新型Kdo2-lipid A合成菌株构建及其免疫生化活性研究

脂多糖(LPS)是革兰氏阴性细菌外膜的主要组成部分,由疏水的Kdo2-lipid A和亲水的多糖长链组成,能激活先天性免疫系统。Kdo2-lipid A是LPS的生物活性中心,能被开发为新型疫苗佐剂。本研究在前期菌株基础上敲除与LPS庚糖合成相关waaC-waaF基因,构建了直接合成特殊结构Kdo2-lipid A、不含多糖长链的突变株BW003。通过薄层层析和电喷雾电离质谱技术鉴定了BW003合成的Kdo2-lipid A结构;HEK-Blue h TLR4细胞和THP-1细胞刺激实验证实突变株及其合成的Kdo2-lipid A的细胞毒性均明显减弱;生化表型分析结果表明BW003较野生型呈现出更高的外膜渗透性、抗生素敏感性、疏水性及自凝集能力。本研究为后续新型疫苗佐剂开发和产业化利用奠定了理论基础。     

头孢曲松钠对小鼠肠道菌群组成及代谢的影响

采用头孢曲松钠灌胃诱导小鼠肠道菌群失调,研究抗生素对小鼠肠道菌群组成及代谢的影响。通过宏基因组分析小鼠肠道菌群组成;气相色谱法测定小鼠粪便中短链脂肪酸的质量分数;ELISA试剂盒测定小鼠血清中脂多糖浓度。抗生素灌胃后可引起小鼠粪便中厚壁菌门增加,拟杆菌门减少;乙酸、丙酸和丁酸等短链脂肪酸质量分数下降;血清中脂多糖浓度升高。抗生素造成的小鼠肠道菌群紊乱,可导致有害菌的丰度增加并抑制益生菌生长;肠道菌群紊乱可导致短链脂肪酸质量分数下降及脂多糖浓度升高,促进炎症的发生。     

岩藻糖对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

研究岩藻糖对卡介苗(Bacillus calmette-guerin,BCG)和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的免疫性肝损伤小鼠的保护作用。将30只小鼠分为5组,每组6只,第1天除正常组外,其余小鼠尾静脉注射BCG;第2天岩藻糖低、高剂量组分别灌胃20、100 mg/(kg·d)岩藻糖,阳性对照组灌胃0.1 mg/(kg·d)地塞米松,正常组和模型组小鼠灌胃等量蒸馏水,连续给药14 d,末次灌胃2 h后,除正常组外其余小鼠尾注射LPS;计算小鼠脏器指数,用试剂盒测定血清中谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)及过氧化氢酶(catalase,CAT)活力,检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)、NO、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)含量;肝组织苏木精-伊红染色并观察;Western blot法测定肝组织核浆分离后核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、核因子-κB抑制剂α(inhibitor of nuclear factor-κBα,IκBα)含量。结果显示,与模型组相比,高剂量岩藻糖能显著减少脏器指数(P0.05),显著降低ALT、AST活力和MDA、NO、TNF-α、IL-1β、NF-κB含量(P0.05),显著提高SOD、CAT活力及IκBα含量(P0.05);病理切片显示肝脏病变得到逆转,与正常组接近。实验结果表明岩藻糖对免疫性肝损伤小鼠有明显的保护作用,可能通过NF-κB/IκBα信号通路来实现。     

食品中微生物源毒素检测方法研究进展

食品中的微生物源毒素是指由微生物代谢产生的毒素,主要包括肽类毒素、脂多糖内毒素、霉菌毒素、生物胺和脂肪酸氧化产生的醛类化合物等。通过介绍国内外学者对这几种毒素的检测方法,在对聚合酶链反应技术、酶联免疫检测技术、高效液相色谱法、固相微萃取-气相色谱-质谱法和固相微萃取-气相色谱-嗅觉法等检测方法综合分析的基础上,评述上述方法的特点和适用条件,并总结食品中的微生物源毒素检测技术的研究进展。     

