牛、羊乳及其乳制品中幽门螺杆菌污染及检测技术研究进展

近年来大量研究已经表明幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）可能是种食源性致病菌,而牛、羊乳是其最可能的感染源。食物中较难分离培养出Hp,而聚合酶链式反应相关技术灵敏度高,能检出样品中微量的Hp,可用于检测牛、羊乳中幽门螺杆菌的污染情况,但是与人类临床方面检测Hp技术的多样性、特异性与成熟性相比,食品中Hp快速而有效的检测方法及相关标准还相对缺乏。本文主要就近年来牛、羊乳及其乳制品中幽门螺杆菌污染及检测技术的研究进展进行综述,为进一步完善Hp传播途径与致病机制等研究提供一些参考。     

气相色谱-质谱检测人尿液中非那雄胺代谢物

采用气相色谱-质谱法检测人尿中非那雄胺三个代谢物。叔丁基甲醚提取,甲基睾酮作为内标,对尿样的游离部分和酶解后部分分别提取,采用HP-1MS柱（17m×0.2 mm i.d.×0.11mm）,程序升温,质谱检测。发现一种羧酸代谢物（M1）和两种羟基代谢物（M2和M3）,采用标准品对照确证了M1的结构;另外根据质谱特征阐明M2和M3的结构,总结三种代谢物的质谱裂解特点。初步分析三种代谢物的排泄规律,M1为主要代谢物,M2和M3为次要代谢物,M1的可检出时期最长,M3最短。该方法简单,快速,可靠,适合进行尿样的常规检测。     

荆花胃康胶丸联合PPI三联清除幽门螺旋杆菌感染的临床观察

目的:观察荆花胃康胶丸联合PPI三联疗法清除幽门螺旋杆菌感染的临床疗效。方法:100例幽门螺旋杆菌阳性患者按照治疗方法不同随机分为两组,对照组48例给予纯西医治疗,雷贝拉唑钠肠溶片、胶体果胶铋干混悬剂、阿莫西林胶囊、呋喃唑酮片;荆花组52例给予荆花胃康胶丸联合雷贝拉唑钠肠溶片、阿莫西林胶囊、呋喃唑酮片,对比分析两组治疗效果。结果:采用荆花胃康胶丸组幽门螺旋杆菌根除率为92.31%,优于对照组的77.08%,差异有统计学意义(P<0.05);荆花组不良反应发生率为5.77%,对照组为16.67%,两组不良反应情况差异无统计学意义(P>0.05)。结论:采用荆花胃康胶丸四联用药清除幽门螺旋杆菌优于单纯西药治疗。     

浅谈在治疗胃、十二指肠疾病中根除幽门螺杆菌的重要性

自1983年幽门螺杆茵(Hp)培养成功后,幽门螺杆茵与慢性胃炎及溃疡病的关系普遍得到世界医务工作者的广泛重视.凼门螺杆茸阳性的慢性胃炎约占慢性胃炎的60%,以上,70%,的胃溃疡和90%的十二指肠清疡病人胃粘膜活检可发现此茵.目前已公认该茵是慢性胃炎的一个主要致病的原因.探讨幽门螺杆菌的致病机制及根除凼门螺杆菌的治疗方案是胃.十二指肠炎症及溃疡治疗的关键环节.     

呋喃妥因抗原的制备及其在免疫胶体金快速检测中的应用

本研究从优化呋喃妥因代谢物免疫抗原、包被抗原的结构及优化偶联技术角度出发,提高呋喃妥因代谢物抗体的特异性、亲和力,并通过优化样品前处理步骤,最终得到呋喃妥因代谢物胶体金免疫层析试纸条的检测低限为1.0μg/kg,特异性好,稳定性高。     

冷藏对草鱼肉超微结构及代谢物的影响

为解析冷藏草鱼肉品质变化机制,本实验分别采用气相色谱-飞行时间质谱法和透射扫描电子显微镜分析了草鱼肉4 ℃冷藏0、24、72 h后小分子代谢物组成和超微结构变化。结果发现,随着冷藏时间延长,草鱼鱼肉肌纤维间隙变大、排列开始散乱,部分肌节发生断裂。代谢组学共鉴定到211 种代谢物,其中42 种代谢物的含量变化倍数超过1.5 倍（P＜0.05）。乳酸、磷酸累积是鱼肉pH值下降的主要原因。本研究发现三羧酸循环途径代谢物中只有琥珀酸含量显著降低（P＜0.05）,转化成4-羟基丁酸甲酯和γ-氨基丁酸,这3 种化合物水平可能是冷藏草鱼肉新鲜度潜在评价指标。多不饱和脂肪酸（如亚麻酸、花生四烯酸）含量显著下降（P＜0.05）,但壬二酸含量显著增加（P＜0.05）。冷藏过程中,缬氨酸、L-半胱氨酸含量显著增加（P＜0.05）。草鱼肉冷藏过程中,脂肪氧化先于蛋白质降解。草鱼肉中含有的植物次级代谢物（胡椒碱、柚皮素、茉莉酸甲酯、马钱子苷、α-蛔蒿素、枞酸、3,4-二羟基扁桃酸）可通过抑制黄嘌呤氧化酶影响鱼肉核苷酸代谢及鱼肉滋味。     

