碘化N-正丁基氟哌啶醇对大鼠缺氧复氧心肌细胞钠钙交换体电流的抑制作用

碘化N-正丁基氟哌啶醇(N-n-butyl haloperidol iodide,F2)为本研究室改造合成的新化合物。前期研究发现F2作为L-型钙通道拮抗剂,能剂量依赖地拮抗缺血再灌注所导致的大鼠心脏损伤。研究F2对缺氧复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)大鼠心肌细胞钠钙交换体电流的作用并探讨其保护机制。采用Langendorff灌流系统灌流SD大鼠心脏,标准酶解法消化分离得到单个心室肌细胞。正常台式液灌流5min,立即灌流充90%N2-10%CO2的缺氧液,建立体外心肌细胞H/R模型,采用全细胞膜片钳技术记录对照、模型以及不同浓度F2(0.1、1、10μmol/L)对心肌细胞钠钙交换体电流,观察H/R状态F2对心肌细胞钠钙交换体电流的影响。结果显示:缺氧抑制钠钙交换体电流主要是抑制外向电流;H/R引起钠钙交换体电流增大,尤其是外向电流的增大。F2呈浓度依赖地抑制钠钙交换体电流,钠钙交换体电流I-V曲线上移。以上表明:F2能抑制钠钙交换体电流,尤其是外向电流,防止H/R时心肌细胞的钙超载,保护心肌细胞。     

虹膜色素上皮细胞Na^＋—K^＋—ATP酶的超微结构定位

Na+-K+-ATP酶存在于细胞膜,具有进行钾钠离子交换的机能,并与细胞内离子、水物质等的输送有关,因此被称为钠钾泵[1].本文采用电镜酶组化方法对兔虹膜色素上皮细胞Na+-K+-ATP酶的分布进行了研究.     

水处理仿生膜研究进展

本文首先介绍了细胞膜中磷脂双分子层与膜蛋白的结构以及水快速传输的机理。在此基础上分别对以膜蛋白、碳纳米管和人造有机纳米孔道为水通道的仿生膜研究进展进行了综述,着重阐述了以膜蛋白为水通道的仿生膜中两性嵌段共聚物基质的优点、规模化制备面临的问题;以碳纳米管为水通道的仿生膜中水快速传输的机理与膜的制备方法;以及人造有机纳米孔道的设计方法。最后提出了水处理仿生膜所面临的挑战,展望了仿生膜发展的前景。     

壳聚糖对金黄色葡萄球菌抑菌机理的研究

体外抑菌法研究了壳聚糖分子量、脱乙酰度以及pH值对金黄色葡萄球菌(St.aureus)抑制作用的影响。通过测定壳聚糖作用前后菌液中碱性磷酸酶、β-糖苷酶活性和核酸、蛋白质含量,研究了细胞内容物的泄露以及细胞膜完整性;运用透射电子显微镜和激光共聚焦荧光显微镜从超微结构探讨了壳聚糖对St.aureus的作用位点。结果发现细胞膜是壳聚糖对St.aureus作用的位点,壳聚糖改变了细胞膜的渗透性而使细胞膜破坏,伴随大量细胞内容物泄露。     

谷氨酸发酵过程中，菌体形态会发生什么变化？

谷氨酸发酵中菌体先行繁殖,生物素由丰富向贫乏过渡。在发酵7h～10h后,生物素处于贫乏状态,长菌型细胞开始向产酸型细胞转变,通过再度分裂增殖,形成有利于谷氨酸由胞内向外渗透的磷脂合成不足的细胞膜,细胞出现伸长,膨大的异常形态,随之开始产酸。此后,异常形态逐渐增多,产酸速度加快。到发酵16h-20h,生物素基本耗完,完成了谷氨酸非积累型细胞向谷氨酸积累型细胞的转变,除去了渗透的障碍物,OD值稳定,产谷氨酸量直线上升,直至发酵结束。     

呼吸调控下的细胞膜完整性对仔姜贮藏失水的影响

通过比较包装与否对高水分仔姜贮藏失水的影响,探究裸露仔姜即使在高湿冷库贮藏依然失水严重的原因及包装控制呼吸从而抑制失水的机制。设置未包装相对湿度(relative humidity, RH)60%组、未包装RH95%组、包装[30μm双向拉伸聚丙烯薄膜(biaxially oriented polypropylene, BOPP)] RH60%组12℃下贮藏仔姜12 d,每2 d测定其感官、气体成分、呼吸强度、硬脆度、失重率、相对电导率、丙二醛含量、活性氧及相关酶活性等指标。结果表明,12 d后未包装RH60%组、未包装RH95%组、包装(30μm BOPP)RH60%组的失重率分别为47.8%、21.0%、2.5%,即包装处理能显著减少失重率的上升,并保持较高硬脆度且有良好的感官得分。同时包装能营造低O₂高CO₂环境,降低呼吸速率,从而抑制了·O₂^-及H₂O₂等活性氧的上升,且其低呼吸速率也增强了抗氧化酶(过氧化氢酶、过氧化物酶、超氧化物歧化酶)的活性,...     

