阿莫西林合泮托拉唑治疗胃溃疡75例临床疗效观察

目的:探讨泮托拉唑合阿莫西林治疗胃溃疡的临床效果。方法:选取我院消化内科就诊的胃溃疡患者150例作为研究对象,随机分为实验组与对照组各75例,实验组采用泮托拉唑加阿莫西林治疗,对照组采用奥美拉唑加阿莫西林治疗。对比两组患者临床效果、不良反应及HP根治情况。结果:治疗组总有效率为93.3%,对照组为86.7%。差异无统计学意义(P>0.05)。实验组HP根治率为90.7%;明显优于对照组的66.7%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:泮托拉唑合阿莫西林治疗胃溃疡能有效提高HP根治率,患者易于接受,值得临床推广应用。     

胶体金法检测幽门螺杆菌的临床价值

目的探讨胶体金法检测幽门螺杆菌感染的临床价值。方法门诊收集153例有上消化道症状的成年患者,均行13C呼气试验、胶体金法和快速尿素酶试验3种方法检查幽门螺杆菌,以13C呼气试验结果为"金标准",余两种检测方法分别与"金标准"进行比较。结果血清胶体金法可靠性较好,优于快速尿素酶法。结论胶体金法检测血清中幽门螺杆菌抗体,有较高的准确率及特异性,取材方便,操作简便,是较为理想的检测幽门螺杆菌感染的方法。     

幽门螺杆菌相关性胃炎患者中医病、证规律研究

目的:探讨幽门螺杆菌(helicopter pylori,Hp)相关性胃炎1 000例患者中医病、证分布规律。方法:依据Hp相关性胃炎诊断标准及痞满、胃痛、嗳气、吐酸、呕吐等诊断要点,将由赵文霞教授诊断的Hp相关性胃炎患者1 000例进行分析,观察其中医病种归属,探讨其病种分布规律。参照中医相关诊疗共识意见,确定相应的中医证型,观察痞满证型分布规律。结果:1 000例Hp相关性胃炎患者中,痞满556例,占55.6%;胃痛218例,占21.8%;嗳气81例,占8.1%;吐酸107例,占10.7%;呕吐38例,占3.8%。在556例痞满患者中,肝气犯胃兼湿热证共280例,占50.36%;脾虚气滞证93例,占16.73%;脾胃虚寒证52例,占9.35%;寒热错杂证131例,占23.56%。结论:Hp相关性胃炎以痞满最为常见,而在中医证型分布上,以肝气犯胃兼湿热证最为多见。     

抗幽门螺杆菌细胞空泡毒素纳米抗体的制备及鉴定

目的:获取抗幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)细胞空泡毒素纳米抗体并鉴定其结合和抑制幽门螺杆菌的能力.方法:用灭活的幽门螺杆菌免疫羊驼,以重组蛋白VacA为靶点,从噬菌体展示文库中筛选与幽门螺杆菌特异性结合的纳米抗体,间接phage-ELISA鉴定结合重组蛋白VacA能力并诱导其进行原核表达,鉴...     

口服重组幽门螺杆菌疫苗冻干工艺的优化

目的优化口服重组幽门螺杆菌疫苗的冻干工艺,以降低冻干过程中制剂瓶的破瓶率。方法通过改变冻干工艺中预冻、升华干燥、解析干燥阶段的工艺参数,对12批口服重组幽门螺杆菌疫苗进行冻干试验,在保证样品外观、水分、p H值及无菌检查合格的前提下,以制剂瓶的破瓶率为指标筛选最优冻干工艺。结果口服重组幽门螺杆菌疫苗的最优冻干工艺条件为:预冻期2 h内冷冻至-45℃并维持4.5 h;升华干燥时阶段性升温,总历时34 h;解析干燥时28℃维持12 h。按此工艺冻干后的口服重组幽门螺杆菌疫苗样品的外观、水分、p H值及无菌检查均在合格范围内,且制剂瓶的破瓶率为0。结论优化后的口服重组幽门螺杆菌疫苗冻干工艺稳定可靠,为今后的大规模生产奠定了基础。     

幽门螺杆菌粘附素基因hpaA的克隆、表达及鉴定

目的　克隆幽门螺杆菌粘附素基因hpaA ,构建其原核表达系统并鉴定融合蛋白免疫原性。方法　采用PCR技术从幽门螺杆菌总DNA中扩增hpaA基因 ,T -A克隆后测定核苷酸序列 ,构建pET30a的HpaA表达载体 ,在E .coliBL2 1DE3宿主菌中用IPTG诱导表达 ,Ni2 + 柱纯化后经Westernblot鉴定其免疫原性。结果　所克隆的hpaA基因与报道的相应核苷酸序列同源性为 94 . 8%～ 97. 3% ,氨基酸序列同源性为 94 . 6 %～ 97 .7% ,在 134～ 139位存在一段KRTIQK结构 ,HpaA融合蛋白在pET30a载体中可高效表达 ,经纯化后可获得高纯度的重组蛋白。结论　成功构建HpaA原核表达系统 ,所表达的融合蛋白具有较好的免疫原性 ,可作为Hp疫苗的候选抗原。     

