高效液相色谱法检测牙鲆体内的生物胺

采用高效液相色谱(HPLC)法测定了牙鲆体内的多种生物胺.以邻苯二甲醛(OPA)为柱后荧光衍生剂,通过Capcell Pak MG C18色谱柱的梯度洗脱,将酪胺、腐胺、尸胺、组胺、胍丁胺、亚精胺和精胺等7种生物胺进行良好分离.测试结果表明,7种生物胺在0.05～30mg/L的范围内线性良好,相关系数都在0.999以上...     

微生态制剂对牙鲆幼鱼蛋白酶和生长的影响

试验采用正交实验的方法,确定了微生态制剂的使用方式、使用间隔时间、不同菌种的比例和使用浓度的最佳方案,以提高效率、降低成本。结果表明,微生态制剂能显著提高牙鲆幼鱼消化道的蛋白酶活性。同时在水中和饲料中使用微生态制剂,可以在短时间内大幅度提高牙鲆幼鱼消化道蛋白酶活性,最佳方案是投水兼投喂、间隔1周、1芽∶10乳、浓度为1×105个/m l;养殖水体换水频率较高时,可采用这种方案。对于换水频率较低的养殖水体,最佳方案是只在水中使用、间隔1周、10芽∶1乳、浓度为1×105个/m l。微生态制剂对牙鲆幼鱼的生长有显著的促进作用,试验组的平均体重比对照组高出26.86%。     

“多宝鱼”抗体疫苗有望面世

能够有效预防包括“多宝鱼”在内的“海鱼细菌病多联抗独特型抗体疫苗”成果转化工作取得实质性进展。由解放军第四军医大学和北京卓越海洋生物科技有限公司共同研发的针对牙鲆鱼的“海鱼细菌病多联独特型抗体疫苗”目前正在申请国家农业部的《新兽药注册证书》。     

牙鲆和贝类混养池塘中氮、磷收支的研究

对在不同混养(牙鲆Paralichthys olivaceus、缢蛏Sinonovacula constricta、文蛤Meretrix meretrix)模式下的氮、磷收支情况进行了研究。结果表明:饵料是池塘氮、磷的主要来源,分别占氮总输入的71.6%～87.1%和磷总输入的67.0%～79.3%;由海水带入的氮和磷占氮、磷总输入的10.9%～14.6%和17.0%～20.2%;在氮、磷支出中,收获的养殖生物分别占氮、磷总输入的20.4%～34.1%和15.5%～24.8%,沉积物为氮、磷支出的主要途径,各占氮、磷总输入的69.6%～73.4%和86.7%～93.5%;3种模式下对氮、磷的利用率分别为9.8%～31.1%和5.6%～24.3%。本试验中的最佳养殖模式为牙鲆(小规格鱼)-缢蛏(小规格,高密度),该混养模式产量高,对氮、磷的利用率高,污水排放少。     

蛋白质限制后恢复投喂对牙鲆幼鱼代谢的影响

在(23.0±0.5)℃条件下对牙鲆Paralichthys olivaceus幼鱼(体重62.33 g±9.13 g)进行了蛋白质限制后恢复投喂的代谢实验。实验用3种饲料P30、P40、P50,粗蛋白质含量分别为27.95%、40.47%、50.00%(湿重),处理组T30和T40继分别投喂P30和P40饲料15 d后恢复投喂P50饲料5 d;对照组连续投喂P50饲料15 d。结果表明:蛋白质限制期间,T30和T40组牙鲆幼鱼的代谢率均显著低于对照组(P<0.05),恢复投喂1 d各处理组的代谢率恢复至对照组水平;蛋白质限制期间各处理组牙鲆幼鱼的排氨率显著低于对照组(P<0.05),恢复投喂1 d各处理组的排氨率仍显著低于对照组(P<0.05),恢复投喂5 d后恢复至对照组水平。     

