铁皮石斛叶多酚提取工艺优化及其清除自由基活性

采用响应面法优化铁皮石斛叶多酚的提取工艺,并考察铁皮石斛叶多酚对自由基的清除作用。结果表明：最优铁皮石斛叶多酚提取工艺条件为乙醇体积分数50%,液料比36∶1（mL/g）,超声功率350 W,提取时间37 min,提取温度60℃,提取2次。在最优条件下铁皮石斛叶多酚提取量为34.15 mg/g。铁皮石斛叶多酚可以有效清除羟自由基、超氧阴离子自由基及DPPH自由基,铁皮石斛叶多酚自由基清除率随着多酚质量浓度增加而升高,其对羟自由基、超氧阴离子自由基及DPPH自由基的半数清除率（IC50）分别为0.554、0.775 mg/mL及0.596 mg/mL,较同浓度的VC弱。     

提取温度对霍山石斛多糖理化性质及肠道黏膜免疫活性的影响

目的:研究提取温度对霍山石斛多糖提取量、理化性质以及肠道黏膜免疫活性的影响。方法:在不同提取温度(40、60、80、100℃)条件下水提醇沉法提取霍山石斛多糖(Dendrobium huoshanense polysaccharides,DHP),并测定多糖提取量和特性黏度;采用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)、气相色谱(gas chromatography,GC)、傅里叶变换红外光谱(Fourier transform infrared spectrometry,FTIR)技术分析霍山石斛多糖及其阴离子交换色谱水洗组分和盐洗组分的分子质量分布、单糖组成和特征基团;以体外培养的小鼠小肠Peyer结细胞的培养液对小鼠骨髓细胞增殖作用为指标,测定多糖及其分级组分的肠道黏膜免疫调节活性。结果:DHP的提取量随提取温度的升高而增加,但其特性黏度呈现下降趋势。HPLC分析表明不同温度条件下提取的多糖均由高分子质量(higher molecular weight,HMW)和低分子质量(lower molecular weight,LMW)两种组分所构成,LMW热稳定性好、主要存在于阴离子交换色谱的水洗脱组分(water-eluted fraction,DHPW),HMW热稳定性弱、主要存在于阴离子交换色谱的盐洗脱组分(salt-eluted fraction,DHPS);GC和FTIR分析显示,DHPW主要由呈α-构型的葡萄糖所组成、不含糖醛酸,DHPS主要由呈β-构型的葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖和甘露糖所组成,且含糖醛酸;不同温度提取的DHP及其阴离子交换色谱DHPW和DHPS均表现出肠道黏膜免疫调节活性,且DHPS比DHPW具有更强的肠道黏膜免疫调节活性,但它们的活性均随提取温度的升高而下降。结论:不同提取温度不仅影响DHP的提取量,而且可明显改变DHP的特性黏度、分子质量分布、单糖组成和肠道黏膜免疫调节活性,较高的提取温度在提高DHP提取量的同时显著降低DHP中HMW比例,进而导致多糖肠道黏膜免疫调节活性的下降。     

铁皮石斛水提物对高脂血症小鼠血脂和血糖的影响

研究铁皮石斛水提物对高脂血症模型小鼠降血脂的作用。以正常小鼠为对照,将高脂血症昆明小鼠分为高脂模型组、铁皮石斛低、中、高剂量组和辛伐他汀组阳性药物对照组、分别进行灌胃处理,测定小鼠体重,血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)。结果表明:铁皮石斛水提物能有效降低高脂血症小鼠血清中总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C),提高小鼠血清中高密度脂蛋白(HDL-C),有效降低低密度脂蛋白(LDL-C)/高密度脂蛋白(HDL-C)的比率。与模型组相比,辛伐他汀与铁皮石斛对高血脂症及其引发的高血糖有辅助治疗作用。     

紫皮石斛西洋参颗粒的研制及增强免疫力功能评价

以紫皮石斛、西洋参为主要原料,研制具有增强免疫力功能的颗粒剂。通过正交试验,筛选最佳提取工艺;试制紫皮石斛西洋参颗粒,并进行增强免疫力功能评价。正交试验结果表明紫皮石斛西洋参颗粒的最佳提取工艺为:西洋参先用30倍量70%乙醇回流提取3 h,再与紫皮石斛一起加30倍量水,提取2次,每次4 h。增强免疫力功能实验结果显示其具有增强小鼠免疫力的功能。紫皮石斛西洋参颗粒具有良好的开发保健食品的潜力。     

