柚叶总黄酮对LPS所致Caco-2结肠上皮细胞间高通透性的保护作用

探讨柚叶总黄酮(PLTFE)对脂多糖(LPS,2 μg/mL)诱发Caco-2高通透性细胞模型的保护作用。Caco-2模型细胞以不同浓度的PLTFE(0、10、50、100、150 μg/mL)处理培养24 h进行后续实验。MTT法测定细胞生存率,细胞乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)水平依说明书使用试剂盒测定。酶联法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定白介素(interlukin-1β,IL-1β)、IL-8和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)分泌水平。跨上皮细胞电阻(trans epithelial electrical resistance,TEER)值和异硫氰酸荧光素-右旋糖酐(FD40)透过度用于评估细胞通透性水平。实时定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测细胞IL-1β、IL-8、TNF-α、闭锁蛋白(Occludin)、紧密连接蛋白-1(claudin-1)、封闭小带蛋白(ZO-1)和肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)的mRNA表达。结果表明,柚叶总黄酮能显著提高受损细胞生存率至86.1%,抑制受损细胞中LDH的溢出(p<0.05)。同时还能有效抑制受损细胞中炎性细胞因子(IL-1β、IL-8、TNF-α)的分泌及mRNA转录。此外,柚叶总黄酮可增强细胞紧密连接因子(Occludin、claudin-1、ZO-1)的mRNA转录,抑制MLCK的mRNA转录,改善细胞间高通透性qRT-PCR法检测细胞中相关因子的mRNA转录水平。结果提示,柚叶总黄酮具有较强的抗炎活性,能通过上调细胞内细胞紧密连接相关因子的mRNA转录显著改善LPS造成的Caco-2细胞间高通透性的发生(p<0.05)。     

草苁蓉多糖对脂多糖诱导的小鼠J774A.1巨噬细胞炎症反应的抑制作用

该文探讨草苁蓉多糖(Boschnikia rossica polysaccharides, BRPS)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的小鼠J774A.1巨噬细胞炎症反应的抑制作用。将小鼠J774A.1巨噬细胞随机分为正常组、模型组、BRPS组(剂量分别为25、50、100 mg/L),用细胞增殖毒性试剂盒检测J774A.1巨噬细胞存活率,酶联免疫吸附法检测细胞培养液中的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平。用免疫印迹法测定环氧合酶-2(COX-2)、Toll样受体4(TLR4)、白介素-1受体相关激酶4(IRAK4)、髓样分化因子88(MyD88)以及核转录因子-κB(NF-κB)蛋白表达情况。结果表明,LPS在100～2 000μg/L浓度范围时对J774A.1巨噬细胞存活率无影响,但能够上调小鼠J774A.1巨噬细胞炎症因子TNF-α和IL-6的分泌,此结果提示J774A.1细胞炎症模型构建成功。BRPS对LPS诱导的J774A.1细胞存活率无影响;但是能抑制LPS诱导的J774A.1巨噬细胞...     

绿豆肽对脂多糖诱导急性肺损伤小鼠肺组织的保护作用

为评价绿豆肽(mung bean protein hydrolysate,MBPH)在机体中的抗炎作用,采用鼻腔滴注脂多糖法构建急性肺损伤小鼠模型,通过小鼠肺组织病理学变化、肺组织湿干质量比、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活力、细胞因子表达量、肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)的蛋白质量浓度和中性粒细胞数等指标评价MBPH的抗炎作用。结果表明:MBPH能缓解肺组织的损伤,改善模型组肺组织的状态,且MBPH呈剂量依赖性的方式降低肺组织湿/干质量比及其MPO活力,降低BALF的蛋白质量浓度、促炎性细胞因子的含量和中性粒细胞的数目;高剂量MBPH组与5 mg/(kg m_b·d)地塞米松组对于急性肺损伤小鼠的抗炎效果相近。结论:MBPH具有抗炎作用,其抗炎作用可能是通过减轻肺水肿和肺微血管渗漏、改善肺组织的病理学变化、减少BALF中中性粒细胞浸润及抑制炎性细胞分泌细胞因子来发挥其对急性肺损伤的保护作用。     

改良热酚水法制备大肠杆菌O157∶H7脂多糖抗原的研究

采用热酚水法提取肠出血性大肠杆菌（EHEC）O157∶H7的脂多糖（LPS）,经浓缩酶解,离心分离得纯化LPS,酸解制得O-特异性侧链（O-PS）,能有效去除核酸及杂蛋白,抗原具有鲎试剂凝集活性及对产蛋鸡有较强的免疫原性,建立了一种改良热酚水法提取制备O157∶H7特异性脂多糖抗原的方法.     

