基于在位光还原银胶法的核酸碱基快速检测

核酸遗传物质是蛋白质合成过程中关键环节,对生物遗传和变异起着关键性作用。核酸碱基多样性特点决定了碱基反应性能,进而发生生物进化和衰老。组合核酸碱基能够得到足够多的信息,是形成高分子生物物质的基础。因此,提出了基于在位光还原银胶法的核酸碱基快速检测。制备表面增强拉曼光谱常规基底,准备核苷酸、核苷、碱基实验材料。制备核酸碱基、硝酸银溶液、银胶溶液和银膜,测量拉曼光谱。使用激光诱导获取银基质,利用NaClO_4分子的Cl-O键振动作为内标,分析在位光还原合成银胶法增强光谱效果。由分析结果可知,该方法可以获得高信噪比的表面增强拉曼光谱,且具有良好稳定性,在核酸碱基低浓度检测方面具有实用价值。     

外源RNA促进小鼠肠腺辐射损伤恢复的研究

ＢＡＬＢ／ ｃ小鼠１０４０ｃＧｙ＾６０Ｃｏγ射线腹部照射后，采用不同一源的ＲＮＡ、不同的注入剂量、途径、时间和次数等因素，研究外源ＲＮＡ对空肠肠腺存活率的影响。结果表明（１）不同来源的ＲＮＡ均可明显提高受照小鼠的腺存活率。（２）酵母ＲＮＡ的洲入剂量与肠腺存尖率之间呈一钟形曲线，局部肠腔注入的最适剂量为４０－６０μｇ／小鼠，腹腔和肌肉注入时为８０μｇ／小鼠。     

突变型P53特异性活化T细胞的诱导与扩增

采用多种细胞因子诱导外周血单核细胞分化为成熟的树突状细胞（DC,Dentritic Cell）,将成熟DC与初始T细胞共培养,并连续加入DC刺激从而避免活化的T细胞凋亡。将活化的T细胞转入包被有CD3和CD28抗体的板中,使活化T细胞进一步大量扩增。流式检测多因子诱导后DC表型发现,高表达CD83、CD11c、CD11b、CD80、CD86、CCR7、CD54,低表达CD14、CD3、CD33,说明因子成功诱导单核细胞为成熟DC。流式检测扩增的活化T细胞发现高表达CD3、CD8,含有很低量的调节性T细胞（Treg）,分泌大量的IFN-γ,表明扩增出的细胞中活化T的含量很高,为临床研究提供参考。     

核酸适配体传感器在血小板衍生生长因子检测中应用进展

血小板衍生生长因子(Platelet Derived Growth Factor, PDGF)是一种低分子量碱性蛋白质,其中PDGF-BB亚型是诊断和识别癌症的重要生物标志物蛋白,与多种疾病的诊断相关,包含肝纤维化、动脉粥样硬化、老年性黄斑变性和糖尿病性眼病等。同时,PDGF-BB是一种具有多种生物学功能的细胞因子,被公认为伤口愈合和组织修复的药物。传统的PDGF-BB检测方法包括酶联免疫吸附法等在内的方法存在耗时长、成本高、仪器复杂等不足,限制了其实际应用。近年来,核酸适配体传感器以其高特异性、高灵敏度、低成本、响应速度快等优点在PDGF-BB检测方面引起科学家们越来越多的关注。综述了近年来检测PDGF-BB的核酸适配体传感器研究进展,以期为今后基于核酸适配体的PDGF-BB生物传感检测方法的设计提供参考。     

混合表面活性剂介质中微量核酸的光谱测定

健那绿（Janus Green B,JGB）与核酸形成离子性缔合物增溶于混合非离子性表面活性剂中,导致吸光度降低,降低程度与加入的核酸浓度成线性关系,在最佳反应条件下,小牛胸腺DNA（ctDNA）、鱼精子DNA（fsDNA）及酵母RNA（yRNA）的线性范围分别为0．0～4．2μg／mL,0．0～2．4μg／mL及0．0～1．9μg／mL,检测限分别为ctDNA：57ng／mL,fsDNA：96ng／mL及yRNA：42ng／mL,用双倒数直线方程求出各种核酸与JGB的结合常数,均为10^4数量级,本法已用于实际样品分析。     

治疗性HIV-1重组DNA疫苗的构建与免疫效果评价

目的　构建编码HIV- 1多表位抗原基因 (MEG)与p2 4基因嵌合的核酸疫苗 ,并评价其免疫效果。方法　将编码HIV -1多表位抗原基因 (MEG)与p2 4基因插入到真核表达载体pVAXI中 ,构建HIV- 1治疗性重组核酸疫苗质粒。通过ELISA试剂盒检测免疫恒河猴血清中HIV -1特异性抗体 ,并通过淋巴细胞转化实验检测HIV -1特异性T淋巴细胞增殖反应。结果　构建的重组核酸疫苗质粒pVAXI -MEGp2 4免疫恒河猴后 ,能有效地刺激产生T淋巴细胞特异性增殖反应 ,并诱导产生抗HIV -1特异性抗体。结论　所构建的重组核酸疫苗质粒能诱导机体产生免疫反应。     

CpG-ODN对乙肝核酸疫苗及重组疫苗免疫效果的影响

目的研究CpG寡聚脱氧核苷酸(CpGODN)对乙肝核酸疫苗及重组(CHO细胞)疫苗免疫效果的影响。方法核酸疫苗实验组用CpGODN与乙肝核酸疫苗联合免疫BALBc小鼠,阳性对照组注射核酸疫苗,阴性对照组注射质粒pVAX1;重组疫苗分4个实验组,用CpGODN与不同剂量的重组疫苗配伍后分别免疫BALBc小鼠,阳性对照组注射重组疫苗,阴性对照组注射生理盐水。应用ELISA检测小鼠血清中的抗HBs水平。结果CpG与乙肝核酸疫苗组抗体阳转率比阳性对照组提高3倍,抗体水平提高2倍。CpG与重组疫苗组的阳转率和阳转时间均高于或早于CpG与核酸疫苗实验组。加入CpGODN后,即使重组疫苗用量减少3倍,诱导抗体水平和阳转率均无明显改变。结论CpGODN可提高乙肝核酸疫苗和重组疫苗的免疫效果,并使抗体产生的时间提前。