中国拟青霉对小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的:研究中国拟青霉(CN-802) 对小鼠免疫性肝损伤的保护作用及其对T 淋巴细胞亚群的影响。方法:小鼠尾静脉注射卡介苗加脂多糖(BCG+LPS) 建立免疫性肝损伤模型, 检测其肝、脾重量和转氨酶活性, 并同时测定血清与肝组织中脂质过氧化物(LPO) 含量及T 淋巴细胞亚群数量。结果:CN-802 连用10 d 后可减轻其增大的肝、脾重量指数, 降低小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT) 水平, 降低其血清与肝组织中LPO 含量, 并增加外周血中T 细胞亚群CD₄ 数量和CD₄/CD₈ 比值。结论:CN-802 对小鼠免疫性肝损伤模型有保护作用, 其作用可能与调节细胞免疫有关。     

GSH是调控LPS引起细胞死亡的关键物质（英文）

LPS侵入机体后,会引起机体全身炎症反应,进而加重机体细胞的死亡.研究表明LPS可引起机体细胞出现铁死亡、凋亡、坏死和自噬,这些细胞死亡方式或许是并存的,这进一步加重了器官脏器的损伤.研究发现,在这些细胞死亡发生时,细胞内GSH水平也出现明显的变化,在逆转细胞死亡后,GSH也随其发生变化,这说明引起细胞死亡的根本原因在于细胞内氧化应激的发生,GSH作为细胞内最关键的抗氧化物质之一,在抗氧化应激方面发挥着重要作用.有研究表明,外源性的提供GSH以提升细胞内的GSH水平时,可以达到逆转细胞死亡的目的.故细胞内的GSH可成为LPS引起机体细胞死亡的关键调控物质.     

细菌内毒素检测方法的研究进展

细菌内毒素作为一种强力的热原物质,极微量即可对人体健康产生严重影响,能引起发热、微循环障碍、内毒素血症、内毒素休克和弥散性血管内凝血等,严重者会造成死亡。因此,对医药产品进行内毒素检测至关重要。近年来,由于对鲎的过度捕捞以及环境的恶化等,我国鲎的数量急剧减少,现已将其列为国家二级保护动物,传统的鲎试验内毒素检测法将逐渐被替代。随着研究的不断深入,开发出一系列快速、灵敏、准确的新型内毒素检测方法。本文对各类内毒素检测方法(重点介绍了重组C因子法、生物传感器检测法等新型方法)、各自的优缺点及发展方向作一综述,以期使新型检测技术得到更广泛的开发和应用。     

甘油磷酸肌醇胆碱盐抗敏感抗炎体外功效研究

以RBL-2H3肥大细胞模型测定了甘油磷酸肌醇胆碱盐对肥大细胞脱颗粒的影响;在PMA诱导的THP-1巨噬细胞模型上进一步测定了甘油磷酸肌醇胆碱盐对脂多糖诱导下的促炎因子、趋化因子释放的影响。结果表明,甘油磷酸肌醇胆碱盐在0.3%浓度时可显著抑制肥大细胞脱颗粒,从而表现出抗敏感活性;在0.01%～0.3%浓度内甘油磷酸肌醇胆碱盐可显著抑制炎症因子IL-6、TNF-α的释放,在0.1%～0.3%浓度内可显著抑制趋化因子IL-8、炎症因子IL-1β的释放,从而表现出优异的抗炎活性。     

咖啡果壳多酚的提取及抗氧化和抗炎特性

咖啡果壳是咖啡生产中的主要副产品,富含多酚类物质,然而目前人们对其开发利用有限。作者以咖啡果壳为原料,对其富含的多酚进行提取纯化和表征,研究其抗氧化活性,并通过建立脂多糖（lipopolysacchride,LPS）诱导的Caco-2细胞炎症模型来探究多酚的抗炎作用。结果显示,LX-17大孔树脂的纯化效果优良,纯化的咖啡果壳多酚主要成分为3,4-二羟基苯甲酸（15.78 μg/mg）,绿原酸（37.85 μg/mg）和生物碱咖啡因（55.82 μg/mg）;抗氧化测定显示提取的多酚具有良好的抗氧化活性,对DPPH自由基、ABTS+自由基和羟基自由基都具有极强的清除能力;在细胞炎症模型中,5~200 μg/mL的纯化多酚均能抑制LPS诱导的细胞炎症因子的表达（IL-6、IL-10、IL-1β、TNF-α）,为咖啡果壳多酚的提取纯化和综合利用提供了理论基础。