多杀菌素的高效液相色谱法测定

采用高效液相色谱法对Saccharpolyspora spinasa发酵液中多杀菌素含量进行测定。本方法的相对标准偏差为0．11％。变异系数为0．15%．线性相关系数为0．99916．平均回收率为96.94％。     

高黏度头孢菌素C发酵液的超滤研究

利用新型的板式超滤系统对高黏度头孢菌素C发酵液进行了澄清实验研究,通过实验数据与现有系统的运行数据对比,该系统基本解决了目前国内头孢菌素C发酵液超滤提纯中存在的主要过滤问题.     

用D_2EHPA-煤油溶剂萃取分离L-异亮氨酸

本文研究了从发酵液中用D2EHPA－煤油溶剂萃取分离L－异亮氨酸工艺．考察了萃取时pH值、萃取剂浓度和异亮氨酸浓度对于异亮氨酸和缬氨酸的萃取分配比的影响．在计算机上进行回归，得到以下分配模型：当1≤pH≤3．5时lgDIle＝0．09906pH2＋0．8625pH＋2．2696lgCHR－0．09188lg2CIle＋0．1766lgCIle－1．366lgDrmVal＝－0．0293pH2＋0．550pH＋1．2659lgCHR－0．2420lg2CIle＋0．4549lgCIle－1．696用此模型，应用分馏萃取理论，进行逐级计算，求取了萃取工艺的主要参数，并在φ20mm的多级离心萃取器上对上述结果进行了验证．结果表明：当CHR浓度为1．5mol／L，相比V：L：L’＝2：1：2，N’＝3，N＝6时，异亮氨酸的收率达到90％以上，纯度＞99％．实验取得了较为满意的结果．     

丙型肝炎病毒多表位基因核酸疫苗的构建及其免疫原性

目的构建丙型肝炎病毒(HCV)多表位基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)-CtEm,用该重组质粒免疫BALB/c小鼠,并检测其免疫原性。方法用BamHⅠ和HindⅢ双酶切含有HCVC区、E2区模拟表位和NS3~NS5区细胞表位串联基因的原核表达载体pQE30-CtEm,克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-),脂质体瞬时转染CHO细胞,并检测其表达。以100μg重组质粒免疫BALB/c小鼠,检测其体液免疫和细胞免疫效果。结果所构建的真核表达载体pcDNA3.1(-)-CtEm在CHO细胞中能获得有效表达。该质粒免疫小鼠后可诱导高水平的抗体,特异性淋巴细胞增殖反应、IFN-γ水平及CTL活性均明显高于空载体和生理盐水对照组。结论已成功构建HCV多表位基因的真核表达载体pcDNA3.1(-)-CtEm,免疫小鼠后可诱导特异性体液免疫和细胞免疫应答。     

微生物降解原油发酵液中低分子量有机酸的测定

本文使用气-质联用仪对微生物降解原油发酵液中低分子量有机酸进行测定。采用水蒸汽蒸发法蒸出发酵液中低分子量有机酸，从而使其与样品中大量的无机盐和表面活性剂分离，浓缩后直接进样。该方法简单直接，可以减少有机酸的损失。     

磁场对膜分离土霉素发酵液性能的影响研究

研究了外加磁场对膜分离土霉素发酵液性能的影响,结果表明,外加磁场有助于提高膜通量,在外加磁场条件下,有利于改善膜分离效果.     

原料人血浆病毒核酸检测试剂适用性的评价

目的评价血液制品生产用原料人血浆病毒核酸检测试剂的适用性。方法常规ELISA法检测合格的18 636份原料血浆样本,分别采用cobas s 201系统的6份和96份样本混合筛查模式进行乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)、丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)、人免疫缺陷病毒(human immunode-ficiency virus,HIV)核酸筛查,对筛查到的反应性样本进行COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan HBV/HCV/HIV-1 test(简称CAP/CTM)核酸鉴别试验,评价不同混合筛查模式在实际检测中的适用性。结果 18 636份血浆样本中,6份样本混合筛查模式检测到12份反应性样本,96份样本混合筛查模式未检出反应性样本。CAP/CTM核酸鉴别试验结果表明,12份反应性样本中有6份检测到低浓度(20 IU/mL)HBV核酸,未检测到HIV、HCV核酸阳性样本。结论 96份样本混合筛查模式可有效检测到病毒核酸阳性样本,未发生高浓度病毒样本漏检,未检测到的低浓度样本可通过后续病毒灭活工艺进行有效灭活,不影响血液制品的安全性,且该筛查模式的检测通量更大,更适合用于原料血浆的常规核酸检测筛查。     

CpG-ODN对乙肝核酸疫苗及重组疫苗免疫效果的影响

目的研究CpG寡聚脱氧核苷酸(CpGODN)对乙肝核酸疫苗及重组(CHO细胞)疫苗免疫效果的影响。方法核酸疫苗实验组用CpGODN与乙肝核酸疫苗联合免疫BALBc小鼠,阳性对照组注射核酸疫苗,阴性对照组注射质粒pVAX1;重组疫苗分4个实验组,用CpGODN与不同剂量的重组疫苗配伍后分别免疫BALBc小鼠,阳性对照组注射重组疫苗,阴性对照组注射生理盐水。应用ELISA检测小鼠血清中的抗HBs水平。结果CpG与乙肝核酸疫苗组抗体阳转率比阳性对照组提高3倍,抗体水平提高2倍。CpG与重组疫苗组的阳转率和阳转时间均高于或早于CpG与核酸疫苗实验组。加入CpGODN后,即使重组疫苗用量减少3倍,诱导抗体水平和阳转率均无明显改变。结论CpGODN可提高乙肝核酸疫苗和重组疫苗的免疫效果,并使抗体产生的时间提前。     

发酵液的组成对纳滤分离谷氨酰胺的影响

研究了谷氨酰胺发酵液中盐离子对纳滤分离提取谷氨酰铵的作用，系统地考察了操作温度和发酵液组成对纳滤分离透过特性的影响，确定了纳滤分离时发酵液最佳稀释倍数和操作温度. 结果表明，二价阳离子通过改变膜面电荷密度对谷氨酸的透过特性产生很大影响，使其截留率降低了8%. 发酵液中较高浓度的(NH4)2SO4使谷氨酸和谷氨酰胺的截留率和透过通量明显降低，但较高浓度的NH4Cl影响较小，这体现了纳滤膜对不同离子排斥力的差异. 当发酵液稀释至谷氨酰胺浓度为1%，pH调至7时，发酵液中的其它盐离子和残糖因浓度较低而对纳滤分离影响不显著.     

猪流感复合多表位核酸疫苗的构建及其表达研究

目的构建猪流感病毒复合多表位核酸疫苗,并研究其表达产物的抗原性。方法以H3、H9亚型流感的HA抗原表位及流感病毒的其它主要抗原(NP、NA、M)表位基因为基础,再附以Kozak序列和适当的酶切位点,设计并合成一段长765bp的复合多表位基因(Epi),其中各表位基本独立,将其克隆入真核表达载体pIRES1neo,构建重组质粒pIRE-Epi。将多表位抗原基因Epi插入到融合表达基因H57中,构建重组质粒pIRE-H57-Epi。将构建的重组质粒在Hela细胞中表达,并用免疫荧光方法初步检测所表达蛋白的抗原性。结果所构建的融合表达载体pIRE-Epi和pIRE-H57-Epi,在Hela细胞中表达出流感病毒多表位抗原蛋白,并具有抗原性。结论已成功构建猪流感病毒多表位基因,有可能成为较理想的猪流感候选疫苗。