胆固醇氧化物的鉴定、制备及其对大鼠肝细胞的毒性

本文用气相色谱-质谱联用仪对胆固醇高温氧化物进行鉴定,采用硅胶柱色谱法对氧化物进行分离,并由MTT法检测其对大鼠肝细胞BRL的毒性。结果显示:胆固醇在高温下的主要氧化物有5种,分别为:7α-羟基胆固醇、7β-羟基胆固醇、5,6β-环氧基胆固醇、5,6α-环氧基胆固醇、7-酮基胆固醇。单因素实验表明在160℃下加热30 min可以产生最大量的胆固醇氧化物,并在此条件下对胆固醇氧化物进行制备。粗制品经过硅胶柱色谱洗脱收集,可得纯度约为90%的胆固醇氧化物(组成为:7α-羟基胆固醇9.96%、7β-羟基胆固醇23.24%、5,6β-环氧基胆固醇15.34%、5,6α-环氧基胆固醇14.36%、7-酮基胆固醇26.77%、胆固醇3.12%、其它杂质7.21%)。MTT法实验结果表明纯化后的胆固醇氧化物在80μg/m L浓度下对大鼠肝细胞BRL表现出显著毒性作用(p0.05),在100μg/m L时,细胞活性仅有空白对照的7.49%,胆固醇氧化物的毒性机理有待进一步研究。     

降胆固醇乳酸菌的筛选及其在内蒙古发酵香肠中的应用

通过对乳酸菌降胆固醇生物学特性及对发酵肉制品中胆固醇降解作用进行研究,结果表明,从内蒙古传统肉肠中分离筛选得到的8 株乳酸菌中,菌株X3-2B有较强的胆固醇降解能力。且在MRS培养基中添加3 g/L胆盐、20 g/L胆固醇和 20 g/L葡萄糖时菌株X3-2B的胆固醇降解能力最大,在不同培养基中发酵不同时间菌株X3-2B对胆固醇的降解能力显著高于标准菌株。在以菌株X3-2B为发酵剂的发酵香肠中,其胆固醇含量显著低于对照组。故菌株X3-2B可作为一株降胆固醇性能较好的肉制品发酵剂。     

胆固醇氧化酶产生菌TS406的复合诱变育种

利用实验室筛选得到的胆固醇氧化酶产生菌青霉TS406进行高产菌株的诱变选育,通过紫外线联合硫酸二乙酯(浓度3%)和紫外线联合亚硝基胍(1.2mg/mL)两次连续复合诱变获得了一株高产型突变株,其产酶活力从546 U/L提高到了1267 U/L,酶活提高了 273%,并利用SPSS软件分析证明了突变株的产酶稳定性.     

耐胆酸盐、降胆固醇乳酸菌的筛选

从乳酸发酵制品和发酵菌剂中分离纯化获得了25株菌，通过显微镜形态观察、革兰氏染色反应和石蕊牛奶试验证实其中10株为乳酸菌。进一步比较了这些菌株和Streptococcus thermophilis，Lactobaccillus bulgaricus的胆酸盐耐受能力以及对牛奶中胆固醇的作用效果。结果表明，多数乳酸菌可耐受低质量分数(0．1％)的胆酸盐，可以不同程度的降低牛奶中的胆固醇含量；但在含有质量分数为0．3％胆酸盐时，只有少数乳酸菌对牛奶中降胆固醇的能力有所提高。     

