血清中抗水痘病毒IgG抗体的检测方法

水痘是由水痘-带状疱疹病毒引起的一种疾病,主要见于儿童,在人群中具有极高的感染率。IgG是机体感染水痘后产生的两种主要中和抗体之一,检测血清中水痘IgG抗体在水痘血清流行病学研究、水痘疫苗的免疫效果评价、临床诊断等方面具有重要意义。本文主要对检测血清中水痘IgG抗体敏感性和特异性较高的膜抗原荧光抗体法、酶联免疫吸附法、间接免疫荧光抗体法、免疫吸附血凝试验法、补体扩大中和试验法和放射免疫法作简要介绍。     

Serratia marcescens非特异性核酸内切酶的原核表达及其应用

目的在大肠杆菌中表达Serratia marcescens非特异性核酸内切酶(SMNE),并进行纯化、活性检测及应用。方法合成smne基因,应用PCR技术在基因的5′端引入6个组氨酸标签序列,将其插入分泌表达载体pET-20b(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,IPTG诱导表达。表达产物经镍离子螯合琼脂糖凝胶一步纯化后,检测其活性并计算比活。将纯化的SMNE用于重组腺病毒的制备,对外源性核酸进行降解,并采用Southern blot对外源性DNA残留量进行测定。结果重组表达质粒pET-20b-smne经PCR、双酶切和测序证明构建正确。重组蛋白的表达量为8.0 mg/L,纯化后纯度达95%,比活达1.1×106 U/mg。在重组腺病毒制备过程中使用后,成品中的外源性DNA残留量≤10 ng/5.0×1011 VP。结论已成功地在大肠杆菌中表达了SMNE,纯化的SMNE活性高,有望应用于重组生物制品制备过程中外源性核酸的去除。     

特发性非特异性间质性肺炎的光镜和电镜观察

目的：观察特发性非特异性间质性肺炎(INSIP)的显微和超微结构特点以及与肺纤维化发生的关系。方法：对7例INSIP患者经电视胸腔镜(VATS)取肺病理活检组织进行光镜和透射电镜观察。结果：光镜观察肺间质呈不同程度的炎症和纤维化,浸润的细胞主要是淋巴细胞和浆细胞。电镜观察查见Ⅱ型肺泡上皮增生,基底膜增厚,肺泡中隔内纤维细胞增生和胶原纤维沉积,淋巴细胞、浆细胞和巨噬细胞浸润,肥大细胞脱颗粒;纤维化型有明显的平滑肌和肌纤维母细胞增生。结论：INSIP以成熟的纤维细胞增生为主,多种细胞成分参与了肺纤维化的发生过程。     

呋喃它酮代谢物的可视化免疫亲和凝胶柱检测分析

为了建立一种用于检测动物源性食品中呋喃它酮代谢物(AMOZ)的可视化免疫亲和凝胶柱检测方法,利用对醛基苯甲酸(CPA)对AMOZ进行衍生处理得到衍生物CPAMOZ,制备CPAMOZ完全抗原,并通过免疫小鼠获取CPAMOZ多克隆抗体,使用间接ELISA法对抗体的效价及特异性进行测定。实验采用恒温振荡法将溴化氰活化的琼脂糖凝胶分别与CPAMOZ抗体、HRP抗体偶联制得CPAMOZ抗体胶和HRP抗体胶,作为亲和凝胶柱的检测层与质控层。建立AMOZ可视化免疫亲和凝胶柱分析方法,确定了该方法在酶标抗原的稀释倍数为5000、HRP胶稀释20倍、CPAMOZ抗体胶稀释15倍的条件下,达到最佳工作状态。实验结果表明CPAMOZ多克隆抗体效价为1:64000,IC_(50)值为2.19μg/L,具有良好的灵敏度及特异性。建立的AMOZ可视化免疫亲和凝胶检测柱方法检测限为4μg/L,动物源实际样品中AMOZ的检测限为2μg/kg。该方法快速便捷,符合我国高通量筛选食品中AMOZ的要求。     

