红曲霉白色突变株固态发酵生产酸性蛋白酶的研究

红曲霉白色突变株因不产色素可扩大红曲霉的使用范围,对经紫外诱变后的红曲霉白色突变株(W1)进行固体发酵并对其所产生的酸性蛋白酶的性质进行初步研究.研究表明此酸性蛋白酶最适反应温度为50 ℃,在30～40 ℃下相对稳定;最适反应pH为3.0,在pH 3.0～5.0之间相对稳定;Mn2 、Ag 、K 对酸性蛋白酶有激活作用,Fe3 、Al3 、Mg2 、Cu2 对酸性蛋白酶有一定抑制作用.通过Sephadex-G75凝胶过滤层析及SDS-PAGE蛋白质电泳分析此蛋白酶的相对分子量范围大约在55000～60000之间.     

真菌多糖对鼠李糖乳杆菌体外增殖的影响

通过液体发酵提取曲霉HGY8和云芝胞内胞外多糖,脱蛋白,制成一定浓度溶液。选用MRS培养基,采取试管法,试验曲霉和云芝多糖对鼠李糖乳杆菌增殖的影响,并将其应用于鼠李糖乳杆菌发酵乳的研究中。结果表明:0.5%、1%的曲霉和云芝多糖对鼠李糖乳杆菌体外增殖均有极显著的效果(P<0.05)。不同浓度相比之下,2%的曲霉多糖和1%的云芝多糖更能提高鼠李糖乳杆菌的活性,缩短凝乳时间。初步显示,曲霉和云芝多糖中含促生长因子。     

储粮主要危害性霉菌过氧化氢酶特性研究

从不同来源的储粮样品中分离了4株灰绿曲霉、3株白曲霉，将培养后菌体破碎得到的粗酶液分别经硫酸铵盐析、SephadexG—200柱层析纯化得到过氧化氢酶．对分离酶的主要特性研究结果表明，这些过氧化氢酶的最适温度均为35℃左右，在水溶液中对热不稳定．酶催化适宜的pH范围为4-9，最适pH均在7．0左右，酶的Km值在33．3-41．7mmol/L范围，金属离子及化合物对酶活力的影响基本相同；1mmol／L浓度的CU^2 、Mg^2 、Fe^2 、Zn^2 对酶活力有激活作用，1mmol/L浓度的巯基乙醇、Fe^3 、Ca^2 对酶活力有抑制作用，1mmol/L的NaN3、Hg^2 可使酶完全失活．该特性研究为酶学方法测定储粮霉菌的应用奠定了基础．     

免疫亲和层析净化-高效液相色谱法同时检测几种食品中黄曲霉毒素和赭曲霉毒素A

建立一种花生食品的前处理方法,通过高效液相色谱法检测黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2和赭曲霉毒素A。样品经过甲醇-水提取,提取液经过滤、稀释后,滤液经过含有黄曲霉毒素和赭曲霉毒素特异抗体的免疫亲和层析净化,此抗体对黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、赭曲霉毒素A具有专一性,黄曲霉毒素、赭曲霉毒素交联在层析介质中的抗体上。用水将免疫亲和柱上杂质除去,用甲醇通过免疫亲和层析柱洗脱,洗脱液通过带荧光检测器的高效液相色谱仪,柱后碘溶液衍生测定黄曲霉毒素的含量;洗脱液通过带DAD检测器的高效液相色谱仪测定赭曲霉毒素的含量。本方法检出花生中黄曲霉毒素G1、B1和赭曲霉毒素A的检出限均为0.5μg/kg。,黄曲霉毒素B2、G2的检出限均为0.175μg/kg。结果表明利用免疫亲和层析净化-高效液相色谱法检测花生中的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2和赭曲霉毒素A,方法准确、可靠。     

基于适配体荧光传感器检测山药和薏苡仁中的赭曲霉毒素A

目的 构建一种操作简单、选择性好、快速检测山药和薏苡仁中赭曲霉毒素A(ochratoxinA,OTA)的适配体荧光传感检测方法。方法 制备表面包裹适配体且孔穴负载荧光染料罗丹明6G的二氧化硅纳米颗粒,OTA与其表面的适配体结合后,检测溶液的荧光信号变化,从而实现OTA浓度的检测。结果 在最佳条件下, OTA的质量浓度在5～500 ng/mL范围内与荧光强度差值呈良好的线性关系,相关系数为0.9918,检出限为2.06ng/mL。应用于山药和薏苡仁中OTA的检测,加标回收率为90.7%～107.1%,相对标准偏差为2.41%～5.66%。结论 该方法操作简便、选择性好、稳定性高,有望用于药食同源中药材中OTA的快速检测。     

