小鼠核糖核酸酶抑制剂异源高效可溶性表达、纯化及活性研究

为获得高效可溶性表达的小鼠核糖核酸酶抑制剂(MRNI),本文通过构建含SUMO、IF2、GST、NusA、MsyB、Trx和 MBP融合标签的重组表达载体,以大肠杆菌BL21(DE3)作为宿主菌进行自诱导(auto-induction,AI)表达,利用MagNi磁珠检测及电泳分析MRNI的表达状况,并对其培养温度及时间进行优化,同时,与其他公司核糖核酸酶抑制剂(RI)活性进行对比。结果表明,重组菌BL21(DE3)(pNBEⅡ-MRNI)诱导表达的可溶性融合蛋白IF2-MRNI的产量最高,最适诱导条件为37 ℃,诱导培养6 h,20 ℃培养24 h。磁珠纯化后获得的融合蛋白IF2-MRNI浓度为3621.3 mg/L,检测其酶活性约为40 U/μL。该酶具有抑制RNase A活性,防止RNA被降解的作用,为RI的生产及应用提供理论基础。     

基于葡萄糖仪和DNAzyme检测L-组氨酸

研究了一种利用DNAzyme和磁珠以及葡萄糖仪测定L-组氨酸的新方法。首先,将DNAzyme固定在磁珠表面,以基质DNA修饰转化酶-金纳米粒子为探针,通过DNA杂交作用,将探针固定在磁珠表面。当有目标物L-组氨酸存在时,L-组氨酸与DNAzyme发生识别作用,将基质DNA切割,导致探针脱落,然后将脱落的探针溶液中加入果糖,在探针表面转化酶的作用下,将果糖转化为葡萄糖,利用葡萄糖仪为检测仪器,实现对L-组氨酸的测定。方法的检测限为0.08nmol·L-1,另外,该方法对L-组氨酸的测定表现出了良好的选择性。     

微流控生物芯片的磁场仿真及实验对比

近年来,随着生物医学分析和MEMS技术的发展,基于纳米磁珠的微流控生物芯片得到了广泛关注和研究.芯片上的微流路内部集成了微磁场元件,可在外磁场的作用下产生局部梯度磁场,从而将具有特定生物活性的纳米磁殊流捕获,实现后续的生物医学分析.为了有效的捕获磁珠,微磁场元件的外形结构需精心设计,才能产生足够高的磁场强度和磁场梯度.本文利用仿真软件COMSOL(Femlab)对所设计的不同外形的微磁场元件的磁场分布情况进行了仿真分析,随后的在片实验结果与仿真结果吻合得很好.     

电流密度对叠层片式磁珠的电镀效果的影响

以2012型的叠层片式磁珠作为研究对象,研究分析了电镀过程中电流密度对磁珠的镀层形貌、显微结构及电性能一致性的影响。结果表明,当镀Ni电流较小时,Ni层易附着在磁体端银上扩散,影响产品的外观。当镀Sn电流较大时,Sn层晶核在磁体表面迅速形成并快速生长,出现Sn层的严重扩散。配合采用较大镀镍电流(10 A)和较小镀锡电流(6 A)有利于防止端头镀层的扩散,改善产品外观形貌、并有助于提高阻抗一致性。     

端面不透光的PDMS微柱阵列制备与图像处理方法研究

细胞可对外界施加力的作用，从而感知外界环境并做出力学响应。聚二甲基硅氧烷（PDMS）微柱阵列被广泛应用于细胞力测量，通过测量微柱顶面在细胞力作用下的位移量，获得细胞力的大小及方向。然而，由于PDMS微柱的高透明度，当利用明场显微图像进行图像处理计算微柱位移量时，提取微柱端面质心的算法较为复杂。提出了一种利用磁珠修饰微柱端面使其不透光的方法，以降低图像处理算法复杂度，同时提高微柱位置的识别精度。磁珠在外界磁场作用下被引入模具，向模具中浇铸PDMS后，得到端面嵌有磁珠的不透光PDMS微柱。修饰过后的微柱，其端面会在倒置显微镜下形成实心圆形图案，可以直接用regionprops函数计算出实心圆形图案的质心；未经修饰的微柱，在倒置显微镜下形成环形图案，需要用运算更为复杂的霍夫变换来计算环形图案质心。实验结果表明:该PDMS微柱修饰方法能使微柱端面与基底的对比度得到很大提高，因此在提取端面质心时，不需要用到霍夫变换，减小了图像处理中算法的复杂度，并且提高了微柱定位的精度。     

用磁珠富集法快速制备银鲫微卫星标记

将磁珠富集法和用γ-32P标记的放射性探针法相结合,快速制备银鲫Carassius auratus gibelio微卫星。用限制性内切酶MboI对银鲫完整基因组DNA酶切,用不同蔗糖浓度梯度离心收集400⁹00 bp大小的片段,连接Brown接头,构建银鲫全基因组文库。用生物素标记的(CA)16寡核苷酸探针进行筛选,磁珠富集含有微卫星的DNA单链序列;对DNA模板进行PCR扩增,连接pMD18-T载体,转入用CaCl2制备的感受态大肠杆菌Escherichia coliDH5α中,得到微卫星序列文库;经用同位素γ-32P标记的探针(CA)16二次筛选,获得235个阳性克隆,对其测序,得224个含微卫星序列,完美型、非完美型、复合型序列分别占总数的52.8%、28.7%、18.5%。除探针中使用的(CA/GT)n重复单元外,还观察到(GA/CT)n、(ACTC)4的重复序列。设计163对引物,选择合成30对引物,经聚丙烯酰胺凝胶筛选,9对可以获得清晰条带,其中3对为单态,6对为多态。     

ASTAR MP-120核酸自动提取仪的原理及应用

ASTAR MP-120核酸自动提取仪是应用广泛的核酸提取仪.本文简要介绍了ASTAR MP-120核酸自动提取仪的原理,系统组成及应用于提取人全血基因组DNA、提取植物基因组DNA、提取血清病毒HBV DNA的实例.为ASTARMP-120核酸自动提取仪的使用建立了依据.     

磁珠

磁珠专用于抑制信号线、电源线上的高频噪声和尖峰干扰，还具有吸收静电脉冲的能力。磁珠是用来吸收超高频信号，一些RF电路、PLL振荡电路及含超高频的存储器电路（DDR、SDRAM、RAMBUS等）都需要在电源输入部分加入磁珠。而电感是一种蓄能元件，用在LC振荡电路、中低频的滤波电路等。     

微型贴片收音机的组装

SC1088是一块适用于单声道便携式或手掌式超小型调频收音机的专用电路，它采用先进的双极性工艺制造，在外围元件的数量、尺寸及成本变得很重要时，可优先选用该电路。     

基于GMR生物传感器的甲胎蛋白检测

采用磁控溅射、光刻、离子束刻蚀和剥离工艺等工艺和方法,制备了多层膜结构的巨磁阻(GMR)生物传感器件,并利用此种传感器来检测甲胎蛋白。在传感器表面通过生物处理固定甲胎蛋白单克隆抗体(McAb1)作为探针,以捕获目标抗原———甲胎蛋白。用直径1μm的超顺磁磁珠标记目标抗原。当传感器表面抗体将目标抗原捕获后,磁珠标记即被固定在GMR传感器的表面。垂直于传感器表面施加230 Oe(1 Am-1=4π×10-3 Oe)的磁场,即可检测到由磁珠产生的信号。本实验对质量浓度为1 ng/mL的甲胎蛋白进行了检测,得到了信号为0.29～0.34Ω的电阻变化值。此种检测方法可用于诊断原发性肝癌。