均为100%;检测EV71原液和高、中浓度样品的变异系数分别为3.09%、6.69%和6.43%;可检出约103～104CCID50的活病毒及手足口病患者的大便悬液和部分咽拭子悬液中的病毒。结论用生物素标记EV71抗体与亲和素系统建立的双抗体夹心ELISA法具有较高的特异性、灵敏度、准确性和精密性,为临床检验及抗原分析提供了参考。     

金属纳米颗粒在表面等离激元共振生物传感器上的应用

文章研究不同形状和长径比的金属纳米颗粒应用在表面等离激元共振（SPR）生物传感器中对传感信号的影响,自制金属纳米颗粒并进行物理表征,以金纳米颗粒与抗兔IgG进行生物偶联,利用自制角度检测型SPR生物传感器对兔IgG抗体进行检测,结果表明,金属颗粒的形状和长径比对SPR传感器的共振角都有影响,金纳米棒能够明显提高SPR生物传感器的检测灵敏度。     

有机磷农药的免疫检测研究进展

有机磷农药作为一类广泛使用的杀虫剂,在食品中有不同程度的残留,严重威胁人类健康。文中阐述了有机磷农药半抗原的结构与性质、特异性抗体的制备,介绍了检测单一成分或检测多残留成分的酶联免疫吸附检测、荧光偏振免疫检测与试纸条免疫检测等技术,对其在有机磷农药残留检测中的应用情况作一综述,并展望了发展前景和研究方向。     

免疫检测用纳米胶体金的制备及粒径控制

利用柠檬酸钠作为还原剂,采用液相还原法制备了适用于免疫检测的胶体金纳米颗粒。用透射电子显微镜和紫外/可见光分光光度计分别对胶体金颗粒的形貌和光学吸收特性进行了检测。结果表明,柠檬酸钠的加入量是影响胶体金颗粒粒径和形貌的主要因素,制备100ml0.01%胶体金溶液,1%柠檬酸钠溶液加入量小于5ml时,胶体金颗粒的平均直径随柠檬酸钠加入量的增加而减小,当大于5ml时,胶体金颗粒的平均直径随柠檬酸钠量的增加而增大。在研究范围内,胶体金颗粒的平均粒径与最大吸收峰波长之间存在直线回归关系。制备的胶体金呈单分散的球形分布,具有较高的生物学活性,适用于胶体金免疫检测。     

化学发光免疫检测在生化检验中的应用

化学发光免疫检测技术以放射免疫分析为基本原理,属于一种应用便捷并且灵敏度较高的测定方法,并且重复性良好,不产生放射性污染,具有较高的应用和推广价值。为了提升化学发光免疫检测在生化检验中的应用效果,需要针对化学发光免疫技术进行更加深入的研究,例如：快速化学发光免疫分析方法可以提升生化检验的效率、电化学发光免疫分析方法稳定性良好、多组分化学发光免疫分析方法使用成本较低等,同时各检测方法的准确性均能得到保障,由此,明确其基本情况和使用价值,再探讨其使用方法,以供参考。     

水产品中恩诺沙星残留的一步法酶联免疫检测研究

采用过碘酸钠氧化法合成了辣根过氧化物酶(HRP)标记的恩诺沙星抗体,建立一步式直接竞争酶联免疫吸附检测(ELISA)技术,并以鳗鱼为样本进行了恩诺沙星残留的加标检测。结果表明,所制备的酶标记抗体效价达到10000 以上,与同族其他药物及族外药物没有显著的交叉反应;所建立的一步式ELISA 法检测限约为10μg/kg。在10～40μg/kg 浓度范围内,加标鳗鱼样本中恩诺沙星的检测回收率在70% 以上,相对平均偏差小于6%,检测时间缩短到2h 以内,约为传统两步式ELISA 法的一半左右。     

苏丹红残留酶联免疫检测技术研究

通过对苏丹红分子结构进行改造,制备了半抗原及人工抗原,免疫动物,制备了苏丹红特异性抗体.该抗体是灵敏度为0.5μg/L,对苏丹红Ⅰ号交叉反应率为100%,对对位红交叉反应率为120%,对于苏丹红Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ号均小于1%.基于该抗体建立了简介竞争性酶联免疫法检测辣椒酱最低检测限(LOD)为27.64μg/kg,定量限(LOQ)为30μg/kg,30μg/kg～90μg/kg添加水平回收率为96.7%～134.1%,变异系数小于15%,可初步用于苏丹红的实验室分析.     

化学发光免疫法检测食品中恩诺沙星残留的研究

建立了基于多克隆抗体的化学发光免疫检测技术,用于测定动物源性食品中恩诺沙星残留含量。反应条件优化结果为:抗体包被最佳稀释倍数为64000倍,最佳酶标抗原稀释倍数为256000倍。结果显示:该方法的回归曲线方程为y=-13.898x+110.38(R2=0.9893),检测线性范围为3~810pg/mL,IC50为69.63pg/mL,IC10为1.41pg/mL;鸡肉、鱼肉、虾肉、蜂蜜、牛奶空白组织样品中恩诺沙星的最低检测限分别为3.76、4.59、2.85、2.65、4.20pg/mL,最低定量限分别为6.13、7.35、3.57、3.73和6.48pg/mL,回收率在88.28%~102.6%,板内和板间的平均变异系数分别为2.61%和4.71%。表明本研究建立的化学发光免疫检测方法满足动物源性食品恩诺沙星残留的检测要求。     

同时检测伐地那非及其类似物的免疫学方法

伐地那非是用于治疗阳痿的磷酸二酯酶(phosphodiesterase type-5,PDE-5)抑制剂药物。违法添加到保健品和中成药的伐地那非及其结构类似物对公众健康构成了威胁。单克隆抗体4B9被鉴别为能够同时检测伐地那非及其类似物。以这株抗体建立的间接竞争ELISA方法,对伐地那非的检测限为5.0 ng/mL,线性范围为5.0~40 ng/mL(R2=0.952),IC50值为18.2 ng/mL。对20个中成药进行检测没有发现假阳性,伐地那非最低检出浓度为0.08 mg/g;添加回收率76%~116%,批内差异为9.7%~16.2%。     

免疫磁性微球的研究进展

免疫磁性微球是免疫学与磁性微球结合而发展起来的一类新型材料，免疫磁性分离法由于具有高效、快速、低毒、操作简单等优点，已广泛地应用于细胞学、免疫学、分子生物学等领域。本文简要介绍了免疫磁性微球的结构、性质、分离原理和特点及其在国内外的制备现状，并对其在细胞分离与提纯、细胞体外扩增、免疫检测、核酸与基因工程、HLA分型、靶向释药等方面的应用作了较详细的阐述。