毛竹竹叶多糖分离与纯化技术研究

对毛竹叶采用超声波提取法获得的竹叶多糖粗提取物,采用Sevag法脱蛋白质、乙醇分级沉淀、冷冻干燥后得到粗多糖,进一步用DEAE-52纤维素柱层析、Sephadex葡聚糖凝胶柱层析等方法分离纯化.结果表明:Sevag法脱蛋白3次可脱除97.2%的蛋白质;50%浓度的乙醇沉淀多糖得率最高,为37.6%;DEAE-52纤维素柱层析柱水沈脱的得牢最高,为46.4%;DEAE-52纤维素柱层析柱2次水洗脱获得的竹叶多糖经G-75柱层析和G-100柱层析可得到白色粉末状的中性多糖.选择水和NaCl溶液为洗脱剂的温和条件分离纯化多糖效果较好.     

鱿鱼硫酸软骨素糖蛋白的分离纯化和鉴定

目的:研究鱿鱼软骨硫酸软骨素的主要成分.方法:以鱿鱼喉软骨为材料,经提取、分离和纯化等步骤得到一酸性粘多糖组分C-S2:用高效凝胶过滤色谱和比旋光度鉴定其纯度,并用化学和光谱法研究其组成和结构.结果:C-S2为均一性较好的粘多糖,为硫酸软骨素C糖蛋白,其重均相对分子质量(Mw)149 595,比旋光度-25.3.软骨素含量95.31%,蛋白含量2.59%,葡萄糖醛酸(GlcA)含量35.02%,己糖胺含量34.02%,总硫酸基含量9.54%,并存在少量中性单耱,由鼠李糖(Rha)、甘露糖(Man)、葡萄糖(Glu)和半乳糖(Gal)组成;β-消去反应说明C-S2中糖链以O-糖肽键连接到苏氨酸上.结论:鱿鱼软骨硫酸软骨素的主要成分为硫酸软骨素C糖蛋白.     

大豆粗磷脂中磷脂酰胆碱的分离纯化研究

为了筛选出从醇溶性大豆磷脂中分离纯化大豆磷脂酰胆碱的最佳分离纯化工艺,本文了采用正交设计试验筛选提取大豆磷脂酰胆碱的最佳工艺。结果表明大豆磷脂酰胆碱最佳提取工艺为:按1∶10的料水比进行加热,在78℃恒温下4 h回流提取,重复2次。大豆磷脂酰胆碱的进一步的精制方法为葡聚糖凝胶Sephadex LH-20凝胶柱层析法,并且考察了葡聚糖凝胶Sephadex LH-20对大豆磷脂酰胆碱的纯化能力。首先采用无水乙醇作为葡聚糖凝胶Sephadex LH-20凝胶柱层析洗脱液纯化大豆磷脂酰胆碱,然后将所得的大豆磷脂酰胆碱干燥,最后通过高效液相色谱法对所得的大豆磷脂酰胆碱进行含量测定。结果表明,乙醇提取法以及葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱层析法相结合的纯化过程对大豆磷脂酰胆碱分离纯化效果良好,此外该方法收率高,能够得到纯度为90.12%的大豆磷脂酰胆碱。     

苦丁茶冬青叶多糖的分离纯化及其对羟自由基的清除作用

苦丁茶冬青叶经乙醇脱脂、水提醇沉和Sevag法除蛋白,得苦丁茶冬青叶粗多糖KPS Ⅱ.KPS Ⅱ经DEAE-纤维素阴离子交换层析柱分离纯化,得到两个纯化多糖组分KPS Ⅲ a和KPS Ⅲ b.KPS Ⅲ a和KPS Ⅲ b经过硫酸水解,还原乙酰化,用气相色谱方法测定了其组成及相对含量.KPS Ⅲ a与KPS Ⅲ b均主要由阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖组成,其摩尔比分别为10.21.01.28.05.4和17.71.01.11.84.1.以Fenton反应为产生·OH模型,用紫外分光光度法实验了苦丁茶冬青叶多糖(KPS Ⅱ、KPS Ⅲ a、KPS Ⅲb)对模型中产生的·OH的清除作用.结果表明,KPS Ⅱ、KPS Ⅲa、KPS Ⅲb对·OH都具有一定的清除作用,且清除率与多糖的浓度存在一定的量效关系.苦丁茶冬青叶粗多糖KPS Ⅱ对·OH的清除作用均比纯化多精(KPS Ⅲa、KPS Ⅲb)强.     

