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101.
类弹性蛋白多肽因其具有特殊的相变性质,故而在重组蛋白纯化方面展现出良好的应用前景,对其发生相变的机理进行研究具有重要意义.本文利用同源建模的方法构建了类弹性蛋白多肽的三维结构并进行能量优化,之后采用分子动力学模拟手段,在300 K~400 K间5个不同温度下,对含有100个氨基酸残基的类弹性蛋白多肽[KV8F-20]各进行了6 ns的模拟.模拟过程中,类弹性蛋白多肽发生疏水缩聚,初始结构变得更加紧凑,且温度越高折叠程度越大.水分子在类弹性蛋白多肽的相变行为中起到关键作用.经分析,结果发现疏水作用与水的排出在类弹性蛋白多肽发生相变过程中起到关键作用,类弹性蛋白多肽随着温度的升高,在疏水作用驱动下,其构象折叠程度因疏水缩聚而变得更大.此外,比较不同温度下蛋白的缩聚程度,推断类弹性蛋白多肽在375 K左右发生相变,这与实验观测的结果基本吻合.据此,推测该类弹性蛋白多肽变温度范围约为95℃~102℃.这对后续调控类弹性蛋白多肽的相变具有指导作用. 相似文献
102.
嵌合蛋白sTNFRⅡ-IgG Fc纯化与生物学活性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 建立嵌合蛋白sTNFR IgGFc的纯化工艺 ,并对该蛋白的理化和生物活性进行研究。方法 嵌合蛋白sTNFRⅡ IgGFc经变性、复性后 ,用金属螯合层析进行纯化 ,纯化的蛋白进行配基结合实验和拮抗TNF活性检测。结果 该嵌合蛋白的纯度大于 95 % ,在体外能够二聚化 ,保留了sTNFRⅡ对hTNFα的结合特性 ,同单体sTNFRⅡ相比 ,对hTNFα的拮抗活性明显提高。结论 为进一步研究奠定了基础 相似文献
103.
竹红菌乙素对人红细胞膜蛋白荧光猝灭机理的研究 总被引:7,自引:0,他引:7
本文利用人红细胞膜蛋白内源荧光(主要指色氨酸),经加入不同的竹红菌乙素之后,引起了荧光猝灭现象,根据荧光猝灭原理分别从吸收光谱,荧光光谱,稳态变温实验和瞬态荧光等技术分析了上述的猝灭过程,实验证明:该猝灭是以动态碰撞过程为主要作用机理,据此作者提出了乙素可以用于生物膜体系的蛋白质荧光猝灭剂的理由。 相似文献
105.
以自制的小麦面筋蛋白为原料,采用壳聚糖与醋酸共同作用改善小麦面筋蛋白的溶解性能.确定最佳工艺条件为:醋酸pH值为3、壳聚糖添加量为0.1%(占小麦面筋蛋白干基的质量,W/W)、加热温度为70℃、搅拌时间为50 min.在此奈件下,小麦面筋蛋白的溶解度由原来的0.35 g/L提高到了7.69 g/L.此外,红外光谱分析表明,在壳聚糖添加量为0.1%时,壳聚糖对面筋蛋白产生的仅仅是物理作用而不是化学接枝作用. 相似文献
106.
重组质粒pMG36e-nisI-gfp在乳酸菌中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究将带有nisI和咖(绿色荧光蛋白)基因的乳酸菌表达载体pMG36e-nisI-gfp转化至乳酸菌中,观察其在宿主内的稳定性.对重组菌进行了菌体形态、传代培养、质粒验证等研究,考察了该质粒的稳定性.结果显示:重组菌在不含抗生素的培养基中连续传代20代后,质粒丢失率低;菌体大小和形态基本不变;质粒经HindⅢ酶切后大小不变;GFP在第0、5、10、15和20代宿主菌中都可以表达,表达量没有明显差别,在SDS-PAGE中的带型一致;初步的动物实验验证了该质粒作为遗传标记的应用效果.说明该质粒在宿主菌中具有良好的稳定性. 相似文献
107.
获得了产生拮抗绿脓杆菌抗菌蛋白的菌株。从土壤样品中筛选拮抗绿脓杆菌的菌株,采用形态学和16S rDNA分析鉴定其分类地位,采用琼脂平板扩散法测定分离菌发酵产物拮抗绿脓杆菌的活性,采用硫酸铵沉淀、分子筛分离发酵上清中的目标蛋白,测定了目标蛋白的蛋白酶敏感性、高温耐受性。结果表明:从土壤中分离出的该株不动杆菌,从其发酵产物中纯化出的目标蛋白有拮抗绿脓杆菌的活性;该目标蛋白对蛋白酶K或高温敏感,处理后可降低或丧失抗绿脓杆菌的活性,该抗菌蛋白相对分子量约35 KD。 相似文献
108.
调研了某污水处理厂3个月份的综合水质指标,利用传统的化学方法和三维荧光光谱法分析了各运行节点水质的特征,色氨酸峰荧光值与蛋白质含量具有高度线性关系,相关系数R2=0.89;色氨酸峰荧光值与COD具有较好的线性关系,相关系数R2=0.75。结果表明,三维荧光光谱法与部分有机污染综合指标具有较好的相关性,可用于污水厂水质样品的快速分析。 相似文献
109.
多糖具有抗肿瘤、免疫调节、降血糖、降血脂、抗病毒、抗凝血等多种功能,但粗多糖提纯一直存在诸多问题,糖蛋白纯化具有重要意义.本文仅就脱蛋白纯化多糖方法进行综述,目的是为纯化多糖提供前期工作文献支持. 相似文献
110.
观察Caffeine诱导骨骼肌细胞GLUT4表达的潜在分子调控机制是否是Caffeine—Ca2+-CaMKII—HDAC5信号通路。8周龄雄性Wistar大鼠42只,随机分为高碳Caffeine组(HGC)、高碳KN62组(HGK)、低碳Caffeine组(LGC)和低碳KN62组(LGK),每组12只。分别给予不同饮食加Caffeine或KN62刺激。检测caMKⅡ(Thr286)位点、HDAC5(sel498)位点和HDAC5(Ser259)位点磷酸化水平以及GLUT4蛋白表达水平。与HGc组相比LGC组GLUT4蛋白表达、CaMKⅡ(Thr286)、HDAC5(Se-98)HDAC5(Ser259)磷酸化水平都显著增加性高于HGC组和LGK组。无论是在低碳还是在高碳浓度下骨骼肌细胞GLUT4蛋白表达变化都对应着上游caMKⅡ蛋白位点(Thr286)磷酸化水平和下游HDAC5蛋白位点(Ser498)和(Ser259)磷酸化的变化,所以CaMKⅡ调节GLUT4表达的机制至少涉及到CaMKⅡ征用转录抑制子HDAC5。 相似文献