具有溶栓活性的重组乳酸乳球菌的构建

利用PCR方法从纳豆芽孢杆菌(Bacillus subtilis subsp.natto)基因组DNA中扩增纳豆激酶原基因,构建了纳豆激酶原基因的表达载体pFY002,转化Lactococcus lactis NZ9000,得到活性表达纳豆激酶的重组菌Lactococcus lactis NZ9000/pFY002。利用纤维蛋白平板法检测其溶栓活性,并对诱导剂乳链菌肽(NisinA)的浓度、温度、诱导时间对重组菌产酶的影响进行探究。     

纳豆芽孢杆菌发酵产蛋白酶工艺优化

纳豆芽孢杆菌是纳豆发酵生产的主要菌种,对其发酵产蛋白酶特性的探讨将有助于了解纳豆的发酵生产过程,为其提供理论指导。从不同纳豆产品中分离筛选得到一株高产蛋白酶的纳豆芽孢杆菌,采用响应面设计的方法对影响其发酵产酶的若干因素进行了分析,确定了相对较稳定的发酵培养基及工艺条件:可溶性淀粉3.41%,麸皮2%,黄豆粉2.26%,CaCl2 0.2%,K2HPO4 0.24%,Tween 80 0.2%,pH 8.0～8.5;发酵温度35～38℃,时间70 h。在优化的培养基及条件下,该菌种蛋白酶的发酵单位可以达到7 200 U/mL,较优化前提高了约2倍。     

茶多酚对谷氨酸脱氢酶和纳豆氨含量的影响

纳豆中含有纳豆激酶等功能性成分，能够有效预防心血管疾病，然而，发酵过程中产生的氨味大大降低了其在我国的可接受度。为降低纳豆氨含量，本研究比较4种物质对纳豆芽孢杆菌产氨的关键酶——谷氨酸脱氢酶的抑制效果，结果显示茶多酚作用效果最佳。研究表明茶多酚是一种底物竞争型抑制剂，IC50为20.60 μg/mL，且它能够进入纳豆芽孢杆菌细胞，有望作为添加剂来抑制后者胞内的谷氨酸脱氢酶活性，减少纳豆发酵过程中氨的产生。通过分析纳豆芽孢杆菌的生长规律、纳豆发酵过程中氨含量的变化趋势及茶多酚抑制产氨的效果，确定最佳工艺条件为:在发酵第11小时添加4.16 mg/g茶多酚。该条件下，纳豆中氨含量下降了63.90%，而纳豆激酶活性没有显著性变化。经感官评定证实，添加茶多酚能够有效降低纳豆的氨味，提高产品的可接受度，具有极大的应用价值。     

纳豆发酵过程中纳豆激酶及活性物质的变化

研究纳豆菌在脱脂大豆发酵过程中,对健康很有益的纳豆激酶和大豆活性物质--大豆异黄酮的变化.结果显示纳豆菌在脱脂大豆固态发酵中,发酵初始pH为8.0,水分质量分数为70%时,在37 ℃发酵48 h,产纳豆激酶活力最高;固态发酵条件为发酵初始pH为7.0～9.0,水分质量分数80%时,40 ℃发酵48～96 h,原料中大部分大豆异黄酮苷转化为大豆异黄酮苷元.     

纳豆银杏紫苏软胶囊毒理学安全性研究

目的:对含纳豆激酶、银杏叶提取物、紫苏籽油复配物软胶囊进行毒理学安全性评价研究。方法:取软胶囊内容物样品,对SPF级健康昆明种小鼠进行急性经口毒性试验,遗传毒性试验(包括Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验),并选择SPF级健康SD种大鼠进行30d喂养试验。结果:急性经口试验小鼠在最大给药量30000mg/kg BW的剂量下生长发育情况良好,培养14d未见动物死亡,解剖动物各脏器没有发现明显异常改变,根据分级标准,该样品属无毒级;Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验均为阴性;大鼠灌胃试验的30d内,样品各剂量组的各项指标与对照组比较,均没有显著性差异(P0.05),解剖观察和组织学检查结果表明,纳豆银杏紫苏胶囊样品对大鼠各器官和组织均无损害作用。结论:在本实验条件下,纳豆银杏紫苏胶囊安全性好,对动物健康无损害作用和毒副作用。     