蛋氨酸特异性合成途径关键酶——高丝氨酸O-酰基转移酶的研究进展

在蛋氨酸生物合成过程中,蛋氨酸特异性合成反应的第一步是高丝氨酸酰基化,由高丝氨酸O-酰基转移酶催化,生成酰基高丝氨酸。高丝氨酸O-酰基转移酶受到末端产物蛋氨酸和S-腺苷蛋氨酸的反馈抑制和反馈阻遏,且高温下极易失活,严重影响碳流流向蛋氨酸,是蛋氨酸生物合成的关键酶,因此对高丝氨酸O-酰基转移酶的研究和改造具有重要意义。但目前关于高丝氨酸O-酰基转移酶的改造和研究较少,在微生物代谢途径中,碳流不能过多流入蛋氨酸合成途径,制约了微生物过量积累蛋氨酸,阻碍了发酵法生产蛋氨酸的工业进程。本文简述了高丝氨酸O-酰基转移酶在蛋氨酸生物合成途径中的作用,在介绍该酶的结构、催化机制和研究现状的基础上,提出该酶在反馈抑制和提高稳定性方面的分子改造策略。     

基于特异性基因的副溶血性弧菌快速分离鉴定

副溶血性弧茵(Vibrio parahaemolyticus)是海洋环境中常见的食源性致病菌.采用自行设计的改良初筛方案结合tlh、toxR这2种特异性基因的2次筛选开发了一种副溶血性狐菌的快速分离鉴定方法.应用该法从海水、海泥及3种海产品中分离得到了19株副溶血性孤菌,再经16S rDNA测序对分离鉴定结果的特异性进...     

巨成钛业在上海股权托管交易中心挂牌

<正>5月27日,宝鸡市巨成钛业有限责任公司在上海股权托管交易中心中小企业股权报价系统正式挂牌,成为宝鸡市首家在该中心挂牌的民营钛企业,同时也是宝鸡市第5家在该中心挂牌的中小企业。宝鸡市副市长丁琳、市政协副主席王虎贤出席挂牌仪式。据了解,宝鸡市巨成钛业有限责任公司成立于2004年5月,主要从事有色金属设备制造,有色金属材料及制品的加工、开发、销售。其研发生产的高性能特异性钛铜复合棒材等多种专利产品畅销国内外。经过多年努力,公司     

化疗后粒细胞缺乏与患者特异性危险因素的相关探讨

目的:探讨白血病患者化疗后出现粒细胞缺乏的相关特异性危险因素。方法:随机抽选2014年1-12月本院收治的138例急性白血病患者作为研究对象。对其两次化疗后的粒细胞缺乏情况以及相应的特异性危险因素情况进行统计、分析和比较。结果:138例患者共276次化疗,粒细胞缺乏总发生率明显高于粒细胞缺乏总未发生率。年龄≥60岁、首次化疗有粒细胞缺乏、肿瘤分期Ⅲ~Ⅳ期以及食欲下降患者的粒细胞缺乏发生率均明显高于年龄<60岁、首次化疗无粒细胞缺乏、肿瘤分期Ⅰ~Ⅱ期以及食欲良好患者的粒细胞缺乏发生率,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:白血病患者经过化疗后出现粒细胞缺乏症与年龄、既往史、肿瘤分期及食欲下降有关。     

深圳市福田区健康人群风疹抗体水平及疫苗免疫效果观察

目的了解福田区健康人群风疹抗体水平和风疹疫苗(RM)的免疫效果。方法对部分健康人群及接种风疹疫苗的婴儿采用ELISA检测风疹IgG抗体。结果433人中抗体阳性328人,阳性率75.8%,几何平均滴度(GMT)1∶40.1。以2～20岁抗体阳性率最高(88.5%～95.5%)。接种风疹疫苗的1岁儿童56人,免疫成功率为94.6%。结论风疹疫苗具有良好的免疫效果。