基于对羟基苯硫酚自组膜免疫传感器的研究

利用自组装技术将对羟基苯硫酚(4—HTH)固定在金片电极上,以1—乙基—3—(3—二甲氨基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)和N—羟基硫代琥珀亚胺(NHS)作为活化剂,将羊抗—小鼠IgG以共价键形式固定在对羟基苯硫酚自组装单分子膜修饰的金片电极上,制备了一种免疫传感器。根据抗体与抗原之间特异反应前后引起的电极电位变化,对小鼠IgG进行定量测定。利用循环伏安法分别对裸金片电极、对羟基苯硫酚自组装膜、抗体膜、抗原膜进行了表征。结果表明:该免疫传感器灵敏度高、响应速度快、检测范围宽,其检测下限为0.2μg/L,检测范围为0.2~30μg/L,并可以再生、重复利用,寿命可达10 d左右     

研制联合疫苗需要考虑的问题

一、基本情况 １．联合疫苗的定义：１９９５年１０月美国食品药品管理局（Ｆｏｏｄ　ａｎｄ　Ｄｒｕｇ　Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｏｎ，ＦＤＡ）在《联合疫苗的评价要点》一文中给予联合疫苗的定义为“能够预防多种疾病的联合制品（其中包括在注射前混合的制品和载体疫苗）；或能预防由同一病原体的不同株或不同血清型引起的同一疾病的多价疫苗。这类产品可以由活的或灭活的多种微生物以及多种纯抗原联合制成。如果载体疫苗也可以预防此载体所引起的疾病，亦认为是联合疫苗”。 ２．扩大免疫计划：多年来，世界卫生组织倡导和推进扩大免疫计…     

血清结合甘胆酸放射免疫分析药盒研制(阻断法)

人血清中结合甘胆酸含量测定,采用阻断法放射免疫分析药盒,达到直接测定血样中结合甘胆酸的含量。本药盒以~(125)I-甘胆酸组胺为标记抗原,放化纯>90%。用去激素正常人血清配制系列标准,标准浓度分别为0.25.100.250.1000.4000μg/dl。兔抗血清,16~#兔抗血清亲和常数K=2.6×10~8l/mol。以0.5%ANS(8-苯胺-1-萘磺酸)磷酸盐缓冲溶液为阻断剂。PEG(聚乙二醇)为分离沉淀剂。本药盒分析灵敏度10μg/dl。批内批间精密度分别为4.7%和12.5%。平均回收率109%。     

直结肠癌相关抗原LEA分布的免疫光镜和电镜观察

本文主要应用免疫细胞化学技术对新研究成的直结肠癌细胞表面大分子抗原(LEA)在光、电镜下进行了较详细的定位观察。收集新鲜直结肠癌组织标本,冰冻切片后用常规ABC免疫酶标法染色,在光镜下观察,将CX1和CL187(人结肠癌培养细胞系)接种培养在置于培养皿内的盖玻片和载玻片表面,二、三天后分别用间接免疫荧光法和胶体金包埋前法免疫染色,前者在荧光镜下观察,后者以上升浓度的系列酒精脱水,EPON812原位包埋,经LKB超薄切片机切成8000A的切片,在日立H_600型透射电镜下观察。     

血清BAP和PSA测定在前列腺癌骨转移诊断中的价值

我们分析、比较了骨源性碱性磷酸酶(BAP)和前列腺特异抗原(PSA)对前列腺癌骨转移的诊断意义,并探讨了二者在前列腺癌骨转移分级中的应用价值。对68例前列腺癌病人进行骨显像,根据骨显像结果及临床表现分为骨转移组与非骨转移组。骨显像依Soloway分级标准分为五级(M0—M4)。对所有病人进行血清BAP与PSA检测,各组之间BAP值及PSA值比较采用t检验。对转移级别的升高与BAP值之间进行相关分析。结果显示骨转移的级别升高与BAP呈正相关。(r=1.1083,P<0.01)。PSA仅在M0与M1—M3之间有显著差异。BAP对前列腺癌骨转移最佳检测范围为25—35u/L,阳性预测率为96.6%,阴性预测率为75%。BAP与PSA值分别为35u/L和20ng/mL时,骨转移阳性预测率为97.5%。BAP与PSA值分别为25u/L和20ng/mL时,阴性预测率达73.9%。由此我们得出:1.BAP预测前列腺癌骨转移比PSA有效,并且BAP对前列腺癌骨转移的分级有诊断价值;2.BAP与PSA联合应用可提高前列腺癌病人骨转移的阳性预测率。     

