应用定量动态浊度法检测牛血清中的内毒素

目的　应用定量动态浊度法检测牛血清中细菌内毒素。方法　应用BET 32B型细菌内毒素测定仪 ,应用定量动态浊度法检测牛血清中内毒素含量。同时与鲎试剂凝胶法进行比较。结果　采用该法可定量检测牛血清中内毒素含量 ,变异系数≤ 10 % ,快速简捷 ,一次检测样品多 ,稳定性好 ,精确度、灵敏度高 ,可以在 0 0 0 1～ 10EU/ml的范围内定量 ,与鲎试剂凝胶法测定结果比较 ,符合率达 96 2 %。结论　应用BET 32B型细菌内毒素测定仪 ,采用定量动态浊度法检测牛血清中内毒素的方法准确性好 ,性能稳定 ,具有广阔的应用前景。     

检测疫苗中小牛血清残存量ELISA试剂盒的研制

目的　建立一种简便、灵敏、特异、准确的疫苗中小牛血清残存量检测方法。方法　采用ELISA双抗体“夹心法” ,即固相载体上包被特异性抗小牛血清抗体 ,加入待测样品 ,反应后再加入酶标记抗小牛血清抗体 ,经显色后测定。结果　固相载体最适包被抗体的量为 1μg/孔 ,反应体系的pH为6 .8～ 7.2 ,两步反应的最佳时间各为 1h ,最适温度为 37℃。检测的最适抗原 (小牛血清 )范围为 2 0～ 10 0ng/ml,该试剂盒的灵敏度为 3ng/ml ,变异系数CV(n =2 8孔 /次 )平均为 5 .7%。经检测 6批疫苗的结果与放免结果相符合。结论　该法特异性强 ,灵敏度高 ,为疫苗中小牛血清残存量的检测提供了一种新方法     

6省市28株钩体菌株血清学检定及2个新型菌株的发现

目的　为了解洪涝灾害对钩端螺旋体 (钩体 )病流行菌型的影响 ,在我国钩体病流行比较严重的省市地区进行菌株分离观察。方法　采用经典的显微镜凝集试验和交叉凝集素吸收试验进行血清学分类比较。结果　 6省市的 2 8株钩体菌株分属 7个血清群 9个血清型 ,其中发现 2个新的血清型 ,暂定为贺岩型和沅江型 ,代表菌分别为L2 31株和沅江 2 7株。结论　对流行区的 2 8株钩体菌株进行了血清学分类 ,为钩体病的诊断提供了新的依据。     

WuT3无血清培养上清中单克隆抗体纯化工艺的建立

目的对WuT3杂交瘤细胞生物反应器无血清培养上清中单克隆抗体进行分离纯化,建立中试分离纯化工艺。方法采用两步离子交换层析法结合硫酸铵盐析法分离纯化WuT3单抗。在通过小量试验优化纯化参数后,进行中量试验和中试放大。结果建立的纯化方法可以放大到中试规模,每批投料30000ml培养上清,可收获单抗达1.5g,单抗总回收率大于60%。经分离纯化后,单抗IgG纯度大于95%,采用免疫荧光法检测抗体活性合格。结论建立了一条生物反应器无血清培养杂交瘤细胞大规模分离纯化单抗的工艺路线。     

养鸭场血清1型鸭疫里默氏杆菌分离与鉴定

鸭疫里默氏杆菌是引起鸭传染性浆膜炎的病原,目前国内外已经报道有超过21种血清型。该菌感染谱广,不但可以感染鸭,还可以感染鹅、天鹅、鸡、野鸭、猪等动物。对某鸭场25—30日龄鸭罹患传染性浆膜炎进行了病原分离,经形态观察、血清学实验及聚合酶链式反应,证实了该养鸭场感染的RA为血清1型;SEM观察RA呈"草履虫"形态;PCR扩增得到1 046 bp大小条带;药物敏感实验表明其对头孢唑啉、环丙沙星、丁氨卡那、利福平高度敏感,相继采用头孢唑啉和利福平治疗后迅速控制了疫情发展。     

