全文获取类型
收费全文 | 14684篇 |
免费 | 869篇 |
国内免费 | 294篇 |
专业分类
电工技术 | 10篇 |
综合类 | 908篇 |
化学工业 | 1822篇 |
金属工艺 | 157篇 |
机械仪表 | 174篇 |
建筑科学 | 621篇 |
矿业工程 | 25篇 |
能源动力 | 29篇 |
轻工业 | 10992篇 |
水利工程 | 16篇 |
石油天然气 | 24篇 |
武器工业 | 1篇 |
无线电 | 165篇 |
一般工业技术 | 514篇 |
冶金工业 | 90篇 |
原子能技术 | 172篇 |
自动化技术 | 127篇 |
出版年
2024年 | 185篇 |
2023年 | 550篇 |
2022年 | 748篇 |
2021年 | 624篇 |
2020年 | 483篇 |
2019年 | 605篇 |
2018年 | 427篇 |
2017年 | 501篇 |
2016年 | 491篇 |
2015年 | 613篇 |
2014年 | 899篇 |
2013年 | 679篇 |
2012年 | 869篇 |
2011年 | 863篇 |
2010年 | 781篇 |
2009年 | 737篇 |
2008年 | 930篇 |
2007年 | 671篇 |
2006年 | 645篇 |
2005年 | 496篇 |
2004年 | 434篇 |
2003年 | 355篇 |
2002年 | 285篇 |
2001年 | 220篇 |
2000年 | 209篇 |
1999年 | 212篇 |
1998年 | 168篇 |
1997年 | 135篇 |
1996年 | 135篇 |
1995年 | 106篇 |
1994年 | 107篇 |
1993年 | 115篇 |
1992年 | 139篇 |
1991年 | 105篇 |
1990年 | 95篇 |
1989年 | 108篇 |
1988年 | 16篇 |
1987年 | 13篇 |
1986年 | 11篇 |
1985年 | 9篇 |
1984年 | 15篇 |
1983年 | 12篇 |
1982年 | 19篇 |
1981年 | 11篇 |
1980年 | 16篇 |
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 15 毫秒
81.
绿脓杆菌外膜蛋白对感染的保护作用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 寻找一种防治绿脓杆菌感染的有效方法。方法 用绿脓杆菌外膜蛋白免疫的兔抗血清对4种不同血清型的菌株和1株临床绿脓杆菌进行体内外交叉保护性试验。结果 家兔免疫1周后即产生抗体,并逐渐升高,至第6周抗体滴度达到1:163 840,并维持高水平;抗血清能与4种不同血清型菌株和1株临床菌株产生直接凝集反应。第8周的血清(1:8以上)与其外胰蛋白的ELISA抗体效价相近,小鼠的半保护剂量均在0.05~0.11ml之间。结论 外膜蛋白疫苗具有较强的抗原性,而且具有良好的交叉保护作用。 相似文献
82.
目的利用重组杆状病毒高效表达猪圆环病毒2型(porcine circovirus 2,PCV2)Cap蛋白,并分析该蛋白的免疫特性。方法将PCV2 Cap基因克隆至转移载体pFastBacⅠ,转化感受态E.coli DH10Bac细胞,获得重组杆粒r Bacmid-Cap,转染Sf9细胞,SDS-PAGE和Western blot法检测重组杆状病毒,并于High Five(H5)细胞中进行高效表达。将小鼠随机分为PBS对照组、杆状病毒组、重组杆状病毒组及疫苗对照组,均经小鼠肌内注射,100μL/只,分别于第0和14天进行免疫,于首免后第21、28、35及42天经小鼠眼眶静脉丛采血,分离血清,ELISA法进行检测。结果 PCR和测序分析结果表明,重组转移质粒和重组杆粒构建正确。重组PCV2 Cap蛋白的相对分子质量约28 000,可与抗His标签单克隆抗体及抗PCV2 Cap多克隆抗体发生特异性结合。重组杆状病毒按MOI=5及1感染H5细胞约72 h,PCV2 Cap蛋白表达量最高,表达产量约150μg/mL。首免后第21、28、35及42天,重组杆状病毒组小鼠血清抗体水平明显高于PBS对照组及杆状病毒组(P 0. 001);首免后第21、28、35天,重组杆状病毒组小鼠血清抗体水平明显高于疫苗对照组(P 0. 05),首免后第42天,两组差异无统计学意义(P 0. 05)。结论成功利用杆状病毒表达系统高效表达了PCV2 Cap,重组蛋白可诱导小鼠产生较高水平抗体,本研究为PCV疫苗的研制奠定了基础。 相似文献
83.
