我研究发现越橘提取物能抑制大肠癌细胞增殖

哈尔滨医科大学附属第四医院肿瘤外科主任刘明教授领衔完成一项国家自然科学基金课题"越橘提取物预防及抑制大肠癌机制的研究",首次发现经模拟人体消化道理化环境制备而成的越橘提取物中,黄酮醇、原花青素、萜类、酚类等有效成分能显著抑制大肠癌Lovo细胞的     

雷帕霉素联合阿霉素对肝癌细胞BEL-7402增殖及迁移的影响及其作用机制

目的:探讨雷帕霉素(RAPA)与阿霉素(ADM)联合应用对肝癌细胞BEL-7402增殖和迁移的影响,阐明其作用机制.方法:选取处于对数生长期肝癌细胞株BEL7402随机分为空白对照组、乙醇溶媒组、RAPA组、ADM组以及联合用药组,采用MTT法检测各组细胞6 d内的增殖情况,采用RT-PCR方法检测cyclin D1和MMP-2 mRNA表达水平,采用Western blotting法检测cyclin D1蛋白表达水平.结果:细胞培养后第3天起,联合用药组细胞增殖速度显著低于RAPA组、ADM组、乙醇溶媒和对照组(P<0.01).联合用药组cyclin D1 mRNA相对表达量(0.63)明显低于RAPA组(0.77)、ADM组(0.76)和对照组(1.02),联合用药组MMP-2 mRNA相对表达量(0.88)明显低于RAPA组(1.40)、ADM组(1.28)和对照组(1.98),联合用药组cyclin D1蛋白相对表达量(0.33)明显低于RAPA组(0.75)、ADM组(0.74)和对照组(0.92).结论:RAPA与ADM联合应用可以增强肝癌细胞系BEL-7402对ADM的敏感性,其机制可能与抑制MMP-2和cyclinD1基因的转录及cyclinD1蛋白的表达有关.     

雷公藤红素体外抑制人类急性髓系白血病细胞的实验研究

目的 研究雷公藤红素体外对人类急性髓系白血病(AML)细胞的体外抑制作用.方法 应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和流式细胞术(FCM)等方法研究雷公藤红素对人类AML细胞的影响.结果 MTT实验显示,与空白组比较,培养不同时间后不同浓度组雷公藤红素的细胞增殖抑制率均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01).FCM检测结果显示,1 μmol/L以上浓度雷公藤红素作用不同时间,AML细胞均可出现凋亡现象,凋亡率明显高于不加药物的对照组(P＜0.01).结论 雷公藤红素对AML有明显的抑制作用,其作用可能与其诱导细胞凋亡有关.     

绿茶儿茶酚对活性氧和血管细胞增殖的影响研究

以内皮细胞、中膜平滑肌细胞和HL-60细胞(异常细胞模型),研究了绿茶儿茶酚对3种细胞增殖的影响.用次黄嘌吟一黄嘌吟氧化酶化学发光法研究了绿茶儿茶酚清除活性氧的效果.研究结果表明,1μg/ML的绿茶儿茶酚略可促进内皮细胞增殖;1.3 μg/mL的绿茶儿茶酚对中膜平滑肌细胞增殖没有抑制作用;10 gg/mL的绿茶儿茶酚减少中膜平滑肌细胞数童.HL-60细胞数量的减少与绿茶儿茶盼浓度呈剂量效应关系.并发现绿茶儿茶酚对细胞活性氧的清除与剂1有关.     

青钱柳水提物降血糖及抗发炎功效研究

青钱柳是珍贵的药食同源植物。本研究旨在明确青钱柳水提物对链脲佐菌素/烟酰胺(STZ/NA)诱导的糖尿病小鼠的降血糖和抗发炎作用。MTT试验表明,50.0μg/mL青钱柳水提物作用24 h后,胰岛RIN-m5F细胞增殖率达71.0%;血清学分析表明,不同剂量青钱柳水提物灌胃4周后,青钱柳各剂量组可明显降低2型糖尿病小鼠的血糖、血脂和血胆固醇水平,特别是以200.0 mg/mL中剂量组的降血糖和降血脂效果最好,与STZ造模组比较,具有显著性差异(P0.05);与12-氧-十四烷酰醇-13-乙酸酯(TPA)诱发组相比,25.0 mg/mL青钱柳水提物作用12 h和24 h后,小鼠耳朵的肿胀度分别降低26.9%和27.2%,大于消炎药吲哚美辛(PC组)。研究结果表明,一定剂量的青钱柳水提物通过抑制炎症,促进胰岛细胞增殖,保护胰岛组织,降低血糖和调节脂肪代谢,预防糖尿病及其并发症的发生。本研究结果为青钱柳的精深加工和功能食品开发提供参考。     