大苞鞘石斛和铁皮石斛多糖提取及其免疫调节作用比较

为比较大苞鞘石斛与铁皮石斛多糖对机体免疫调节作用的差异,经提取纯化,分别得到2种石斛不同纯度的粗多糖、精多糖和多糖水洗组分。对昆明小鼠灌胃上述6种纯度的多糖,观察其对小鼠免疫器官指数、迟发性变态反应、抗体积数和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力等免疫学指标的影响。结果表明,纯度最高的大苞鞘石斛多糖水洗组分与铁皮石斛多糖水洗组分含有7种单糖,其中甘露糖和葡萄糖的含量均最高。两种石斛同等纯度多糖的各指标值相近,且随多糖纯度的提高,各指标值逐渐增大,免疫活性逐渐增强。经两种石斛的多糖水洗组分灌胃后,两组小鼠的胸腺指数和脾脏指数相近,耳肿胀率、抗体积数和腹腔巨噬细胞对鸡红细胞吞噬指数差异虽不显著,但均显著高于对照。上述结果表明,与铁皮石斛多糖相比,大苞鞘石斛多糖具有与其相近的免疫调节作用,因而具有良好的药用开发价值。     

霍山石斛苯丙氨酸解氨酶的分离纯化及基本性质的研究

对霍山石斛(Detrdrobium huoshanense C.Z.Tang et S.J.Cheng)中的苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia lyase,PAL EC.4.3.1.5)进行了部分分离纯化和性质研究,取组织培养试管苗经过冰浴研磨、硫酸铵分级沉淀、DE-52阴离子交换层析,分离纯化苯丙氨酸解氨酶.经过测定,苯丙氨酸解氨酶的纯化倍数为2.33,蛋白质得率0.41%,酶得率1%.霍山石斛苯丙氨酸解氨酶在硼酸缓冲液中最适PH为8.4,PAL最适反应温度为45℃.霍山石斛苯丙氨酸解氨酶的最适底物浓度为2mmol/L,有两个Km值,即Km1为0.4425×10-2mol/L,Km2为0.847×10-4mol/L.     

高速逆流色谱分离铁皮石斛中芥子酸的研究

运用高速逆流色谱技术从铁皮石斛中分离制备出芥子酸,为石斛属内首次分离得到。分离采用的溶剂体系为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(4∶6∶3∶7,体积比),上相做固定相,下相做流动相,流速2 m L/min,转速800 r/min,检测波长280 nm。单次进样石斛提取物200 mg,分离出纯度为93.11%的芥子酸20.34 mg,固定相保留率46.67%。体外抗氧化结果显示,芥子酸有较强的DPPH自由基清除能力,IC50为0.046 mg/m L。     

霍山石斛多糖对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用

该研究探讨了霍山石斛多糖（cDHP）对Lewis肺癌荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用。用Lewis肺癌细胞建立肺癌荷瘤小鼠模型,观测cDHP对小鼠生长情况、肿瘤体积、抑瘤率和脾淋巴细胞增殖能力的影响,并测定肿瘤细胞凋亡比例、脾脏免疫细胞（T细胞、Treg细胞、B细胞、树突状细胞和巨噬细胞）比例及血清细胞因子（CEA、IL-1β、IL-10、IL-2、TNF-α、VEGF和TGF-β）含量的变化。cDHP高369.00 mg/(kg•d)、中184.50 mg/(kg•d)、低92.25 mg/(kg•d)剂量组的抑瘤率分别为64.52%、50.47%、37.68%。cDHP的抗肿瘤作用表现在其能够提高荷瘤小鼠肿瘤细胞凋亡比例、改善荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖能力、调节荷瘤小鼠脾脏免疫细胞比例和血清细胞因子的平衡。cDHP可通过不同方式影响肿瘤生长,结果为霍山石斛的开发利用提供了实验依据。     

石斛米酒的研究及风味分析

以铁皮石斛和糯米为原料,研究了不同糯米精米度、石斛添加量及添加方式、加曲量、加水量对石斛米酒理化性质及感官评分的影响,并分析了石斛米酒与对照酒间的挥发性物质差异.结果表明,石斛米酒的生产条件为精米度70％,熟石斛添加量3％,加曲量0.5％,加水量1.5倍.添加石斛后,酒体中挥发性物质组分增加5种.在上述条件下制得的石斛...     

铁皮石斛发酵酒的工艺优化研究

该试验主要研究了芽孢杆菌（Bacillus）和酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）发酵制备铁皮石斛酒的工艺参数。以铁皮石斛 为主要原料,通过单因素及正交试验优化铁皮石斛发酵酒的生产工艺。 结果表明,其最优生产条件为芽孢杆菌∶酿酒酵母菌=1∶10（V/V）,菌种活化液添加量为2%,发酵温度为30 ℃,发酵时间7 d。 在此工艺条件下,制得的铁皮石斛发酵酒色泽均匀,口感适宜,入口柔和,香气宜人,感官评分可达97.5分,总酸为9.3 g/L,酒精度为5.13%vol。