家蚕杆状病毒表面展示SARS-CoV的RBD蛋白及其免疫原性研究

利用杆状病毒表面展示技术,构建展示SARS-CoV的棘突蛋白（spike protein）受体结合结构域（receptor binding domain,RBD）的重组杆状病毒vBmgp64-RBD,并进一步研究其展示目的蛋白的免疫原性。结果表明：RBD蛋白正确表达并成功展示在病毒囊膜表面,将灭活的纯重组杆状病毒vBmgp64-RBD皮下注射BALB/c小鼠能产生抗RBD蛋白的特异性抗体,且抗体具有抗RBD蛋白的中和作用。证明vBmgp64-RBD有可能作为一种基于杆状病毒的新型SARS疫苗,为SARS的体外检测及后续疫苗的研究开发奠定了基础。     

甘油含量对玉米醇溶蛋白膜储藏稳定性的影响

制备不同甘油添加量的玉米醇溶蛋白膜,在不同环境温度下储藏24 d,以蛋白膜的抗拉强度和断裂延伸率为指标,研究储藏过程中其机械性能的变化.结果表明:随着储藏时间的增加,玉米醇溶蛋白膜的抗拉强度先增加然后回落,断裂延伸率先降低而后上升.储藏温度较高时,蛋白膜的抗拉强度和断裂延伸率分别呈增大和减小的趋势.综合考虑,甘油含量为0.3 g/g的蛋白膜机械性能的稳定性较好.     

基于RD-BmBacmid载体构建表达GFP蛋白的重组杆状病毒的方法

研究构建一种快速表达GFP蛋白的重组杆状病毒的方法。在复制缺陷型的家蚕杆状病毒(BmNPV)穿梭载体RD-BmBacmid基础上,利用PCR方法合成两端分别含有50bp左右同源臂的绿色荧光蛋白基因(AcGFP)片段和线性化的RD-BmBacmid共转染BmN细胞或家蚕幼虫,可以一步获得重组病毒,表达绿色荧光蛋白。实验结果表明,含有AcGFP基因的重组杆状病毒构建成功,在BmN细胞和家蚕幼虫中分别表达了绿色荧光蛋白。因而,本研究成功建立了一种快速构建重组杆状病毒并能够表达GFP蛋白的新方法。     

家蚕杆状病毒表面展示SARS-CoV的RBD蛋白及其免疫原性研究

利用杆状病毒表面展示技术,构建展示SARS-CoV的棘突蛋白(spike protein)受体结合结构域(receptor binding domain,RBD)的重组杆状病毒vBmgp64-RBD,并进一步研究其展示目的蛋白的免疫原性。结果表明:RBD蛋白正确表达并成功展示在病毒囊膜表面,将灭活的纯重组杆状病毒vBmgp64-RBD皮下注射BALB/c小鼠能产生抗RBD蛋白的特异性抗体,且抗体具有抗RBD蛋白的中和作用。证明vBmgp64-RBD有可能作为一种基于杆状病毒的新型SARS疫苗,为SARS的体外检测及后续疫苗的研究开发奠定了基础。     

阿尔茨海默病药物治疗的研究进展

综述了阿尔茨海默病的药物治疗研究进展,包括乙酰胆碱酯酶抑制剂,NMDA受体拮抗剂,非甾体类抗炎药,抗氧化剂,免疫治疗以及针对Aβ的其它治疗手段等.     

天然橡胶生物合成分子调控机制的研究进展

天然橡胶(NR)生物合成的精确调控机制解析是尚未攻克的重要理论问题。综述产胶植物基因组和NR生物合成过程相关基因的调控机制,重点阐述小橡胶粒子蛋白质基因在产胶植物的橡胶合成过程中作用的研究进展,为NR生物合成分子机制以及分子育种研究提供理论参考。指出NR生物合成调控机制的研究与收获技术和提取工艺技术相结合,有助于解析产胶植物的NR合成机制和提高其产胶量。     

基于纳米材料的电化学生物传感器研究进展

该文主要从纳米尺寸材料电极的构建以及纳米材料作为生物分子指示剂两部分展开讨论,描述了依赖于阵列纳米管排列的生物分子与电极间的直接电子传递,纳米管、纳米颗粒为基质的纳米电极的构建,以及以金纳米颗粒、DNA量子点和蛋白为基础的多路分析技术与负载于CNT的新的纳米生物标记,特别讨论了纳米电化学方法在检测DNA和免疫传感器领域取得的研究进展.     

HClO对贻贝粘附单元DOPA氧化的理论研究

采用量子化学密度泛函理论(DFT)研究贻贝粘附单元DOPA(3,4-二羟基苯丙氨酸)的结构与性质,得分子的几何构型、原子电荷分布、反应活性及热力学等参数,表明:DOPA苯环易与HClO(次氯酸)发生亲电取代反应(1),生成3-氯4,5-二羟基苯丙氨酸,阻碍生成贻贝内超强粘附单元DOPA二联体,降低粘附蛋白间粘性;DOPA侧链易与HClO发生亲电亲核反应(2),促使DOPA侧链的断裂,降低粘附蛋白内粘性;在相同温度下,反应(1)和反应(2)的△G<0,且△G(1)<△G(2),反应(1)较易发生.     

幽门螺杆菌TNF-α诱导蛋白的生物信息学分析

肿瘤坏死因子诱导蛋白Tipα是幽门螺杆菌特有的一个膜相关蛋白.它可以激活核因子κB,并诱导多种细胞因子和趋化因子的表达,导致胃炎和随后的肿瘤发生.它是幽门螺杆菌和胃癌发生之间的关键分子.本文利用生物信息学工具分析Tipα序列,预测其信号肽、跨膜区、疏水性、二级结构、三级结构等性质.结果:Tipα具有一段信号肽、脂蛋白信号肽酶切位点及脂盒模体.另外该蛋白没有跨膜区,可能是一个外周膜蛋白.Tipα的三级结构说明,该蛋白形成了一个致密的球状结构,Tipα的二级结构以α螺旋为主.     

过敏原肌质钙结合蛋白在毕赤酵母中的表达、优化及免疫反应性研究

目的 探究天然肌质钙结合蛋白(sarcoplasmic calcium binding protein, SCP)的可替代物,为蟹类过敏原的检测提供基础材料,本研究首次利用毕赤酵母(Pichia pastoris, P. pastoris)高效表达表达三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)重要过敏原SCP,并检验其免疫反应性。方法 根据毕赤酵母的密码子偏好性优化SCP基因并构建重组质粒。将其热激转化至P. pastoris GS115菌株后经遗传霉素(Geneticin, G418)筛选获得阳性高拷贝子。最后通过甲醇诱导表达重组SCP并结合免疫印记(Western blotting, WB)和间接酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)验证其免疫反应性。结果 SCP在P. pastoris GS115中实现了可溶性高效表达,其表观分子量约为28 kDa。在摇瓶水平下,最佳诱导条件为pH为6.0、每24 h添加1.0%(v/v)甲醇,于28℃发酵144 h,在此条件下,纯度为91.6%的SCP产量可达15 mg/L。WB和间接ELISA结果表明,重组SCP具有IgG结合能力。结论 毕赤酵母表达系统可以得到纯度较高且免疫反应性良好的重组SCP。本研究为SCP的理化研究及产业化应用奠定了基础,并有望促进特异性甲壳类过敏原检测的发展。