牙鲆促性腺激素释放激素基因cGnRH-II和sbGnRH的克隆与表达特征分析

采用RACE和RT-PCR方法,从牙鲆脑组织中克隆获得了两种牙鲆促性腺激素释放激素cGnRH-II(DQ008580)和sbGnRH(DQ074693)的cDNA全基因序列,其长度为607 bp和395 bp,分别编码85和98个氨基酸的GnRH前体,均包含一个信号肽、具有活性的GnRH十肽和一个由蛋白水解位点(Gly-Lys-Arg)连接的GnRH相关肽.氨基酸同源性比较表明,牙鲆促性腺激素释放激素cGnRH-II与其他鱼类的cGnRH-II基因有较高的同源性,如与鲽科鱼类条斑星鲽的相似性为97.6%,但与哺乳类、爬行类和两栖类动物的同源性较低;sbGnRH与条斑星鲽的相似性为86.7%.采用RT-PCR方法分析了两种GnRH基因在成熟牙鲆个体中的表达,结果表明该两基因在脑区、垂体和性腺中皆有表达,但sbGnRH基因的体内表达部位稍多于cGnRH-II.     

饲料中维生素C和β-葡聚糖对牙鲆免疫力和抗病力的影响

以初始体重为(40.5±1.0)g的牙鲆幼鱼为实验对象,在室内水循环系统中进行了为期12周的饲喂实验,探讨了饲料中不同含量的维生素C和β-葡聚糖对牙鲆免疫力和抗病力的影响.结果表明,当不添加β-葡聚糖时,维生素C显著提高了牙鲆替代途径补体活力(ACH50)(P＜0.05),但维生素C对牙鲆溶菌酶、呼吸爆发活力、感染爱德华氏菌后开始死亡的时间和7d内的累积死亡率并没有显著影响(P＞0.05).当不添加维生素C时,牙鲆血清ACH50随着β-葡聚糖的添加而显著升高(P＜0.05);当饲料维生素C含量为1.0 mg/kg和495.0 mg/kg时,β-葡聚糖缺乏组的呼吸爆发活力显著低于添加β-葡聚糖实验组(P＜0.05);当饲料中维生素C含量为495.0 mg/kg和1980.0 mg/kg时,高水平的β-葡聚糖(0.6%)显著延缓了牙鲆感染爱德华氏菌后的死亡时间,并降低了感染细菌后7d内的累积死亡率(P＜0.05).以上结果对于牙鲆饲料中免疫增强剂的开发具有理论指导价值.     

牙鲆第10腹椎骨与微卫星标记的相关性分析

利用94对微卫星标记,对52尾双单倍体牙鲆Paralichthys olivaceus第10腹椎骨的长度和高度与微卫星标记的相关性进行分析。结果表明:微卫星标记Poli1222TUF、Poli1418TUF、Po1、Po91、Poli1498TUF、Poli11795TUF与第10腹椎骨长显著相关(P<0.05);Poli1406TUF与第10腹椎骨高显著相关(P<0.05);Poli1143TUF、Poli1356TUF和Poli1388TUF则与第10腹椎骨长和骨高均显著或极显著相关(P<0.05或P<0.01)。研究表明,这些标记可以作为牙鲆辅助育种的参考。     

牙鲆体质量和形态性状异速生长的遗传分析

为了对牙鲆Paralichthys olivaceus进行品种选育,运用联合异速生长尺度模型,对牙鲆多个部分体大小相对整体体大小的异速生长进行了遗传分析。结果表明:体长、头长、尾柄长、体高、尾柄高5个形态性状相对体质量的异速生长遗传力为0.251⁰.755,除尾柄长和尾柄高的表型相关为正值外,其余性状的表型相关均为负值;而相对体长的异速生长中,除了尾柄高的遗传力很高(0.871)外,大多数形态性状表现为中等遗传力,且这些异速生长尺度的遗传相关大多数为负值。本研究对牙鲆形态性状相对于体质量和体长的遗传参数分析结果可为牙鲆的品种选育提供一定的理论基础。     

胶原酶消化法纯化牙鲆淋巴囊肿病毒(Lymphosystis Disease Virus China,LCDV-cn)

先后采用各种胶原酶和疏水性制剂,消化、水解病鱼囊肿细胞中带状包涵体外围的胶原蛋白和糖蛋白。经过设计蔗糖密度梯度离心条件,成功分离出了大量的LCDV-cn粒子,并最终建立起一套较完备的、分离纯化LCDV-cn的方法。