杜仲叶中松脂醇二葡萄糖苷的提取分离及含量测定

采用溶剂法提取新鲜杜仲叶中的松脂醇二葡萄糖苷(PDG),以体积分数85%乙醇溶液为溶剂,杜仲叶与溶剂的比例为1:4(g/mL),60℃超声提取30min,真空抽滤得到滤液。用制备薄层分离纯化滤液,得到PDG提取产物,产率为2.00%。测定PDG标准物的紫外吸收光谱图,结果PDG在228nm处有最大吸收峰;用高效液相色谱法测定提取物样品中PDG的含量,检测波长228nm。PDG进样量在0.00238～0.0950mg/mL范围内呈良好的线性关系(y＝84.8x＋0.838,r＝0.9993),平均回收率为102%。经测定,新鲜杜仲叶中PDG含量约为0.0960%,提取产物中PDG含量为4.54%。该方法操作简单,溶剂用量少,可有效提取并分离杜仲叶中的PDG。     

反相高效液相色谱-光电二极管阵列检测器法测定杜仲叶发酵液中绿原酸的含量

建立反相高效液相色谱(HPLC)法测定杜仲叶发酵液中绿原酸的含量。色谱条柱SymmetrySheildRP18柱(3.9×300mm,5μm),以水:甲醇:乙酸(88:12:1.2,V/V)为流动相,流速1.0ml/min,检测波长326nm,柱温25℃。绿原酸对照品在2.24～11.2μg范围内线性关系良好(r=0.9993)。本方法简便、准确,线性范围宽,可用于含绿原酸的原料及产品的质量控制。     

杜仲在我国的潜在适生区估计及其生态特征分析

为开发我国丰富的杜仲叶资源,研究超声波-微波辅助提取杜仲叶多糖的最优工艺条件及其理化性质和体外抗凝血活性。首先通过单因素实验确定超声波功率、提取温度、微波功率、料液比、提取时间等影响多糖得率因素的范围,然后通过Plackett-Burman试验筛选关键影响因素,再采用Box-Behnken试验对工艺条件进行优化,分析了所得杜仲叶精制多糖的分子量、单糖组成等理化性质及活化部分凝血酶原时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）、凝血酶时间（TT）等抗凝血指标。结果表明,料液比、提取时间、提取温度为关键影响因素,最优提取工艺条件为超声波功率130 W、提取温度49 ℃、微波功率200 W、料液比1:30（g:mL）、提取时间20 min。在此条件下,杜仲叶多糖的实际得率为4.02%±0.03%,与理论得率4.08%接近。所得杜仲叶精制多糖的重均分子质量（M_w）为1653 kDa,单糖组成及摩尔比为果糖37.3%、葡萄糖35%、N-乙酰-D氨基葡萄糖14.6%、半乳糖8.6%、阿拉伯糖4.4%。分析结果显示,杜仲叶多糖为β型酸性多糖。与阴性对照相比,杜仲叶多糖能极显著延长APTT（P<0.01）,而当杜仲叶多糖浓度为8 mg/mL时,PT、TT亦能极显著延长（P<0.01）,说明杜仲叶多糖主要通过内源性途径影响凝血系统,同时也能够通过外源性、共同途径来影响凝血过程。此研究可为我国丰富的杜仲叶资源的高值化开发利用提供理论依据和技术参考。     

杜仲叶发酵饮料的研制

以杜仲叶提取液、白糖、牛奶为主要原料,采用对比实验、正交实验找出最佳发酵工艺条件和配方,通过酵母菌、醋酸菌、乳酸菌发酵,开发出营养丰富,且具有一定疗效作用的天然保健饮料。      

响应面法优化杜仲叶中总多酚超声波辅助提取工艺研究

采用响应面法优化杜仲叶中总多酚超声波辅助提取工艺。考察了提取溶剂、液料比、提取时间、提取温度及提取次数对提取工艺的影响,在单因素实验分析的基础上采用Box-Benhnken中心组合进行4因素3水平的实验设计,以总多酚得率为响应值,进行响应面分析,建立二次多项回归数学模型,并优化提取工艺。结果表明杜仲叶中总多酚超声波辅助提取最佳工艺为:55%乙醇、液料比为25∶1mL·g-1、45℃下提取25min,提取两次,在此条件下,总多酚得率为4.678%。      