人伤寒减毒疫苗株及其用以表达外源抗原开发新一代疫苗应考虑的要点

本文一方面介绍伤寒减毒突变株Ty21a及其疫苗的生物学特征,进一步研究伤寒减毒活疫苗的策略以及研究进展情况;另一方面提出了利用伤寒减毒株表达外源抗原开发新一代疫苗应考虑的要点。     

速率比浊法测定13价肺炎球菌结合疫苗中的结合多糖抗原含量

目的建立速率比浊法检测13价肺炎球菌结合疫苗中的结合多糖抗原含量,并对方法进行验证。方法采用免疫化学系统(IMMAGE 800),选择非竞争性浊度模式,样品或标准品20μl,血清20μl,反应缓冲液200μl,增益系数为4,反应时间为2.5 min;样品离心沉淀后用缓冲溶液复溶,经Na OH解吸附法处理样品和标准品。对方法进行线性、重复性、准确性、专属性、适用性验证,并采用建立的方法检测3批13价肺炎球菌结合疫苗样品中的各型多糖抗原含量。结果在设定的条件下,各型多糖抗原浓度在1~6μg/ml范围内,线性良好(相关系数0.99);各型多糖抗原含量重复检测的相对标准偏差(RSD)均低于8%;13型多糖结合抗原含量的回收率在70%~130%之间;6A与19A型特异性血清与其他12型多糖抗原有交叉反应,但与阳性对照的比值均较低(5%),其他12种特异性血清特异性良好,无交叉反应;除1、3型抗原外,其余型别的游离多糖抗原基本不干扰结合抗原的检测结果。结论建立的速率比浊法检测13价肺炎球菌结合疫苗中的结合多糖抗原含量重复性、准确性良好,1、3型结合抗原不适用于直接离心沉淀获得。     

2014年供血浆人群及血液制品戊型肝炎病毒感染情况分析

目的分析2014年供血浆人群及血液制品的戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)HEV感染情况。方法采用ELISA法对不同省份(四川省、山东省、山西省)供血浆人群血浆样品进行HEV Ag、HEV Ig M和HEV Ig G的检测,并对HEV Ag阳性供血浆者作追踪分析;对合并血浆及血液制品成品进行HEV Ag检测。结果 36 340份供血浆者样品中有HEV Ag阳性26份(0.07%);3 780份血浆样品中有HEV Ig G阳性1 519份(40.19%),HEV Ig M阳性34份(0.90%)。115批合并血浆样品及113批血液制品成品中的HEV Ag检测结果均为阴性。结论调查的供血浆人群HEV阳性率存在地区差异,血液制品的安全性较高。     

呋喃妥因抗原的制备及其在免疫胶体金快速检测中的应用

本研究从优化呋喃妥因代谢物免疫抗原、包被抗原的结构及优化偶联技术角度出发,提高呋喃妥因代谢物抗体的特异性、亲和力,并通过优化样品前处理步骤,最终得到呋喃妥因代谢物胶体金免疫层析试纸条的检测低限为1.0μg/kg,特异性好,稳定性高。     

氰戊菊酯免疫分析关键试剂人工抗原的合成与应用效果

以氰戊菊酸、间苯氧基苯甲醛为原料,利用酰氯与伯胺的活泼反应,合成了一种含有3个碳原子长度连接臂的氰戊菊酯半抗原,并通过核磁共振鉴定;用活泼酯法将合成的氰戊菊酯半抗原分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联制备免疫抗原和检测抗原,紫外-可见连续光谱扫描结果显示,所制备的人工抗原的图谱具有载体蛋白和半抗原的特征峰叠加现象,表明偶联成功;人工抗原的免疫结果显示,以BSA偶联物免疫小鼠后获得抗血清效价分别为160 000、140 000和110 000,间接竞争ELISA(酶联免疫吸附分析)测定抗体IC50(半数抑制浓度)值为35.1 μg/L,与其他供试农药的交叉反应率均＜1%,为氰戊菊酯抗体研制及免疫分析检测技术研究提供了关键试剂.