低剂量UVB辐射对HaCaT细胞凋亡与增殖及Bad信号通路的影响

为研究低强度紫外线UVB(Ultraviolet B,280~315 nm)对人永生化细胞(HaCaT细胞)凋亡和增殖的影响及其与Bad通路的潜在机制,首先通过预实验从3、5和7 mJ/cm2强度的UVB中挑选出5 mJ/cm2强度的UVB分别照射HaCaT细胞18、36和72 h,收集细胞进行细胞凋亡和增殖检测;提取照射后HaCaT细胞的总蛋白进行免疫印迹实验检测AKT、Bad和Bad-p153的表达。结果表明,5 mJ/cm2强度的UVB照射HaCaT细胞18、36和72 h,对HaCaT细胞的凋亡没有影响,但是照射72 h可以促进HaCaT细胞的增殖;免疫印迹实验证实UVB照射后Bad的表达量维持正常,而AKT和Bad-p153表达升高。说明长时间5 mJ/cm2强度的UVB照射可能通过Bad信号通路促进细胞增殖,这可能是皮肤肿瘤发生发展的潜在危险因素。     

线粒体DNA减少在氡及其子体致人支气管上皮细胞凋亡中的作用

使用溴化乙锭(Ethidium bromide,EtBr)诱导方法构建线粒体数目减少支气管上皮细胞(Human bronchia epithelia with mitochondrial DNA knock-down,ρ?HBE)模型并进行长期氡照射,用克隆形成法测定氡照射后HBE细胞的增殖能力,用流式细胞仪进行细胞凋亡和线粒体膜电位的检测。结果发现,氡照射后,与线粒体DNA数量正常的HBE细胞(ρ+HBE)相比较,ρ?HBE细胞存活分数明显增高,虽然早期凋亡率明显低于正常细胞,但是总凋亡率增加,同时线粒体膜电位也显著降低。结果提示,氡照射后引起的线粒体减少HBE细胞增殖能力提高与总凋亡率的减少有关,并且与线粒体膜电位的变化相关。     

功能性食物与肠道健康

肠道是控制食物或微生物进入机体的第一道屏障。肠道代谢、屏障或免疫功能失衡均能导致肠道损伤或炎症,进而导致机体其他组织损伤或病变,比如:腹部肥胖、高血脂、糖尿病等代谢综合征。因此,肠道功能障碍已成为影响我国公共健康的重要因素之一。食物成分可以调节肠道细胞增殖、分化、代谢和动态平衡,影响肠道转运代谢、屏障和免疫功能。精氨酸可改善肠道损伤与自然发生的肠道萎缩,色氨酸可转化为     

佛波酯增强顺铂的抗肿瘤活性及降低其肾毒性的作用研究

目的：探讨佛波酯（TPA）对顺铂（CP）的抗肿瘤作用及肾毒性的影响。方法：MTT法检测TPA在肺癌细胞A549、SPC-A-1中对CP抑制肿瘤细胞增殖作用的影响;一次性尾静脉注射大剂量CP考察TPA对CP急性毒性的影响;采用荷瘤小鼠模型考察TPA对CP抑瘤率和肾毒性的影响;并检测TPA对CP引起肾脏氧化应激的作用。结果：1 ng/mL TPA显著增强CP对肺癌细胞增殖的抑制作用;急性毒性实验中TPA降低CP的毒性,显著延长动物的存活时间;荷瘤小鼠模型中TPA联合CP组瘤重（P<0.05）、血肌酐（P<0.05）和尿素氮水平（P<0.01）均明显低于CP组;HE染色结果显示TPA联合CP组中小鼠肾组织损伤明显减轻;与CP组相比,肾组织中丙二醛含量在TPA联合CP组中下降显著（P<0.01）,而谷胱甘肽含量和超氧化物歧化酶活性在联合组中明显上升（P<0.05）。 结论：TPA增强CP对肺癌细胞的增殖抑制作用,且抑制荷瘤小鼠肿瘤生长;TPA同时可降低CP的肾毒性,该作用可能与TPA抑制了CP引起的肾脏氧化应激有关。     

重组腺病毒Ad-PML(NLS)-的构建及鉴定

目的构建携带PML(NLS-)基因的重组腺病毒,并观察其对白血病K562细胞增殖的影响。方法以质粒pCMV-HA-PML(NLS-)为模板,PCR扩增PML(NLS-)基因,与穿梭质粒pAdTrace-TO4连接,构建重组穿梭载体pAdTrace-TO4-PML(NLS-),经PmeⅠ酶切线性化后,转化入感受态BJ5183细菌,获得重组腺病毒质粒pAd-PML(NLS-),经PacⅠ酶切后,转染AD293细胞,获得重组腺病毒Ad-PML(NLS-),经4轮扩增后,检测其滴度。采用RT-PCR法和Western blot法分别检测重组腺病毒中PML(NLS-)基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平;将重组腺病毒感染K562细胞,MTT法检测其对细胞增殖活力的影响。结果重组腺病毒质粒pAd-PML(NLS-)经PCR和单酶切鉴定,证明构建正确;经4轮扩增,重组腺病毒的滴度为1×1010pfu/ml;Ad-PML(NLS-)携带的PML(NLS-)能够在AD293细胞中稳定表达;与未感染组和空载病毒感染组相比,重组腺病毒Ad-PML(NLS-)感染的K562细胞的增殖活力明显增强(P<0.05)。结论成功构建了重组腺病毒Ad-PML(NLS-),其可促进K562细胞的增殖,表明PML(NLS-)可能具有促癌基因的作用。