响应面法优化液态复合酶制备香蕉汁工艺条件研究

研究了纤维素酶系(B型)的酶添加量、酶解温度、酶解时间和反应体系pH对酶解香蕉制备香蕉汁的影响,并通过响应面中心组合实验设计原理对结果进行了优化,确定了优化工艺参数为:酶添加量1.75μL/g,酶解温度55℃,酶解时间为150min,反应体系pH即为香蕉原浆pH。在此条件下,香蕉汁的澄清度达到98.0%。      

陶瓷膜复滤古龙酸超滤液中试研究

利用陶瓷膜进一步浓缩古龙酸超滤浓缩液,考察了复滤过程中的运行压力、温度、复滤时间、洗水量等因素对膜通量和古龙酸收率的影响,并对膜污染和清洗方法进行了研究。结果表明,在运行压力0.30MPa,温度40℃,古龙酸料液进一步浓缩3倍的条件下,加0.67倍水,反算收率可达96.9%,滤渣的酸量降为进料的1/10,滤渣中的酸残留总量约为3%,整个过程膜过滤平均通量维持在24.5~26.5LMH,符合工业化生产实际需要。而且实验期内,古龙酸料液未对陶瓷膜造成不可逆污染,利用市售碱性清洗剂清洗,通量可以基本完全恢复。      

山奈酚抑制α-淀粉酶作用的研究

采用酶动力学方法和荧光光谱法研究山奈酚对α-淀粉酶的抑制作用。在pH6.8、37℃条件下反应20min,山奈酚（1mg/mL,0.05mL）对α-淀粉酶（0.328U/mL,0.2mL）催化活性的抑制率达到24.39%。该抑制过程是以非竞争性方式进行。同时,山奈酚对α-淀粉酶的内源荧光产生有规律的猝灭作用,以静态猝灭方式为主。二者自发结合形成复合物,其主要作用力为疏水作用,有1个结合位点。      

四角蛤蜊废弃肉渣制备ACE抑制肽的工艺研究

采用胰蛋白酶水解四角蛤蜊废弃肉渣制备ACE抑制肽。以体外ACE抑制率为指标,在单因素实验的基础上,通过响应面法优化酶解工艺。结果表明,胰蛋白酶水解四角蛤蜊肉渣制备ACE抑制肽的最佳工艺条件为:酶解温度48℃,pH为8.50,胰蛋白酶加入量为0.60%,酶解时间为2h,酶解产物的平均ACE抑制率为77.08%,与预测值77.22%的相对误差为0.18%,证明响应面法对于酶解肽工艺优化具有指导意义。      

黑木耳酪氨酸酶的分离纯化与酶学性质研究

本文分离纯化了黑木耳酪氨酸酶,并对酶学性质进行了研究。采用经硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-100和DEAE-Sepharose-FF柱层析对粗酶液进行分离纯化,得到电泳纯的黑木耳酪氨酸酶,比活力提高了21.43倍,酶活回收率为27.41%。该酶的酶学性质研究表明:蛋白亚基分子量为12.62ku;最适pH7.0,在中性和碱性条件下稳定;最适温度为40℃,50℃以下温度条件较为稳定;以酪氨酸为底物,米氏常数K m为5.88mmol/L,V max为64.10μmol/min。实验结果表明黑木耳酪氨酸酶具有其它酪氨酸酶相似的酶学特性。      

灵芝酸Me提高多药耐药性KB-A-1/Dox细胞对阿霉素敏感性的初步研究

通过多药耐药性KB-A-1/Dox细胞,研究了灵芝酸Me逆转其多药耐药性的效果及可能机理。结果表明:灵芝酸Me对耐药型肿瘤细胞有细胞毒性并诱导细胞凋亡,具有剂量依赖性。经5μg/mL灵芝酸Me处理后,可部分逆转KB-A-1/Dox细胞对阿霉素的多药耐药性。12μg/mL灵芝酸Me处理可使多药耐药性细胞内阿霉素和Rhodamin123含量分别增加100%。以上结果提示灵芝酸Me能提高多药耐药性肿瘤细胞对阿霉素的敏感性,其机制可能与通过膜转运蛋白P-gp提高细胞内药物的累积量和诱导细胞的凋亡有关。本结论为辅助肿瘤化疗的功能食品研究或逆转多药耐药性药物的先导化合物研究提供了理论依据。      