米曲霉菌丝球对铅的吸附作用研究

探讨了米曲霉菌丝球形成的规律以及米曲霉菌吸附重金属的效果,对米曲霉呈球状生长和用此菌丝球吸附水溶液中的铅进行了研究。实验结果表明,在培养液pH为4.5、孢子悬液浓度为107个/mL、表面活性剂吐温80浓度为0.3%和摇床转速为150r/min,加絮凝剂浓度为万分之四的条件下,于27℃下培养3d,形成的直径为1.5～1.7mm的菌丝球光滑均匀,具有一定的机械强度,对Pb2+吸附能力最强。用0.2mol/L的NaOH处理该菌丝球,对铅溶液的吸附率达到了95%以上。表明用该菌丝球吸附水溶液中的Pb2+是可行的。      

不同培养条件对红曲霉产桔霉素影响的研究

用16株红曲霉分别接种酵母浸膏蔗糖培养基(YSM)和土豆葡萄糖培养基(PDM),并采用高效液相色谱法(HPLC)检测了培养基中桔霉素的含量,以观察不同培养条件对红曲霉产桔霉素的影响。结果发现,红曲霉于YSM中27℃静置培养14d时,有13株产桔霉素,其含量为2～192mg/L不等;而在PDM中35℃振荡培养8d时,只有4株产桔霉素,其含量在3～21mg/L之间;在两种培养条件下均产桔霉素的有4株,且均为安卡红曲霉。      

红曲酯化酶新技术推动白酒质量提高

红曲酯化酶新技术的应用是中国白酒工业的一项重大创新成果。由红曲霉发酵生产的酯化酶应用于白酒生产的创新技术填补了红曲应用的一项空白，对我国白酒质量的提高、发展生态食品具有重要意义。     

赭曲霉毒素A单克隆抗体的体外制备及其重组抗体的构建研究

目的 实现抗赭曲霉毒素A(ochratoxinA,OTA)单克隆抗体的体外制备及其重组抗体表达载体的构建与瞬时转染表达。方法 以前期获得的OTA杂交瘤细胞株(O16)为研究对象,通过无血清驯化培养的方式开展OTA单克隆抗体的体外制备研究;采用简并引物法获取OTA杂交瘤细胞的单克隆抗体编码基因,在此基础上构建OTA重组全长抗体表达载体以及OTA重、轻链可变区基因片段与人源恒定区片段连接的重组嵌合抗体表达载体,并基于哺乳动物细胞系,开展两种重组抗体的瞬时转染表达研究。结果 通过缓降血清浓度的方式对OTA杂交瘤细胞进行无血清驯化,实现了体外培养制备OTA单克隆抗体;在此基础上测得OTA单克隆抗体的重链和轻链基因序列,并成功构建了OTA重组全长抗体表达载体(pCDNA3.4-OTA-H/L)和重组嵌合抗体表达载体(p FUSE-OTA-H/L),通过共转染实现了两者在哺乳动物细胞系中的瞬时转染表达;经间接酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)确定体外培养制备的OTA抗体、OTA重组全长抗体和嵌合抗体均具备特异性结合抗原的能力,三者的...     

亚硝基胍-紫外复合诱变选育高产衣康酸菌株

为提高土曲霉KYK-031发酵生产衣康酸能力,对出发菌株开展诱变育种和高产能力选育研究。采用亚硝基胍（NTG）和紫外（UV）复合诱变方法,通过平板初筛和摇瓶复筛,筛选衣康酸高产突变株。结果表明,亚硝基胍在500μg/mL浓度下的最佳诱变时间为40 min,15 W紫外诱变的最佳诱变时间为2 min,亚硝基胍-紫外复合诱变后筛选得到一株衣康酸高产菌株KYK-1035,摇瓶发酵产量为73.7 g/L,比出发菌株（41.8 g/L）提高了76.3%,糖酸转化率为63.4%。采用亚硝基胍-紫外复合诱变,提高了出发菌株诱变的正突变率,为衣康酸发酵继续放大和工业化生产奠定了基础。