本文从肌醇工业生产的实际出发,阐述了蛋白质等杂质对肌醇质量、得率以及原辅材料消耗造成的影响,针对肌醇中蛋白质等杂质的特点,作者在不改变原生产流程,不增添设备的前提下,采用锡山市新宇化工厂生产的净化剂FNO-10,在去除蛋白质方面取得了明显的效果,不但提高了肌醇的质量,而且提高了肌醇得率,减少了辅助材料的消耗,降低了生产成本。 相似文献
84.
85.
目的在大肠杆菌中表达结核分枝杆菌RD1区11kD蛋白,并检测表达产物的效力。方法构建11kD蛋白编码基因原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)IPTG诱导表达,离子层析柱分离纯化重组蛋白。以结核分枝杆菌致敏豚鼠进行皮肤变态反应(DTH)测定。结果结核分枝杆菌11kD蛋白在大肠杆菌中以可溶形式表达,表达蛋白占总菌体蛋白的33%以上,纯化后纯度达95%以上,并可诱导结核分枝杆菌致敏豚鼠产生迟发型超敏反应,5μg/ml11kD蛋白的效力与50IU/ml TB-PPD相当。结论重组11kD蛋白已在大肠杆菌中成功表达,并有望成为结核病皮试鉴别诊断用新试剂。 相似文献
86.
目的克隆人热休克蛋白70(HSP70)基因,构建其原核高效表达载体。方法将PCR扩增的HSP70基因克隆到原核高效表达载体pET-28b中,转化大肠杆菌JM109。挑选阳性克隆,提取质粒pE28b70F,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达目标蛋白。结果在大肠杆菌中成功表达了HSP70,表达量约占细菌总蛋白的22·3%,其中可溶性目标蛋白占上清总蛋白的12%。Westernblot表明该目标蛋白具有与鼠抗人HSP70单抗特异结合的抗原活性。通过Ni2+-NTA亲和柱,从1L诱导产物中纯化出约1520mg重组蛋白,纯度在80%以上。结论已成功表达HSP70,为进一步研究其生物学功能和作用机制奠定了基础。 相似文献
87.
免疫磁性微球的制备及对IgG的分离 总被引:2,自引:0,他引:2
采用反相悬浮包埋法制备SPA-Sepharose免疫磁性微球,并对产物的结构、粒径、磁性能进行了表征,所得产物粒径大约为5μm,表面包裹葡萄球菌蛋白A(Staphylococcal Protein A,简称SPA),分散性较好,具有超顺磁性。利用SPA对免疫球蛋白G(IgG)的特异性吸附反应及磁性微球的超顺磁性,从猪血清中分离IgG,试验结果表明:SPA免疫磁性微球对猪血清的最大吸附效率是70.12%,可反复使用29次。 相似文献
88.
用PCR技术扩增了人热激蛋白27(Hsp27)基因,构建了原核表达载体pGEX-4T-1-Hsp27。经IPTG诱导表达了带有GST标签的重组人Hsp27,SDS-PAGE鉴定显示该重组蛋白的分子量为44 kD。利用谷胱甘肽-琼脂糖树脂亲和层析纯化了该重组蛋白,经串联质谱检测证明了该重组蛋白为人Hsp27。本研究为制备Hsp27抗体及进行Hsp27的功能研究奠定了基础。 相似文献
89.
90.
Citrate-stabilized CdSe/CdS quantum dots as fluorescence probe for protein determination 总被引:1,自引:1,他引:0
A rapid, ultrasensitive and convenient fluorescence measurement technology based on the enhancement of the fluorescence intensity
resulting from the interaction of functionalized CdSe/CdS quantum dots (QDs) with bovine serum albumin (BSA) was proposed.
The citrate-stabilized CdSe/CdS (QDs) were synthesized by using Se powder and Na2S as precursors instead of any pyrophoric organometallic precursors. The modified CdSe/CdS QDs are brighter and more stable
against photobleaching in comparison with organic fluorophores. At pH 7.0, the fluorescence signal of CdSe/CdS is enhanced
by increasing the concentration of BSA in the range of 0.1–10 μg/mL, and the low detection limit is 0.06 μg/mL. A linear relationship
between the enhanced fluorescence peak intensity (ΔF) and BSA concentration (c) is established using equation ΔF=50.7c+16.4 (R=0.996 36). Results of determination for BSA in three synthetic samples are identical with the true values, and the recovery
(98.9%–102.4%) and relative standard deviation (RSD, 1.8%–2.5%) are satisfactory. 相似文献