液质联用测定水产品中硝基呋喃类代谢物 残留量的不确定度评定

目的采用液相色谱串联质谱法对水产品中硝基呋喃类代谢物的残留量进行测量不确定度评定。方法根据农业部783号公告-1-2006的前处理方法进行处理,根据JJF 1059.1-2012《测量不确定度的评定与表示》等相关理论,通过建立数学模型,对测量结果的各不确定度来源进行分析和量化。结果当硝基呋喃类代谢物的添加水平为2.0 ng/m L时,4种硝基呋喃类代谢物结果可表示为呋喃西林代谢物(2.114±0.114)ng/m L,k=2;呋喃妥因代谢物(2.162±0.124)ng/m L,k=2;呋喃它酮代谢物(1.880±0.107)ng/m L,k=2;呋喃唑酮代谢物(2.076±0.097)ng/m L,k=2。结论在确定的实验条件下,本方法的不确定度主要来自于仪器设备测试引起的峰面积的变化,呋喃西林代谢物和呋喃妥因代谢物方法的回收率也是一个主要影响因素。     

碳量子点酒对幽门螺旋杆菌药效学研究及作用机制预测

目的:探讨碳量子点女士酒（简称女士酒）、碳量子点碱性白酒（简称碱性酒）对幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, Hp）的体内抑菌效果,并结合网络药理学技术预测其作用机制。方法:本研究将70只KM小鼠随机分为空白对照组、模型组、阳性药组、女士酒高、低剂量组以及碱性酒高、低剂量组。除空白对照组外,其余组小鼠灌服菌悬液,构建幽门螺杆菌感染模型。以小鼠体重等一般体征变化、胃部大体形态变化、尿素酶强度以及病理学切片为评价指标,评价其抑制Hp效果。运用网络药理学技术,通过文献筛选酒中健康成分并在TCMSP平台寻找其作用靶点,通过GeneCards数据库采集Hp疾病靶点,将二者交集靶点导入Cytoscape 3.7.1软件构建蛋白相互作用（protein-protein interaction, PPI）网络图和“酒-成分-靶点”网络图,之后进行GO和KEGG富集分析。结果:阳性对照组、女士酒高、低剂量组及碱性酒高剂量组与模型组比较,Hp强阳性率、总阳性率均显著降低（P<0.05）,并能显著降低尿素酶检测阳性率（P<0.05）,减少细菌定植,减轻炎症情况,且疗效呈现剂量依赖性;与模型组比较,女士酒、碱性酒低剂量组炎性细胞明显减少,炎症程度明显降低;女士酒、碱性酒高剂量组几乎不可见炎症反应,胃腺细胞分布较清晰工整。筛选出21个酒中微量健康成分,对应315个作用靶点,检索到905个疾病相关靶点,交集靶点74个。最终分析得到CUL4B、ACTB、PARP1等53个核心靶点,涉及对细菌来源分子的反应、防御反应的调节、溶酶体、氧化还原酶活性等多种生理过程,主要调控IL-17 信号通路、TNF信号通路、MAPK信号通路及PI3K-Akt 信号通路等。结论:碳量子点酒对Hp具有较好的抑制作用,且酒中微量成分通过多通路作用于多靶点以发挥抑菌作用,为酒可抑制Hp作用提供理论支撑。     

奋乃静在人胆汁中的代谢物分析

建立了超高效液相色谱 四极杆串联飞行时间质谱（UPLC/Q-TOF MS）检测并表征奋乃静在人胆汁中代谢物的方法。T管收集一名精神病患者服用奋乃静后的胆汁样品,经乙腈沉淀蛋白预处理后,采用UPLC/Q-TOF MS进行分析。根据高分辨质谱给出的准确分子质量信息推测可能的分子式,结合MS E功能采集的前体离子和产物离子信息,利用质量缺损过滤（MDF）和generic dealkylation等代谢物鉴定软件筛选代谢物。通过对比原形药物和代谢物的质谱裂解途径,推测可能的代谢物结构。在服药（4 mg,b.i.d）后的人胆汁中,共检测到29种奋乃静代谢物,包括I相代谢物16种,II相代谢物13种,其中16种为首次报道的新颖代谢物。奋乃静在人体内的主要代谢途径包括羟基化、脱氢、N-去烷基化、甲基化、硫酸及葡萄糖醛酸结合等,该结果进一步完善了奋乃静在人体内的代谢途径。     

UPLC-MS/MS测定啤酒中茚嗪氟草胺及其代谢物残留量

该实验建立了基于分散固相萃取结合超高效液相色谱-串联质谱技术（UPLC-MS/MS）对啤酒中的茚嗪氟草胺及其3种代谢物残留量的测定方法。样品经乙腈提取后进行盐析分层,离心后乙腈层用C18固相萃取剂净化后,于电喷雾离子源正离子（ESI+）模式下采集碎片信息。结果表明,茚嗪氟草胺及其3种代谢物的基质曲线在1.0～50.0 μg/L的质量浓度内呈良好线性关系,相关系数（R2）均大于0.999,平均加标回收率为85.4%～98.1%,精密度试验结果的相对标准偏差（RSD）为2.29%～4.55%。方法检出限（LOD）和定量限（LOQ）分别为2.0 μg/kg和5.0 μg/kg。该方法快速高效,回收率、灵敏度高,重复性好,可有效测定啤酒中茚嗪氟草胺及其代谢物的残留量。