嗜水气单胞菌脂多糖提取及毒性研究

以嗜水气单胞菌脂多糖(LPS)为研究对象,采用热酚水法提取及酶解法、氯仿/甲醇沉淀法纯化,测算LPS产率及样品中蛋白质、核酸含量,SDS-PAGE电泳银染法分析纯度。并通过巨噬细胞Ana-1模型来评价纯化LPS样品的毒性和生物活性。结果显示,纯化后LPS产率为1.22%,蛋白质含量为1.53%,核酸为0.79%,SDS-PAGE主要条带清晰,位置与LPS标准品相同。经纯化LPS样品处理后Ana-1细胞活力降低了21.20%,Ca~(2+)荧光强度为1.67±0.19,与LPS标准品数据无显著性差异(P0.05)。说明该试验提取、纯化得到的LPS样品纯度高,且有较高毒性与生物活性。     

一种用于化妆品原料筛选的人原代角质细胞炎症模型的建立和应用

通过系统性地研究脂多糖（LPS）对人原代角质细胞的细胞活性、IL-1α、IL-8及ROS等与皮肤炎症密切相关指标的影响,开发了一种基于人原代角质细胞的皮肤炎症模型。结果显示,0.01～100μg/mL LPS对人原代角质细胞活性没有较大影响,100μg/mL LPS能同时诱导人原代角质细胞产生大量IL-1α和IL-8,0.01μg/mL LPS能诱导产生大量ROS。因此,建立了对不同炎症指标使用LPS进行差异化诱导的人原代角质细胞皮肤炎症模型,同时用此模型对样品OSM2021041301进行检测,发现样品OSM2021041301能显著抑制LPS诱导升高的IL-1α、IL-8水平,而对LPS诱导升高的ROS水平有较弱的抑制作用,说明此样品对LPS及其类似物诱导的IL-1α、IL-8及ROS升高而引起的炎症具有一定的抗炎作用。     

姜黄素抗牙龈卟啉单胞菌脂多糖机制

牙龈卟啉单胞菌脂多糖是慢性牙周炎发展过程中至关重要的毒力因子之一。姜黄素是姜黄的活性成分,其拥有强有力的抗炎活性并能调节多种细胞信号通路,有控制炎症和骨吸收的潜能。     

谷物中生物活性脂多糖的定量分析研究

研究发现被谷物脂多糖激活的东方鲎变形细胞溶解物，具有水解Ｂｚ－Ｖａｌ－Ｇｌｙ－Ａｒｇ－ＰＮＡ，Ｂｏｃ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ａｒｇ－ＰＮＡ和Ｂｏｃ－Ｖａｌ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－Ａｒｇ－ＰＮＡ等对硝基苯胺肽类底物的酰胺酶活性，这些肽类底物的羧基端都为Ｇｌｙ－Ａｒｇ顺序，利用东方鲎变形细胞溶解物和Ｂｚ－Ｖａｌ－Ｇｌｙ－Ａｒｇ－ＰＮＡ底物，建立了定量分析谷物及其产品中脂多糖的方法，分析结果表明，米粉和米糠的脂多糖     

高分子生物表面活性剂Emulsan的研究进展

详细介绍了高分子生物表面活性剂Emulsan的生物合成、物化性质以及在稠油管道运输和油罐清洗中的应用。Emulsan是醋酸钙不动杆菌RAG-1代谢产生的胞外脂多糖,它不能显著降低油-水的界面张力,而是分布在油滴的表面,有效地阻止它们的聚并,使O/W型乳状液稳定,从而有助于它在石油工业中的应用。并对Emulsan研究方向及应用发展趋势进行了展望。     

高分子生物表面活性剂性质的初步研究

采用醋酸钙不动杆菌QL22～5在以乙醇为唯一碳源的无机盐培养基中发酵生产了一种相对分子量为8．798×10^5的水溶性聚合物。红外光图谱结果表明该聚合物是一种含亲水多糖链和疏水脂链的脂多糖型表面活性剂（HBS-1）。进一步研究HBS-1的增稠性、表（界）面张力和对柴油的乳化性能,结果显示质量分数0.1％的HSB-1水溶液在20℃、45、下的粘度为114．4mPa．S,具有较好的增粘性能。50℃w（HBS-1）=0．05％溶液的表面张力为57mN／m,与煤油的界面张力为13．8mN／m,w（HBS-1）=0．1％可完全乳化柴油。可见HBS-1作为高分子表面活性荆降表（界）面张力的能力并不显著,但它能乳化柴油并稳定乳状液。