幽门螺杆菌过氧化氢酶基因克隆及表达

目的 克隆幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)过氧化氢酶(katA)基因并在大肠杆菌中进行表达。方法 采用PCR扩增幽门螺杆菌katA全长基因,将其克隆入pET-11c载体中,经测序证实后,在大肠杆菌中进行表达,产物用Western blot检测其抗原性并进行N末端氨基酸的测序。结果 幽门螺杆菌katA基因全长1 518bp,编码氨基酸505个。在BL21(DE3)中的表达量约占细菌总蛋白的24.9％,表达产物经SDS-PAGE显示其相对分子质量与软件预测结果 58 000相符,N末端5个氨基酸测序结果与Hp中天然的katA完全一致,经Western blot检测可被 Hp全菌抗血清识别。结论 katA能在大肠杆菌中进行高效表达,具有良好的免疫反应性,可望为研究 Hp的致病机理、实验诊断及亚单位疫苗等提供充足的katA原材料。     

从包涵体中纯化重组人幽门螺杆菌尿素酶B亚单位

目的 建立一种有效的方法，从包涵体中纯化重组人幽门螺杆菌尿素酶B亚单位（rUreB）。方法重组大肠杆菌发酵后，表达的rUreB包涵体经洗涤、变性、复性，采用Q Sepharose Performance阴离子交换层析和Pheny1 Sepharose High Performance疏水层析分离纯化。使用 SDS－PAGE和HPLC检测纯度，选用 ELISA和 Western－bloning对纯化蛋白的生物学活性进行鉴定。结果 rUreB包涵体经洗涤和溶解后，rUreB的纯度＞70％。包涵体溶解液经阴离子交换层析和疏水层析后纯度超过95％。rUreB纯品具有良好的生物学活性。结论 建立了从包涵体中获得高纯度的rUreB的工艺，为进一步的研究打下了基础。     

幽门螺杆菌全菌抗原对母鸡的免疫原性

目的　研究幽门螺杆菌 (Hp)全菌抗原的免疫原性及Anti Hp IgY的预防和治疗作用。方法　用超声Hp波粉碎的Hp抗原免疫产蛋母鸡 ,通过IHA和ELISA间接法检测母鸡的免疫应答。用SDS PAGE分析Hp全菌抗原 ,并用抗Hp IgY做免疫印迹。结果　母鸡免疫成功率为 10 0 %。初免 45d后 ,抗Hp IgYIHA效价为 1∶10 2 4,ELISA效价超过 1∶45 0 0 0。Hp抗原的SDS PAGE显示有 2 6条蛋白染色带 ,其中主带有 10条 ,免疫印迹表明Hp的超声粉碎物特异性抗原蛋白带相对分子质量为 70 0 0 0、6 6 0 0 0、42 0 0 0、3430 0、2 95 0 0、2 70 0、185 0 0。结论　本研究为工业化制备抗Hp IgY奠定了基础     

白细胞介素-1B和肿瘤坏死因子-α基因多态性与胃溃疡、胃癌易感性的相关性

目的探讨人群中白细胞介素-1B(IL-1B)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因多态性与胃溃疡、胃癌易感性的相关性。方法选取幽门螺杆菌阳性的39例胃溃疡患者、35例胃癌患者和70名健康对照者,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析法检测该人群中IL-1B-511、TNF-A-308和TNF-A-857基因多态性。结果疾病组与对照组中IL-1B-511各基因型频率的分布差异无统计学意义。与对照组比较,胃溃疡组TNF-A-308各基因型的频率分布、TNF-A-857各基因型的频率分布以及胃癌组TNF-A-308各基因型的频率分布差异均有统计学意义。经Logistic回归分析,与携带TNF-A-308G/G者比较,携带TNF-A-308A/A者发生胃溃疡的危险性为OR=21.62(95%CI:2.07～226.13);与携带TNF-A-857C/C者比较,携带TNF-A-857T/T者发生胃溃疡的危险性为OR=5.37(95%CI:1.28～22.50);与携带TNF-A-308G/G者比较,携带TNF-A-308A/A者发生胃癌的危险性为OR=16.41(95%CI:1.62～116.55)。结论TNF-α基因多态性与胃溃疡、胃癌的易感性相关。