L-阿拉伯糖对正常及高糖高脂喂养大鼠生长及糖脂代谢的影响

目的观察L-阿拉伯糖对正常大鼠和高糖高脂喂养大鼠生长及糖脂代谢的影响。方法雄性Wistar大鼠60只,按体重和空腹血糖随机分为6组(n=10):空白对照组、高剂量对照组、模型对照组以及L-阿拉伯糖低、中、高剂量实验组,分别以普通饲料和高糖高脂饲料喂养6周,观察大鼠的体重、食物利用率,测定大鼠的糖脂代谢指标。结果L-阿拉伯糖对正常大鼠的体重、体脂、食物利用率、空腹血糖均无影响;能显著提高正常大鼠的糖耐量(P<0.01);降低正常大鼠的血清甘油三酯(P<0.05)并增高血清高密度脂蛋白胆固醇(P<0.01)。模型对照组和各实验组大鼠的体重、体脂、糖耐量、血清总胆固醇均显著高于空白对照组(P<0.05)。以87.5、175、525mg/kgBW剂量的L-阿拉伯糖灌胃高糖高脂饲料喂养的肥胖模型大鼠6周,各剂量L-阿拉伯糖均能显著改善肥胖模型大鼠的糖耐量(P<0.01),高剂量组大鼠的体脂含量明显下降(P<0.05)。结论L-阿拉伯糖能显著增强正常和高糖高脂喂养大鼠的糖耐量,降低大鼠血清甘油三酯,增高血清高密度脂蛋白胆固醇,并有降低大鼠体脂含量和减缓体重增加的趋势。     

大豆蛋白降胆固醇作用最佳剂量探讨

目的:探讨大豆蛋白降胆固醇作用适宜剂量。方法:4周龄健康雄性Wistar大鼠经2w诱发高血胆固醇后,将32只大鼠随机分为4组,分别给予10%大豆蛋白、15%大豆蛋白、20%大豆蛋白和20%酪蛋白,4w后采血测定血清TC、TG、HDL-C和LDL-C浓度。数据用SPSS统计软件进行方差分析。结果:经2w诱导高脂模型后,高胆固醇模型大鼠的TC浓度是阴性对照组的2.7倍。给以处理因素4w后,与20%酪蛋白组相比,15%和20%大豆蛋白组大鼠血清TC降低,但无统计学意义;15%大豆蛋白组大鼠血清TC、HDL-C和LDL-C浓度显著低于10%大豆蛋白组(P0.05);20%大豆蛋白组大鼠血清TG浓度显著低于10%大豆蛋白组(P0.05)。结论:4w内15%大豆蛋白和20%大豆蛋白具有相同的降低血浆胆固醇的趋势,10%大豆蛋白无降低胆固醇的作用。     

D-柠檬烯对大鼠酒精性肝损伤脂质代谢紊乱的影响

探讨D-柠檬烯（D-limonene）对大鼠酒精性肝损伤脂质代谢紊乱的保护作用及可能作用机制,利用持续酒精灌胃的方法建立大鼠酒精肝损伤模型,分为A、B、C、D、E、F、G共7 组。A组为空白对照组,每日给予蒸馏水灌胃,前2 周8 mL/（kg·d）,后4 周12 mL/（kg·d）;B组为酒精模型组,每日灌胃体积分数为50%的乙醇,前2 周8 mL/（kg·d）,后4 周12 mL/（kg·d）;C、D、E组分别为D-柠檬烯低、中、高剂量组,每日分别灌胃D-柠檬烯100、200、400 mL/（kg·d）,其中D-柠檬烯与A、B组等量的50%的乙醇混合后灌胃;F组为水和D-柠檬烯空白高剂量组,每日给予D-柠檬烯400 mL/（kg·d）;G组为甘利欣药物对照组,灌胃量200 mL/（kg·d）。HE染色和电镜观察肝组织形态结构和肝组织超微结构的变化,测定血清谷丙转氨酶（alanine transaminase,ALT）、谷草转氨酶（aspartate transaminase,AST）、碱性磷酸酶（phosoporic acid,ALP）、胆碱酯酶（cholinesterase,CHE）、甘油三酯（triglyceride,TG）、胆固醇（cholesterol,CHO）、低密度脂蛋白胆固醇（low densitylipoprotein-cholesterol,LDL-C）水平。结果电镜下观察到A组肝细胞结构正常,核呈圆形或椭圆,线粒体形态正常。B组肝细胞次级溶酶体数量增加,线粒体形状不规则,脂滴多。C组可见少量脂滴,高尔基体正常,线粒体清楚。D组少量脂滴,胆小管有内容物,线粒体正常。E组线粒体高尔基体正常,少量脂滴,核圆。F组细胞器无异常,少量脂滴。G组少量脂滴,偶见溶酶,体线粒体正常。B组大鼠血清ALT、AST、ALP、CHE、TG、CHO、LDL-C均高于空白对照组,差异显著（P＜0.05）;F组大鼠血清所测各指标与空白对照组无明显差异;而D-柠檬烯低、中、高剂量干预组和酒精模型组比较,血清所测各指标水平均有不同程度地降低,其中D-柠檬烯中、高剂量干预组血清所测各指标水平明显低于酒精模型组,差异显著（P＜0.05）。结论：过量酒精摄入引起的肝组织超微结构病理损伤与升高血清ALP、CHE、ALT、AST、TG、CHO、LDL-C水平,在D-柠檬烯干预下有所减轻和降低。因此,D-柠檬烯可调节过量酒精摄入造成的脂质代谢紊乱。     