以绿原酸为目标物优化杜仲叶发酵醋的工艺研究

以绿原酸作为评价指标,以杜仲叶辅以麸皮和葡萄糖为原料进行发酵醋工艺研究。首先杜仲叶按料液比1∶10并添加叶干重质量0.8%的纤维素酶45℃预处理2h,获得绿原酸含量为592.1μg/mL的酶解液。然后添加与酶解液中叶干重相同的麸皮,调节杜仲叶-麸皮与水的质量体积比为1∶7,加入占发酵液体积10%的葡萄糖、占杜仲叶-麸皮质量1%的醋前发酵剂进行酒精发酵。最后接入占发酵液体积14%的醋酸菌进行醋酸发酵。按此工艺条件,得到的杜仲叶发酵醋中绿原酸含量为131.1μg/mL,总酸（以醋酸计）含量为4.9g/100mL,发酵醋色泽澄清,具备醋特有的香气,口感柔和,符合国家酿造食醋感官特性要求,DPPH自由基清除率达到97.3%,有较好的体外抗氧化效果。本实验为杜仲叶资源的开发提供了一种新思路,同时为杜仲发酵醋饮的酿造提供了技术依据。      

超声辅助法提取杜仲叶α-葡萄糖苷酶抑制剂

本研究用正交试验设计杜仲叶α-葡萄糖苷酶抑制剂的最佳提取工艺条件,考察了不同料液比、浸提时间以及浸提温度等条件对提取率的影响,并研究了杜仲叶提取物的d．葡萄糖苷酶抑制活性。通过研究发现,杜仲叶仪一葡萄糖苷酶抑制剂的最佳提取条件是：料液比I：10、浸提温度90℃、浸提时间40min、二次浸提加超声40min。在此条件下,所获得的杜仲提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制率最高,为34．8％。本研究为杜仲叶仅一葡萄糖苷酶抑制剂的提取和利用提供了一定的理论依据。     

超声波辅助提取杜仲叶总黄酮

通过单因素和正交试验,考察了料液比、超声波功率、提取时间和提取温度对杜仲叶总黄酮提取率的影响。结果表明:在料液比(g∶mL)1∶35、超声波功率80 W、提取时间20 min,提取温度50℃时,杜仲叶总黄酮提取率达8.45%。在缩短了提取时间和降低了能耗的同时,比常规水提和微波辅助水提杜仲叶总黄酮的提取率分别高0.96%和0.68%。     

杜仲叶提取物抗氧化作用与总黄酮含量的相关性研究

采用二苯代苦味肼基自由基(DPPH.)和铁离子还原/抗氧化能力(FRAP)测定法,研究了杜仲叶提取物,芦丁的抗氧化活性,并同VC进行了比较。结果表明杜仲叶提取物具较强的抗氧化能力,抗氧化能力与总黄酮含量密切相关,在一定浓度范围内成线性关系,对DPPH.有较强的清除作用,半抑制量EC50为0.022mg/mL,各样品清除DPPH.能力为:VC>芦丁>杜仲叶提取液;在FRAP模型中,对铁离子的还原能力强度顺序为VC>杜仲叶提取物>芦丁;杜仲叶提取物抗氧化速度小于VC大于芦丁。     

均匀设计法优化杜仲叶中绿原酸的提取工艺

目的:筛选杜仲叶中绿原酸提取最佳工艺条件.方法:采用均匀设计安排试验,以紫外吸光度为考察指标,数据经多元回归处理,建立绿原酸的定量评价方法.对杜仲叶中绿原酸提取工艺中影响效果的乙醇浓度、料液比、超声时间三因素及条件进行优化,根据回归方程并结合经验,优选绿原酸提取工艺的最佳实验条件.结果:选择乙醇浓度50%,超声时间50min,料液比1/30,超声频率40Hz,提取温度45℃为最佳条件,提取次数为4次.