哈密瓜中青霉菌产细胞壁降解酶的条件及致病机理初步研究

以哈密瓜中青霉病原菌为研究对象,从培养时间、温度、起始pH、碳源和氮源几方面进行单因素实验,再设计正交实验对其产细胞壁降解酶的条件进行优化。旨在研究青霉病原菌产细胞壁降解酶的种类及其产酶的最佳优化条件,为进一步研究青霉病原菌产细胞壁降解酶对哈密瓜的致病作用奠定一定的基础。结果表明,在离体培养条件下产生的多聚半乳糖醛酸反式消除酶(PGTE)和果胶甲基反式消除酶(PMTE)两种酶活性均较低,病原菌产纤维素酶(Cx)最佳优化条件:培养时间为4d,培养基起始pH为6.5,碳源浓度为1.5%,氮源浓度为1.0%,此最佳优化条件下Cx的酶活性为358.12U/mg。      

大蒜果聚糖∶果聚糖1-果糖基转移酶的酶学特性

大蒜中主要干物质为多糖,其中主要糖类为果聚糖,具有多种保健作用。本文研究了大蒜中果聚糖∶果聚糖1-果糖基转移酶（Fructan∶fructan 1-fructosyltransferase,1-FFT）的酶学特性,为阐明大蒜在采后贮藏、保鲜及深加工过程中果聚糖含量的变化提供依据。结果表明:当以1-蔗果三糖为底物时,1-FFT仅催化生成蔗果四糖,且无其它结构的四糖生成;大蒜1-FFT主要存在于40%⁵0%硫酸铵部分;其最适p H为6.0,在p H 5.5⁶.5条件下1 h内保持稳定;最适温度为25℃,在15²5℃条件下1 h内可保持稳定;低浓度Mn²⁺、Mg²⁺、Fe³⁺促进1-FFT活力,Cu²⁺、Zn²⁺、Ag⁺抑制1-FFT活力;1-FFT活力随底物浓度升高而增大,其米氏常数Km=0.6977 mol/L,最大反应速率Vmax=116.23μg/h。大蒜1-FFT活力受p H、温度、不同金属离子及底物浓度影响,调节以上因素有助于调控大蒜果聚糖代谢、保持大蒜品质及延长大蒜贮藏期。      

酶解水牛奶制备抗凝血肽的工艺研究

目的:本文以新鲜水牛奶为原料,研究木瓜蛋白酶、中性蛋白酶及碱性蛋白酶复合酶解、混合酶解水牛奶的作用,比较不同水解方式的作用效果;并采用凝血酶滴定改进法测定水解液抗凝血活性。方法:分别进行三种蛋白酶单因素水解实验,确定各种酶的最适水解条件;在此基础上进行复合酶解与混合酶解实验,测定水解度和抗凝血活性。结果:木瓜蛋白酶的最适水解条件为:水解温度60℃、水解时间2.0 h、p H5.0、料水比1∶2（v/v）、酶用量6000 U/（m L底物）;中性蛋白酶的最适条件为:水解温度40℃、水解时间3.0 h、料水比1∶2（v/v）、p H6.0、酶用量6000 U/（m L底物）;碱性蛋白酶的最适条件为:水解温度50℃、水解时间4.0 h、料水比1∶2（v/v）、p H8.0、酶用量6000 U/（m L底物）。复合酶解法制备的水解液其抗凝血活性均高于混合酶解,最高抗凝血活性为52.0 ATU/m L。结论:本实验条件下,加酶组合为\     

龙眼漆酶基因(DlLac)的克隆及表达分析

以‘石硖’龙眼为试材,采用RT-PCR结合RACE技术成功克隆一个龙眼漆酶基因全长c DNA序列,命名为Dl Lac,NCBI登录号为KY051551。Dl Lac基因序列全长1898 bp,编码576个氨基酸,NCBI比对结果显示其与荔枝漆酶氨基酸序列同源性最高,高达94%;进化树结果显示龙眼漆酶氨基酸序列与荔枝漆酶氨基酸序列具有高度同源性。氨基酸保守序列结果表明龙眼漆酶氨基酸序列含有漆酶的3个典型保守结构域,分别为:Cu-oxidase-3、Cu-oxidase和Cu-oxidase-2。结合龙眼果实在常温、低温贮藏条件下,果皮褐变与Dl Lac的表达关系,推测Dl Lac的上调表达可能对龙眼果皮褐变起促进作用。