巴美肉羊肌纤维特性与糖酵解潜力相关性的研究

以巴美肉羊为实验材料,测定了不同部位肌肉(背最长肌、股二头肌和冈上肌)肌纤维组织学特性和糖酵解潜力,研究了不同部位肌肉肌纤维组织学特性的差异,分析了肌纤维特性和糖酵解潜力之间的相关关系。结果表明,三个部位肌肉的肌纤维中以ⅡB型肌纤维为主。Ⅰ型、ⅡA型肌纤维在背最长肌中含量最少,股二头肌中次之,冈上肌中最多。ⅡB型肌纤维与之相反。Ⅰ型肌纤维直径和横截面积在三块肌肉间存在显著差异(p<0.05)。冈上肌中的ⅡA型肌纤维的直径和横截面积显著大于其他两个部位(p<0.05),背最长肌中的ⅡB型肌纤维的直径和横截面积小于其他两个部位(p<0.05)。背最长肌的糖酵解潜力值显著高于股二头肌和冈上肌的(p<0.05)。糖酵解潜力与Ⅰ型、ⅡA型肌纤维个数比例和面积比例成显著的负相关(p<0.05),与ⅡB型肌纤维数量比和面积比成显著的正相关(p<0.05)。     

巴寒杂交一代肉羊一磷酸腺苷激活蛋白激酶活性与肉品质的关系研究

选取巴寒杂交一代肉羊5月龄、6月龄、8月龄和12月龄不同部位骨骼肌,分别测定它们的一磷酸腺苷激活蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)活性、糖酵解指标和肉质指标,研究不同月龄不同部位三者的差异,以探讨AMPK与宰后肌肉品质的相关性.结果表明:AMPK活性随着月龄的增加呈下降的趋势(p＜0.05),不同部位间背最长肌AMPK活性显著大于股二头肌和臂三头肌(p＜0.05);AMPK活性与pH24值呈极显著负相关(p＜0.01)、与肌糖元含量呈极显著正相关(p＜0.01),与L*值呈显著负相关(p＜0.05),与熟肉率呈显著正相关(p＜0.5).实验表明AMPK活性与pH24值、肌糖元含量、L*值和熟肉率具有显著相关性,AMPK可能通过调节糖酵解进程进而影响肉品质.     

非线性规划在生物代谢仿真过程中的应用

随着系统生物学研究的不断深入,生物过程网络的规模逐步拓展,其模型的复杂程度也越来越高,数值积分等常规方法很难求解生物代谢网络这类大规模复杂动态系统,客观上需要新的分析方法去应对。针对典型的酿酒酵母糖酵解途径的动态模型,首先利用Matlab进行常规的数值积分求解,以此作为参照,提出将糖酵解的动态模型离散化后利用非线性规划解题器IPOPT进行动态仿真的思路,采用不同的离散步长,计算得到不同的仿真结果。计算结果显示,通过调整计算参数,IPOPT可得到与参照一致的仿真结果,这表明非线性规划可作为分析优化生物过程这类大规模复杂动态系统的新方法,为下一步进行模型参数估计、多目标动态优化等打下基础。     

糖酵解途径相关基因与植物乳杆菌生理行为的相关性

研究pgm、fba、gap过表达对植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）LR-1的抗逆性、黏附和生物被膜形成的影响。结果表明，pgm、fba基因的过表达可提高植物乳杆菌LR-1的耐热性、耐酸性和抗胆盐性，这两个基因的过表达促进了该菌株生物被膜的形成和黏附。gap基因的转录水平对植物乳杆菌LR-1的抗逆性、生物被膜形成和黏附没有显著影响。pgm、fba、gap的上调提高了该菌株tuf、luxS的转录水平。这种增加在过表达pgm、fba的重组菌株中比在过表达gap的重组菌株中高。此外，生物信息学分析表明，pgm、fba可与多条途径相关的基因相关联。本研究揭示糖酵解途径相关基因在调节植物乳杆菌的抗逆性、黏附和生物被膜形成中的新作用。     

法舒地尔通过调控糖酵解通路对原代小胶质细胞的影响

目的探讨法舒地尔在阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)等多种认知功能障碍的疾病中对原代小胶质细胞的作用及其可能的调控机制。方法采用原代小胶质细胞,在经过不同浓度的法舒地尔处理后,荧光定量PCR检测细胞炎症水平、糖酵解相关酶及HIF-1α的活化水平,酶标仪检测原代小胶质细胞Aβ吞噬活化能力,通过ATP实验检测小胶质细胞的能量代谢能力。结果经过不同浓度的法舒地尔处理后,LPS刺激不同时间点的原代小胶质细胞的促炎因子的m RNA表达水平均有下降(P <0.05); Aβ吞噬能力明显增加(P <0.001);法舒地尔促使原代小胶细胞细胞新陈代谢能力明显增加(P <0.005),糖酵解过程的相关酶以及HIF-1α的mRNA水平均有下降(P <0.005)。结论法舒地尔可能通过下调小胶质细胞HIF-1α的转录活性来降低糖酵解过程相关酶的相对表达量,抑制糖酵解的过程从而增加ATP的产生,维持小胶质细胞的新陈代谢来减轻炎症反应,增加吞噬作用。     

不同年龄和部位羊肉中AMPK活性与糖酵解的差异

选取6月龄和18月龄宰后绵羊不同部位的骨骼肌,分别测定它们的AMPK活性和糖酵解各指标,研究不同年龄和部位羊肉中二者的差异,以探讨肌肉宰后生理的机理。结果表明:18月龄绵羊的AMPK活性极显著大于6月龄羊(P<0.01),pH下降幅度、肌糖原含量、乳酸含量和己糖激酶活性均极显著高于6月龄羊(P<0.01),乳酸脱氢酶活性显著高于6月龄羊(P<0.05)。并且同一年龄羊的各不同部位肌肉中AMPK活性和糖酵解也存在差异,运动量大的部位AMPK活性高,糖酵解速度快。因此得到结论,肌肉的AMPK活性较高时糖酵解速度也较快,反之较慢。     