人血清淀粉样蛋白A1原核表达及胶体金检测方法的建立

通过胶体金免疫层析技术建立一种特异、便捷、快速的SAA1定量检测新方法.利用大肠杆菌BL21(DE3)原核表达人血清淀粉样蛋白A1(SAA1),根据BL21(DE3)表达偏好性设计并合成SAA1蛋白基因片段,构建表达载体pET-28a-SAA1,采用CaCl2法制备BL21(DE3)感受态,热激转化法将pET-28a-SAA1转入到BL21(DE3).经表达条件优化,获得重组蛋白最佳诱导表达条件:温度30℃,时间6h,转速180rpm/min,培养基pH 7.0,IPTG浓度0.4mM,诱导表达后目的蛋白经SDS-PAGE电泳鉴定,Ni柱纯化、透析、浓缩从而获得浓度为8.09mg/ml,纯度为85%的SAA1.同时,结合胶体金标记技术,建立了SAA1胶体金免疫层析试纸检测方法,线性范围0.16~500μg/ml,最低检测限0.16μg/ml,该研究为临床体外诊断SAA1快速检测提供技术基础.     

不同品系北京鸭血清前白蛋白多态性的研究

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳法研究了北京鸭的血清前白蛋多态性,在2个位点观察到多态,Pam位点为单态,在Pas位点发现有5种表现型,它们的频率是：Pas2-2O 26．67％,Pas1-2为12％,Pas2-1为45.33%,Pas1-1为2．67％,Pas2-0为13．33％,在Paf位点发现有4种表现型,它们的频率是：PafF为29．33％,PafS为41．33％,PafFS为10．67％,Paf0为18．67％,并计算了它们的基因频率,群体平均杂合度和遗传距离,遗传分析表明,樱桃谷鸭和奥白星鸭遗传结构相似,而与B系北京鸭遗传结构有明显差异。     

抗狂犬病血清致过敏反应及血清病的探讨

128例犬咬伤患者注射抗狂犬病血清后,过敏反应发生率为3.91％(5/128);血清病发生率为11.72％(15/128)。过敏反应的主要症状为头晕、恶心、面色苍白;血清病的主要症状为局部及周身荨麻疹、表浅淋巴结肿大、恶心、食欲不振等。血清病有明显的年龄特点,0～19岁儿童和青少年发生率为4.0％,20岁以上成年人为13.59％,二者差异显著。     

糖-蛋白质饮料对男力量运动员一次抗阻运动后部分血清指标的影响

为探讨糖-蛋白质补充对一次性抗阻运动恢复过程的影响.文中以18名男子力量项目运动员在一次抗阻运动前、运动中和运动后,分别摄入糖-高蛋白饮料(HP组=6人,糖:蛋白质=3∶1)、糖-低蛋白饮料(LP组=6人,糖∶蛋白质=6∶1)或纯糖对照饮料(C组=6人).在运动前、运动后即刻、运动后3h和运动后次日晨采集血样,测定血清肌酸激酶(CK)、天门冬氨酸转移酶(AST)、谷丙氨酸转移酶(ALT)、尿素(BU)以及睾酮(T)和皮质醇(Cor).研究结果表明:运动后3h和运动后次日晨C组CK水平显非常著高于HP组和LP组(P0.01,分别),运动后次日晨LP组CK水平显著高于HP组(P0.05);运动后3hC组ALT水平显著高于HP组和LP组(P0.05,分别);运动后即刻C组Cor水平显著低于HP组和LP组(P0.05,分别);各时间点T、AST及BU水平组间比较无差异性.摄入糖-蛋白质饮料能促进男性力量项目运动员抗阻运动后机体运动能力的恢复和提高.摄入糖-高比例蛋白质更有利于运动后疲劳的恢复和机体运动能力的提高.     

血清C-反应蛋白在小儿支原体肺炎鉴别诊断中的临床观察

目的:观察血清C-反应蛋白(CRP)水平在小儿细菌性肺炎和支原体肺炎中的临床改变,探讨提高小儿支原体肺炎诊断符合率的检查方法方法:选择确诊为肺炎的患儿158例,根据其他实验室检查及临床疗效,分为细菌感染组82例和支原体感染组76例,比较两组患者就诊时血清CRP水平及治疗过程中血清CRP改变情况结果:细菌感染组与支原体感染组血清CRP阳性例数和就诊时血清CRP水平比较,差异具有高度统计学意义(P＜0.01);细菌感染组惠儿血清CRP水平与治疗天数呈正相关性(r=0.833,P＜0.01)结论:在小儿肺炎的诊断及治疗过程中,应积极行血清CRP,可提示患儿肺炎类型并指导临床治疗.