天然产物中二氢槲皮素分离纯化及发展趋势

二氢槲皮素属黄酮醇类化合物,因具有广泛的生物功能和多种用途,从天然产物中获取二氢槲皮素的研究日益受到人们的关注.文章对其分离纯化方法进行介绍,主要有有机溶剂萃取法、沉淀分离法、微波辅助提取法、超声-微波交替法、结晶与重结晶法、色谱法等等.通过各种方法的比较,分析概括各种方法的优缺点,并对今后研究方法的应用方向进行展望.     

山药糖蛋白纯化条件及其理化方法鉴定

采用热水浸提法得到山药糖蛋白粗提物,经过不同洗脱液进行DEAE-52柱层析纯化和Sepha-dexG-75柱层析纯化,得到山药糖蛋白组分CYG-1和CYG-2。其中,DEAE-52柱层析中以NaHCO3作为洗脱液时,只能得到1个CYG组分。I2-KI显色反应、茚三酮反应、斐林试剂反应、硫酸-咔唑反应、以及与FeCl3反应和与CTAB反应、糖肽键特征等理化方法鉴定的结果表明,得到的CYG-1和CYG-2为纯品,属酸性糖蛋白,糖肽键为O-糖肽键。CYG-1和CYG-2分子中蛋白和多糖质量分数分别为20.62%、15.16%和68.56%7、2.31%。     

大豆低聚糖的研究进展

大豆低聚糖对人体具有多种保健功效，因而在食品中的应用日趋广泛。文章论述了大豆低聚糖的分布、生物合成途径及其生理功能和理化性质，并从提取、纯化方法等方面综述了近年来大豆低聚糖制备的研究进展。     

两种粗提纯法对纤溶酶纯化效果的比较研究

采用硫酸铵盐析法及乙醇沉淀法对海洋枯草芽孢杆菌纤溶酶的纯化效果进行比较研究,得到的最佳纯化方案为：取一定体积的纤溶酶发酵液进行预处理,再进行分段盐析及分级沉淀,在分段盐析中,30％和70％饱和度的硫酸铵分别用于去除杂蛋白和沉淀纤溶酶,最后进行碱处理及超滤除盐;在分级沉淀中,最佳乙醇沉淀时间为1.5h,去除杂蛋白和沉淀纤溶酶的乙醇体积比分别为25％和165％,最后将两种方法得到的粗提液进行冷冻干燥,硫酸铵法的酶活回收率为83.52％,纯化倍数为1.42,冻干粉得率为4.812 g/L,单位酶活为76 755.82IU/g;乙醇纯沉淀法的酶活回收率为89.7％,纯化倍数为1.72,冻干粉得率为7.611 g/L,单位酶活为137 190.57 IU/g,该结果表明乙醇沉淀法对纤溶酶的粗提效果要优于硫酸铵盐析法.     

用疏水色谱法纯化基因重组 牛朊病毒正常成熟蛋白

研究并比较了高效疏水相互作用色谱（HPHIC）的流动相组成、固定相、pH值和梯度方式对分离基因重组大肠杆菌高效表达的牛朊病毒正常成熟蛋白的影响,在此基础上,确定了牛朊病毒正常成熟蛋白分离纯化的最优化条件,即仅用高效疏水色谱法坦 步便可得到纯度和质量回收率均大于90%的目标蛋白,还讨论了用HPHIC对变性bPrP^cL的分离机理。     

虫草素的提取纯化及测定方法研究进展

虫草素(cordycepin)是虫草重要的活性成分,具有显著的药理作用。本文主要就近年来北冬虫夏草中虫草素的提取纯化以及相关测定方法的研究作一概述,以期为实现其规模纯化打下基础。