PSE肉的产生及其预防

通过对PSE肉产生的原因及机理进行阐述，指出了预防的对策，为生产企业预防PSE肉的产生提供了科学的、系统的、可操作性的思路和方法。     

飞燕草素对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞糖酵解的影响

目的:探讨飞燕草素对乳腺癌MDA-MB-231细胞糖代谢的影响。方法:以不同浓度的飞燕草素作用MDA-MB-231细胞,CCK-8检测细胞活性,免疫组化染色检测Ki67表达,划痕试验检测细胞的迁移能力;葡萄糖摄取、乳糖和三磷酸腺苷(ATP)测定试剂盒检测MDA-MB-231细胞葡萄糖摄取、乳糖和ATP的生成,己糖激酶(HK)活性试剂盒检测HK活性;蛋白质印迹法检测HK、丙酮酸激酶(PK)、乳酸脱氢酶A(LDHA)和M2-型丙酮酸激酶 2(PKM2)表达。结果:飞燕草素能明显抑制MDA-MB-231细胞增殖,20和40 μmol/L飞燕草素能分别降低细胞存活率至75%和72%(P<0.05);20、40 μmol/L飞燕草素能降低乳腺癌MDA-MB-231细胞Ki67表达阳性的细胞数量,差异有统计学意义(P<0.01);飞燕草素能降低乳腺癌细胞葡萄糖的摄取,降低细胞乳糖和ATP的生成,抑制PKM2、HK和LDHA蛋白的表达,降低p-Akt和p-mTOR蛋白表达。结论:飞燕草素能抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞糖代谢,抑制Akt/mTOR通路活性可能是飞燕草素抑制乳腺癌细胞糖酵解的机制。     

M2型丙酮酸激酶同工酶表达对肝细胞癌化疗敏感性的影响

【摘要】 目的 研究M2型丙酮酸激酶同工酶（PKM2）对肝癌细胞HepG2增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响,探讨PKM2表达对肝细胞癌（HCC）化疗敏感性的影响。方法 采用蛋白印迹和实时定量聚合酶链反应（RT- qPCR）检测正常肝细胞株HL- 7702和肝癌细胞株HepG2中PKM2蛋白和mRNA表达。构建靶向PKM2基因重组质粒（PKM2- siRNA）和对照质粒（siRNA- NC）,并转染至HepG2细胞中,蛋白印迹和qRT- PCR检测PKM2敲低情况。细胞克隆形成、Transwell趋化和TUNEL法分析PKM2表达对细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。不同浓度多柔比星（DOX）处理各组细胞后,CCK- 8和TUNEL法检测细胞活性和凋亡。 结果 HepG2细胞株中PKM2蛋白和mRNA表达与HL- 7702相比显著上调[mRNA（1.01±0.01）%对（5.04±0.02）%,蛋白（1.34±0.04）%对（4.03±0.02）%,P＜0.05]。PKM2在PKM2- siRNA转染HepG2细胞中表达在转录和翻译水平显著降低,细胞克隆形成率、细胞侵袭数均低于空白转染组和转染siRNA- NC对照组,细胞凋亡率高于空白转染组和转染siRNA- NC对照组,DOX半抑制浓度（IC50）为7.25 μg/mL,转染siRNA- NC对照组为18.51 μg/mL。随着DOX给药浓度增加,细胞凋亡率显著增加。转染PKM2- siRNA细胞组凋亡数明显高于转染siRNA- NC对照组（P＜0.05）。 结论 PKM2在人肝癌细胞株HepG2中高表达。敲低PKM2表达可抑制细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡,增强对DOX化疗敏感性。PKM2可能是HCC治疗的潜在靶点。

     

日粮添加胍基乙酸和甜菜碱对育肥猪肉品质及宰后糖代谢的影响

研究旨在评估胍基乙酸(GAA)或胍基乙酸和甜菜碱结合使用对育肥猪肉品质及宰后糖代谢的影响。选择180头杂交阉割公猪随机分配到3个试验组:对照组(CON;基础饲粮为玉米-豆粕型)、胍基乙酸组(GAA;基础日粮+胍基乙酸1g·kg-1)、结合日粮组(CGB;基础日粮+胍基乙酸1 g·kg-1+甜菜碱0.5 g·kg-1),每组3个重复,每个重复20头猪,基础日粮适应7 d,试验期15 d。与对照组相比,日粮添加GAA和CGB显著增加了p H 45 min和p H 24 h(P<0.05),同时显著降低了背最长肌滴水损失、蒸煮损失(P<0.05),极显著降低了剪切力值(P<0.01)。此外,日粮添加GAA和CGB极显著增加了肌酸、磷酸肌酸、三磷酸腺苷的活性(P<0.01),显著增加了肌酸激酶的活性(P<0.05)。GAA和CGB的添加均增加了背最长肌(P<0.01)和肾(P<0.05)肌酸转运蛋白m RNA的表达,降低了己糖激酶的活性(P<0.01)和乳酸的含量(P<0.05)。两个试验组中L-精氨酸-甘氨酸脒基转移酶m RNA的表达均下降(P<0.01)。结果表明,饲粮中添加胍基乙酸和甜菜碱能够通过影响能量代谢来延迟宰后糖酵解,进而改善猪肉品质。