山楂黄酮提取及降血脂研究

目的:研究山楂黄酮提取工艺以及山楂黄酮对降低血脂的作用。方法:采用乙醇超声波提取方法提取山楂黄酮,及山楂黄酮对大鼠降血脂作用的研究。结果:山楂黄酮提取条件:溶剂:70%乙醇;超声波频率: 40kHz;超声波作用时间:15min;料液比:1:40倍。结论:乙醇超声波提取方法具有操作简单、提取时间短、纯度高、得率高等特点;山楂黄酮能够降低高血脂大鼠血清中胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇的含量,升高大鼠血清中高密度脂蛋白胆固醇的含量。     

具有胆固醇降解能力的人源乳酸菌筛选及其特性研究

研究旨在筛选出具有降胆固醇能力的人源乳酸菌,为开发良好的乳酸菌产品提供依据。对公司自建菌库中的28株人源乳酸菌中进行胆固醇降解率的初步测定,筛选出3株降解能力较高的乳酸菌进行耐酸耐胆盐的特性试验,最终确定一株具有胆固醇降解能力及特性良好的人源乳酸菌。结果表明,28株人源乳酸菌中讲解率较高的6株乳酸菌分别为来自婴儿粪便源的格氏乳杆菌F020、F024和来源于母乳源格氏乳杆菌B1-26、B1-29以及母乳源罗伊氏乳杆菌B1-27、B1-28。对这6株乳酸菌进行体外胆固醇降解试验得到F024对胆固醇的同化量最高达到25.92%,F020的沉淀量最高达到了10.49%;B1-28的胆盐水解酶活性最高。将格氏乳杆菌F020、F024以及罗伊氏乳杆菌B1-28进行耐酸耐胆盐试验,pH 1.5时,3株乳酸菌均不耐受,pH 2.0和pH 3.0 3 h时,格氏乳杆菌F020的存活率超过100%;在0.3%的胆盐培养基中,格氏乳杆菌F020 3 h存活率达到102.94%。本实验最终选出胆固醇降解率高并且特性良好的格氏乳杆菌F020,为进一步开发乳酸菌产品提供良好依据。     

三鹿降血脂奶粉调节血脂作用的研究

观察了三鹿降血脂奶粉调节血脂的作用。用Wistar品系雄性大鼠60只随机分为6组,全部饲以高脂饲料,在此基础上分别饲以蒸馏水、普通奶粉及3个不同剂量的降血脂奶粉。实验期45d,实验前后测量体重,并采用酶法测定血清总胆固醇(TC)、总甘油三酯(TG)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)。结果表明,实验前后的各组大鼠体重均明显增加,但各实验组间无显著性差异(P>0.05)。处理组大鼠血清TG水平显著低于对照组(P<0.05或P<0.01);高剂量降血脂奶粉组大鼠血清HDL-C水平显著高于对照组(P<0.05);各组大鼠血清TC水平则未见有显著性差异。结论,三鹿降血脂奶粉对实验大鼠体重无影响,但可以显著降低TG并可显著升高HDL-C水平。