基于毛细管电泳的双酚E与血清白蛋白行为成像

目的 建立双酚E（BPE）与血清白蛋白相互作用快速评价方法,为双酚类化合物毒理效应研究提供有益参考。方法 使用毛细管电泳仪,应用外标Hummel-Dreyer（HD）法,测定了体外环境中BPE与血清白蛋白相互作用电泳图。采用非线性方程、Scatchard方程和Klotz方程三种函数形式分析实验数据,获得体系的相互作用参数。结果 三种不同函数形式所得到的拟合参数具有较高的一致性。BPE与血清白蛋白结合比约为2,相互作用参数表明牛血清白蛋白及人血清白蛋白的结合反应存在相似的结合位点数,且结合稳定。不同白蛋白与BPE的相互作用相似,均为非共价相互作用。结论 外标HD法作为一种简便有效的方法可以快速评价蛋白质-污染物相互作用相关问题。BPE与不同血清白蛋白具有相似的温和相互作用,这提示双酚类化合物在人体中和牛中可能具有类似的污染分布规律。     

利用蛋白质"指纹"技术鉴定加拿大啤酒大麦的品种和纯度

开发了操作简便、电泳图谱清晰、分辨率高的啤酒大麦种子醇溶蛋白SDS—PAGE电泳方法，利用Gel—Pro软件对电泳图谱进行条带分析和比较，建立了每个品种的蛋白质“指纹”，组成加拿大啤酒大麦品种标准图谱库。利用Cross Checker2．8和MEGA3软件对供试啤麦品种进行遗传聚类分析，结果与传统分类相近。进行了人工混种试验，并成功将该技术应用于公司2004年进口加拿大啤麦的品种和纯度鉴定。     

碱性蛋白酶限制性酶解乳清浓缩蛋白成胶特性的研究

研究了利用碱性蛋白酶限制性酶解乳清蛋白对其凝胶特性、成胶温度、凝胶粒径和蛋白组分水解情况的影响,结果表明,酶解可以提高乳清蛋白的凝胶特性,在酶解70min时达到最大值,此时乳清蛋白的水解度为7．22％,当酶解时间超过70min后随着水解时间的延长凝胶特性略有下降;各水解时间点乳清蛋白成胶温度均为80℃;酶解后乳清蛋白凝胶的粒径值下降了90％以上,且酶解30min后形成的凝胶粒径值都在50um以内;在碱性蛋白酶的限制性酶解作用下,仅部分β-乳球蛋白和很少部分牛血清白蛋白被酶解,而大部分α-乳白蛋白被酶解。     

金属丝网型La0.8Sr0.2MnO3催化剂对有机废气催化燃烧的特性

以316L不锈钢丝网为载体,采用电泳沉积法和热处理技术在丝网表面包覆一层具有高粘结强度和较高比表面积的表面Al_2O_3/Al粘合层,再利用湿浸涂技术在丝网表面负载纳米钙钛矿型稀土复合氧化物La_(0.8) Sr_(0.2)MnO_3催化剂。以甲苯、二甲苯和丙酮的催化燃烧反应为模型反应,考察了催化剂的催化性能和反应特性.结果表明,La_(0.8) Sr_(0.2) MnO_3催化剂在丝网表面具有较强的粘结强度,在强放热反应中具有传热速率快,催化剂床层整体均温性好的特性,具有较好的催化燃烧活性和稳定性.     

蓝色电泳微胶囊的制备条件对其形态的影响

以尿素和甲醛为壁材,油性蓝和TiO2纳米粒子分散在四氯乙烯中作为囊芯,通过原位聚合法制备了蓝色电泳显示微胶囊。研究了电泳微胶囊制备时的预聚和缩聚条件对微胶囊形成和产品形态的影响,并通过设计正交实验得到了最优化的预聚条件,优化条件:脲∶甲醛(摩尔比)为1∶1.75;反应温度75℃;pH值8.5;反应时间1 h,以最优化的预聚条件制备出的预聚体作为反应物进行缩聚反应制备出的蓝色电泳微胶囊内外表面光滑,囊壁透明,分散性好且形态完整。     

毛细管电泳法手性拆分橙皮苷对映体

通过考察电泳缓冲液pH、环糊精种类和浓度、有机溶剂浓度及操作电压和温度对分离的影响,建立了一种简便快捷的高效毛细管电泳拆分橙皮苷对映体的方法。实验结果表明,以12mmol/L的羟丙基-β-环糊精为手性选择剂,200mmol/L的硼酸/甲醇(V:V=7:3,pH9.7)为电泳缓冲溶液,23kV的分离电压,在30℃下可使橙皮苷对映体达到基线分离,分离度为1.50。分析方法快速简单。     

大豆胰蛋白酶抑制剂的分离纯化

采用盐析、等电点沉淀、DEAE-Cellulose-32离子交换柱层析纯化大豆胰蛋白酶抑制剂,电泳测定其相对分子量为20.1 ku,BAEE(苯甲酰-L-精氨酸乙酯)法测定抑制比为0.9:1.纯化后的SBTI(大豆胰蛋白酶抑制剂)可以作亲和层析纯化丝氨酸蛋白酶的配基.     

毛细管电泳检测发酵液中1,3-二羟基丙酮方法的建立

建立了利用毛细管电泳(CE)技术快速、准确检测发酵液中1,3-二羟基丙酮含量的新方法。所用熔融石英毛细管规格为50μm×60 cm(有效长度为45 cm),分离电压为24 kV,缓冲液为pH9.5的30 mmol/L硼砂缓冲溶液,200 nm处检测DHA。结果表明,DHA标准样品的迁移时间为8.3 min,在100μg/mL～1 000μg/mL范围内线性关系良好(R2=0.999 5),加样回收率为97.79%,RSD为1.81%。测得以甘油作为底物发酵产DHA发酵液中DHA含量为3.220g/L,此方法可有效应用于产DHA发酵过程中产物的检测。     

用毛细管电泳检测牦牛、犏牛和藏黄牛乳中β-乳球蛋白的三种遗传变异体

利用毛细管电泳(CE)分离牛乳中β-乳球蛋白(β-Lg)的三种遗传变异体,为牛乳的质量监控提供方法。分别制备牦牛、犏牛和藏黄牛乳清,用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和CE分析乳清蛋白。结果表明,CE法与PAGE法都能有效分离β-Lg的三种遗传变异体;在牦牛乳中加入不同比例的犏牛乳,用CE法可检测到的犏牛乳最低添加比例约为5%,线性关系好。另外,对藏黄牛杂合型β-Lg的两种遗传变异体分析显示,CE法比PAGE法能更准确对β-Lg A和β-Lg B的相对比例进行分析。本研究结果表明,CE方法能对乳中β-Lg的三种遗传变异体进行有效分离和定量分析,在牦牛乳的质量监控方面具有潜在的应用价值。     

高效毛细管电泳法测定奶制品中三聚氰胺含量

目的：建立奶制品中三聚氰胺的含量测定方法。方法：采用高效毛细管电泳法测定,以30mmol/L 磷酸盐缓冲液(pH5.0)为电泳介质,未涂层石英毛细管(75μm× 78cm,有效长度70cm)为分离通道,紫外检测波长240nm,分离电压10kV。结果：三聚氰胺在10.0～50.0μg/mL 范围内线性关系良好,r=0.9992。平均加标回收率为97.04%,平均RSD 为1.24%(n=3)。结论：该方法快速简便、灵敏度高、重现性好,可用于奶制品中三聚氰胺含量的测定。