稻谷储藏中细胞膜透性、膜脂过氧化及体内抗氧化酶活性变化

对国内不同储藏区域、储藏时间的120个商品稻谷样品的电导率、丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)等生理生化指标进行测定,研究了稻谷在储藏过程中细胞膜透性、膜脂过氧化及体内抗氧化酶活性的变化规律,并讨论了上述变化产生的原因及其对储藏稻谷品质产生的影响.结果表明随着稻谷储藏时间的延长和陈化的加深,细胞膜透性和膜脂过氧化程度逐渐增大和加深,而其体内抗氧化酶(POD、CAT)活性则逐渐降低.由此可见,稻谷储藏过程中发生了氧化和过氧化作用,存在自由基损伤.     

抗菌肽Met-Ala-Lys对铜绿假单胞菌细胞膜的作用机制

以抗菌肽Met-Ala-Lys(MAK)和铜绿假单胞菌为研究对象,采用NPN荧光探针法,圆二色谱法以及原子吸收光谱测定测定铜绿假单胞菌细胞膜结构的变化,探讨MAK对目标菌生长的影响作用机制。结果表明:随着MAK对铜绿假单胞菌作用时间的增加,MAK的二级结构尤其是无规则卷曲结构发生变化明显,细胞内膜(吸附速率从54.03%降至27.33%)和外膜(荧光强度在前30 min持续增强,30 min后基本稳定在45左右)受到影响,通透性明显增强,导致钾离子(从处理10 min时迅速增加)和蛋白质泄漏量(从4.65μg/m L到10.25μg/m L)以及细胞膜的疏水性随之增加,细胞表面膜电位发生变化。表明MAK能改变铜绿假单胞菌的表面特性,抑制其生长,进而起到抗菌作用。本研究为抗菌肽MAK的抗菌机理制研究奠定一定的理论基础。     

基于蓄冷剂模拟贮运的秀珍菇细胞膜损伤和酶活力变化

秀珍菇味道鲜美、营养丰富,极具商品价值,但其在采后贮藏运输过程中极易失鲜。本研究通过不同蓄冷剂与秀珍菇质量比（1∶1、1∶2、1∶4、0∶1）对秀珍菇进行模拟贮藏（室温（24±2）℃）与模拟运输实验（气温2～25 ℃）。结果表明：应用蓄冷剂能够有效保持秀珍菇的品质特征,延缓质量损失,维持秀珍菇表面色泽、细胞膜透性、超氧化物歧化酶活力、过氧化氢酶活力,保持表面细胞结构完整性,抑制丙二醛、过氧化氢积累。在模拟贮藏实验中,当蓄冷剂与秀珍菇质量比达1∶1时,蓄冷剂所营造的低温环境反而对秀珍菇的品质造成损害,从经济角度考虑,蓄冷剂与秀珍菇质量比1∶4最佳。在模拟运输实验中,1∶1组在维持秀珍菇外观特性、减少质量损失、抑制丙二醛积累、抑制细胞膜透性增加和减缓超氧化物歧化酶活力下降等方面效果最优。但在实际运用当中,需要结合贮运温度、维持时间和经济性等方面因素,确定合理的蓄冷剂使用比例。     

Bacillus pumilus HN-10抗菌肽P-1对粉红单端孢的抑菌机理

Bacillus pumilus HN-10抗菌肽P-1是一种对粉红单端孢（Trichothecium roseum）具有很强抑菌作用的肽,但其抑菌机理尚不明确。本研究从细胞膜通透性、蛋白合成和核酸合成3 方面研究其抑菌机理。通过大分子释放量和电导率研究抗菌肽P-1对粉红单端孢细胞膜通透性的影响;经胞内蛋白含量测定及胞内蛋白十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析研究抗菌肽P-1对蛋白合成的影响;采用琼脂糖凝胶电泳和荧光光谱分析抗菌肽P-1对粉红单端孢DNA的凝胶阻滞作用及与溴化乙锭（ethidium bromide,EB）竞争性结合作用,并通过DNA和RNA相对含量来研究粉红单端孢核酸合成是否受到抑制。结果表明：抗菌肽P-1可引起粉红单端孢细胞膜通透性增加,胞内电解质和大分子物质外泄;同时,菌体蛋白合成受到抑制,尤其对分子质量在43.0～97.4 kDa之间的蛋白最为明显;抗菌肽P-1对DNA没有明显阻滞作用,但其能与EB竞争性结合DNA,使核酸合成受到抑制,导致菌体代谢紊乱,影响蛋白质的正常表达,进而起到抑菌作用。