D-最优混料设计优化树莓平菇解酒片主料配比

红树莓中富含的鞣花酸和其聚合物以及其他化合物具有解酒功能,该文利用所培育出的树莓平菇,添加传统药膳葛花、拐枣、苦荞以及具有养胃功效的小米进行平菇解酒片的开发。采用软件Design Expert(V.8.0.6)中的混料(mixture)设计D-Optional的方法,以体外乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase,ADH)的激活率为评价指标,设计解酒片的最佳主料配方。通过建立各组分不同比例与ADH激活率之间的回归模型,考察该配方中各组分的交互作用对响应值的影响,利用软件的优化功能和验证试验得出最佳主料配方为:小米粉31.2%、苦荞粉21.7%、平菇粉20.5%、葛花粉16.8%、拐枣粉9.8%,在该条件下对ADH的激活率最大达到15.87%,验证试验结果与预测值相吻合,表明采用本方法优化得到的处方工艺稳定可靠。     

培养条件及表面活性剂的添加对纳豆芽孢杆菌生物膜形成的影响

采用改良的微孔板法培养纳豆芽孢杆菌(Bacillus subtilis natto),通过结晶紫染色定量分析产生的生物膜。结果表明:培养条件为pH 7、温度37℃、培养72 h且在5 g/100 mL葡萄糖-5 g/100 mL NaCl条件下成膜能力最佳。柠檬酸二铵和聚乙二醇-200(polyethylene glycol-200,PEG-200)随着质量浓度的增加对生物膜的形成量呈现先下降后上升的趋势,十二烷基磺酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)抑制生物膜的形成,十六烷基三甲基溴化铵(cetyl trimethyl ammonium bromide,CTAB)促进生物膜的形成。所以低温抑制生物膜的形成,一定浓度的NaCl和葡萄糖促进生物膜形成,不同的表面活性剂对其生物膜的影响机制不同,为纳豆芽孢杆菌生物膜的研究提供理论基础。     

纳豆芽孢杆菌发酵菜用大豆中纳豆激酶的提取及其性质分析

以菜用大豆为原料,直投式纳豆芽孢杆菌作为发酵剂,纳豆激酶活力作为评价指标,通过单因素和正交试验优化纳豆激酶发酵工艺条件;通过盐溶、硫酸铵分段盐析、二乙氨乙基（DEAE）阴离子交换柱分离纯化纳豆激酶,并采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）确定其分子质量,并进行酶学性质和体外溶栓效果分析。结果表明,菜用大豆发酵生产纳豆激酶的最佳条件为：每100 g蒸煮菜用大豆接入1.15×1011 CFU/g直投发酵剂,发酵温度37 ℃、发酵时间36 h、后熟时间18 h时,此时纳豆激酶活力可达2 326.60 IU/g。纳豆激酶的分子质量介于25～35 kDa之间,最适作用温度、pH值分别为37 ℃、8.0,当温度低于40 ℃、pH值在6.0～8.0时较稳定;体外溶栓实验表明纳豆激酶具有良好的体外溶栓效果。     

罗汉果咀嚼片制备工艺的优化及抑菌活性研究

以罗汉果为主要原料,选用淀粉、微晶纤维素、甘露醇、柠檬酸、硬脂酸镁等辅料制备罗汉果咀嚼片。通过单因素、正交试验优化处方确定最佳工艺配方;利用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法测定咀嚼片中罗汉果主成分皂苷V含量。咀嚼片中罗汉果皂苷V含量为3.744 mg/g。该咀嚼片对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌具有一定的抑制作用,对铜绿假单胞菌则无抑制作用。该产品配方合理,且各项指标均符合中国药典规定,含片质量稳定,工艺可行,为罗汉果的开发提供理论依据。     

铝碳酸镁咀嚼片含量测定方法的研究

目的：建立铝碳酸镁咀嚼片含量的测定方法,采用直接滴定方法分别测定铝碳酸镁咀嚼片中氧化铝和氧化镁的含量。氧化铝的平均回收率为99．4％,氧化镁的平均回收率为99.7％。结论：本法简单、快速,能够分别控制铝碳酸镁咀嚼片中氧化铝和氧化镁的含量。